CHEMOTHERAPY 146 MAY1965 新テトラサイクリン誘導体Tetracycline-L-methylenelysineに関する基中沢礎的研昭究三東京大学伝染病研究所天野翠・池上田鶴子・和佐敏夫京都薬科大学微生物学教室 (昭和39年9月1日本論文の要旨は第12回るTetralysa1"シ日本化学療法学会総会に於けンポジウムアンケートとして,ま昭和39年7月18日京都に於ける第45回た日本抗生物質学術協議会関西支部会に於いて報告した。は Tetracycline一じめであるL一りも速かに且つ高い血中濃度が得られ,また臨床的に低い投与量を用いて良好な治療成績が収められている。そ胃腸障害などの副作用が軽微であることも大きな特徴との研究陣によつて合成された新しいテトラサイクリンの誘導体で,テ須アミノ酸の1つ液中への拡散が極めて速かに且つ有効に行なわれると言われ,人体に経口投与した場合にもテトラサイクリンよして吸収が良いこと及び投与量が少くて済むことのためにレmethylenelysine(MLTC)は1959 年伊Carlo-Erba社受付) トラサイクリンと必述べている。さて私共の教室に於ても本物質の基礎的研究を開始し, リジンをホルムアルデヒド第1表の存在下に作用させることによつて得られる物質で,次のような構造式を有しているが,メチレン橋の正確な結抗菌スペクトラム種菌 TC 合位置は未だ明らかにされていない。 2.5 2.5 2.5 2.5 StaPh.albus 5.0 5.0 StaPh.citreus 5.0 5.0 Strept.hemelyticμs 0.0312 0。0312 s〃cinalu彦ea 0.312 0.312 DiPlo、Pneu脚niae皿 0.0312 0。0312 N.gonorrhoeae 0,0625 0.0625 StaPh.a彿reus209・-P Tetracycline-L-methylenelysine StaPh.aureus寺 NH ., CHs>CH3 CH2 HN d略苧 CH2 CH2 サ CH2 ヨ一CH2一＼/>1＼/＼CONH21illOHII NH2CH OHOOHO 一・H 本物質は淡黄色の粉末で200℃ dOOH 一H 以上で徐々に分解し PRM-TC 島 0.0625 0.0625 B,sub彦iJi3 0.625 0.625 0.625 0.625 ハr.meningi彦観s ながら溶融する。比旋光度[α 瑠=-195。土4。(0.5%水 β.anthγacis 溶液)10%水ある。 E.coliN田 10 10 A.aerogenes 10 10 Sal伽nel彦atyPhi 5 5 3勿8θ 5 5 溶液に於けるpHは7・6で分子量602.64実験式C2gH3sOloNsで紫外吸収スペクトルはテトラサイクリンと近似している(0,1NH2SO4中の最大吸収272rnμ,355mμ)◎ 〃σdssenteriae 5 5 Shigellaboydii 10 10 Shigellasonnei 5 5 2,5 2.5 Shigella/lexneri2a 本物質はメチールアルコール(6・2mg/ml),エルコール(1.3mg/m1)にチルアは可溶であるがエチルエーテル,アセトソ,クロ β ホルム,ベには不溶である。Carlo--Erba社ンゼンなどの有機溶媒の説明によれば本物質 V.comma Pγo彦eusvulg匪の水に対する溶解度は非常に大きく,その19は0・4 Raeruginosa m1の水に溶解し,この溶解度はピロリジノメチルテト〃`3 >50 >50 >50 >50 α 。≠召≠σ擁 0,078 0.078 ラサイクリンの約2倍であり,塩酸テトラサイクリンの α.welchii 0.156 0.156 約20倍,テ α.加トラサイクリン塩基の約5・000倍である。更に生理的pHので,血範囲内で沈澱を析出することがないの液や組織液中で安定であるばかりでなく組織や体彦協伽 μ甥 M.tuberc乞elosis607 1。25 1.25 2.5 2.5 MレTC 2.5 2.5 5.0 5.0 0.0312 0.312 0.0312 0.0625 0.0625 0,625 0.625 10 10 5 5 5 10 5 2.5 >50 >50 0,078 0.156 1.25 2.5 (mcg/m1) 00 望 1 〃 < -3 25 ユ 6 5 3 〃価吋〃︿ 00 讐上〃〃〃 -1 56 ︿ 12 00 噌上〃〃〃〃凝〃 11 5 12 25 〃ユ 3 り 10 26 ︿ハりむ〃 -ーベリら〃 2 ハリー0 〃く〃トりハリ 10 ハ〃潔く " "旛 " " " "駅 " " "働 "駅 " " 讃 1 "潭 98 〃 47 出 "" 価 48 麗P { U ハU つよ < 2 AU ﹁己 0 噌主 5 ウ臼朔⊥ 5 ㏄ 1 ハV (V -ゐ 0 O 1 49 (U ハU ーム 50 ウ召 -凸 51 AU AU 望← 〃 < 5 く 2 1 11 < 99 "ヴ晒 ∩V 噌⊥ 幽 k 〃晒写 " ヴ厚 " "潔〃; 〃 (U - 5 9餌ハ◎ 5 2 ﹁ム 0δ 46 〃 5 98 〃 97 "斑 96 7 鰍〃〃〃働吋 5 潟 6 95 5 2 1 翼︾ 9U 1 PO 9召 ρ ◎ 1 〃 11 躍〃〃厚 92 9 3 94 戸○ 2 ハ◎ 嬬〃 11 45 0 00 望上 91 5 9創 1 5 F O 9創 1 0 φ ウθ 濃U 1 5 2 1 44 9 〃 < の ◎ F ひ 2 9G " " " " "詑 89 ノ " 43 8 〃 88 〃 5 轟 ◎ F O ウ耐 1 " 轟 5 42 6 00 1 87 "" "晒 "眠 " ヴ評 86 5 5 2 0 ﹂ユ〃2 〃 5 2 5 9賀噌← " 0 2 3 0 ﹁鳳可ム AU ハU 1 1 41 株 1209一 θ篇3 St.aγ 摩鴻 "脳 "ボ 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 F り 1 1 ""窺 F ◎ 2 5 2 ; 2 6 ﹁為〃 9 36 37 3 8 39 40 5 〃詳 1 2 3 74 75 7 7 7 5 く〃 0 ハU ー 25 2 5 ﹂ 5 ﹂ 0 3 2 3 0 1← 1 O 6 0▼ 1 腰 η徽 5 9μ 留ー〃 31 32 33 34 35 4 ⋮ 6 7 9 9 0 6 6 6 6 7 5 5 (V 0 雪よ 2 〃汐く eO 瀞0 2 < 0 0 ー 26 2 7 28 29 30 3 〃〃詳 1 2 3 4 5 6 6 6 6 6 5 み ◎ 25 ユ 3 21 22 23 24 % 25 5 25 〃 -- -1 5 ユ 2 18< 5 2 3 6 3 0 2 1 0 ﹁ム 1 2 〃〃〃価"η"器 """那壽欝0 2 1 6 2 5 ー- 蒲ユ 5 1 3 2 1 16 ∬ 18 19 20 2 f 鍵藩 5 ウ臼ヴーヴ a 饗﹂ 9臼 FO ﹁⊥ 3 6 0 6 0 6 雪⊥ 3 6 6 26 25 5 5 < ﹂ < ユユ 2 0 3 0 3 1 ー 0ム 0 噌 ⊥ 11 12 13 U 15 6 25 〃 5 ユ 1 3 5 6 7 8 9 10 8 畷⋮ 1ー〃 80 9召戸0 ﹃0 2 3 4 5 6 7 8 9 0 5 5 5 5 5 5 5 5 6 α N 6 5 2 1 3 % 〃〃﹂ 2 ユ 2 < 2 く潟〃〃浩 F ◎ 2 ε 陣ユ 2 3 4 恥 7 MレTC PRM-TC 株 TC MレTC 板希釈法)mcg/ml 患者分離病原ブドウ球菌に対する感受性(平第2表毎C PRM一 TC 株菌 147 CHEMO↑HERAPY VOし.13NO.3 CHEMOTHERAPY 148 第3表菌剖TC 患者分離赤痢菌に対する感受性(平 PRM-TC ML-TC 25 100< ' ' " 29 30 〃 31 100< 32 " 〃 50 100< 100< 33 〃 36 12.5 100< 37 25 25 38 〃 100< 100< 39 12。5 40 〃 'ノ 100< 〃ノ ' 11 0 0 1 〃 'ノ 100< 25 〃 25 100< 25 100< 43 6.25 44 〃 45 46 6.25 100< 〃〃 25 6、25 42 η η 6.25 6。25 〃 25 6.25 41 25 50 100< ' ' 25 " "k " 10 6.25 50 100〈 '''" 〃 100< 12.5 100< 25 6.25 100 100< 6.25 100< 25 100< 50 100< 6.25 35 〃 100 100< ζり 2 〃 100 100< ρ ' ' 6.25 100< 25 100 12.5 34 25 25 MレTC ' ' 12.5 }No.28 " 12.5 100< 。 PRM-TC 劇TC 25、 " 〃 100< 1菌板希釈法)mcg/m1 ' ' 1 2 3 4 5 6 7 8 9 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 0 1 2 3 4 5 6 7 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 2 2 2 2 2 2 2 O N 100< 25 100〈 MAY1965 〃〃 12。5 12.5 〃 25 100 100< 49 " 25 100< 25 100< 50 100 51 25 25 25 100〈 100< 25 6.25 52 25 100〈 100< 25 25 12.5 6.25 53 Sh.ノlexn〃`2a 100< 100< 6.25 48 〃 " 12.5 100 47 〃 25 12.5 100 100 100 12.5 12.5 12。5 本剤が従来のテトラサイクリン群抗生物質に比し何らか性株であつた。そして残りの57株(57×)のの特徴が認められるものであるかどうかという点についの3者間の抗菌力は殆んど同程度で差異は認められなかて各方面より検討した結果,2,3のつた。知見が得られたので妓に報告する。 3)患実験は本物質と比較検討するためPyrrolidinomethy1- 者分離の赤痢菌に対する感受性昭和39年市立京都病院に於て分離された53株 tetracydine(PRM-TC),Tetracycline(TC>の2者痢菌に対する3者の感受性は第3表を全く同一条件のもとで同様検討した。る。53株 1)抗菌力ならびに抗菌スペクトラムその成績は第1表 TC3者中20株に示す如く,ML-TC,TC,PRM- 4)抗 TC.PRM-Tc,ML-TC3者昭和38∼39年にわたり東大伝染病研究所,東大中央検てStaPhylocoecusをに対する感受性を調べた。その成績は第2蓑定でPRM-TC,ML-TCに TC,ML--TC3者の分離株中43株(43%)はTC,PRM何れにも100mcg/m1以上の高度耐の溶液1,000mcglml の安定性について5℃,30℃,37℃ は第4表(そ即ち,100株の感受菌作用に及ぼす諸因子の影響査室,東邦医大などで分離された病原ブドウ球菌100株に示される。何耐性で残り33株なかつた。る0 者分離の病原ブドウ球菌に対する感受性に示される如くであ性株の3者間の抗菌力は殆んど同程度で差異は認められグラム陽性菌の全部,大部分のグラム陰性菌に有効であ 2)患の赤はTC,PRM-TC,ML-TC3者れにも100∼>100mcg/mlのは全く同じ抗菌力,抗菌スペクトラムを有し, 感受性株 ℃,37℃ の3条件につい試験菌として検討した。その成績の1∼3)に示される如く,TCが最も安ついては殆んど同程度に30 の条件において力価の減少が認められた。次に培地に対する血清蛋白による抗菌力への影響にっ CHEMOTHERAPY VOL.13NO.3 3 3 3 7.8 7.8 7.8 8 ﹂ 4 7.8 2 7ξ 7.8 ig 7.8 ,/ 渉〆 7.8 2 ヴー 8 2 ∠ーワ曜 7.8 剛器 7.8 4 8 9臼﹂ 4 4 2 4 2 7.8 控 7.8 8 1 8 噌 ⊥ 7.8 7.8 2 噸 ■ 2 8 1占噌 ⊥ 2 噌 - 7.8 糞器 6 6 6 7.8 〃eus209ヂ }ll 7.8 7.8 Sfaph//ococcus∂ 90 7.8 7.7 7.8 3 感難 7.8 7.8 第1図Te†racycllne群抗生物質に対するフ下ウ球菌の耐性獲得状態 0 0 0 7.8 欝 c 巖性劇時間邸罪感受性性灘ウリ時間定粥は 5℃ 安㏄の 60 1 0 ツ C 液助㌍溶α 第4表 (その1)TC 149 7.8 継代臼数 (mcg/ml) 第2図Teナracycline群杭生物質に射する溶血しンサ球菌の耐性獲組状態 (その2)PRM-TC 5℃30℃37℃ 感受性時間感受性時間感受性 0 0 0 , 時間 3 6 6 7.8 2 1 2 1 7.8 8 1 6.8 8 4 8 ームり歯 4 4 2 7.8 8 4 7.8 2 7 7.8 2 ワ8 7.80 7.8 15.63 15.6 15.66 31。25 15.612・ 31.25 31。2518 32.25 31.2524 31.25 62.548 62.5 62.572 62.5 3 7.8 7.8 竃感受桟 ω (mcg/ml> 5 ー aOI '10 5 (mcg/m1) 継代日数その3)ML-TC 30℃ 5℃ 時間感受性時間感受性時間 7.8 15.63 15.6 15。66 15.6 15。612 15.6 6 6 15.6 2 1 2 1 15.6 15.6 8 4 1晶 2 8 4 1轟 2 7.80 3 3 15.6 15.6 2 7. 15.6 8 2 ∠鷹ワ曜 8 4 15。6 感受性 2 郵 0 0 7.8 第3図Tetrδcycllne群抗生物質に対する肺炎球菌の耐性獲得状態 37℃ 31.2518 31.25 β1。2524 31.25 31。2548 6.25 31.2572 6.25 の t 霧、 5 1 められないが25%に ML-TC TC o.1 5 間殆んど差異は認め加では殆んど抗菌力に影響は認より1/2,50%にぶ確認された。次に培地pHのより1/4の滅少影響については,第6表継代を比較検討した。その成績は第5表の如く,3者られず1%∼10%,添 __"廓廟_一齢一。-PRIv1-TC (用cgゾ瀦) (mcg/ml) いてTC,PRM-TC,ML-TC3者必 ω ・αusp,ワα〃・n・ie-ta Io 日数 3者間に殆んど差異はなかつた。最後にこれら3者の Diskによる阻止帯の大きさについて検討した結果は , 第8表に示される如く,各濃度段階について3者間に殆んど大きい差異は認められなかつた。に示す如く,やはり3者問に全く差異は認められず,酸 5)耐性側で抗菌力の増強が認められた。増量的継代法によるブドウ球菌また菌量による影響についても第7表に示される如く性獲得状態球菌のTC,PRM-TC,ML-TCに溶血レンサ球菌肺炎対する試験管内耐性 CHEMOTHERAPY 150 第4図(¥のDマ MAY1965 ウス実験的アドウ球菌感染症に対するτC群抗生物質の効果第5表 5fd)ev5/oceccus∂eteusPtemaan (謂 100 訳時間後各asmg/マウス(po) ㌔・一一・一一一一一一一一抗菌作用におよぼす血清の影響 StaPhソloceccusaureus209-P 一一一一一一骨一一・-PRM-TC 麗し丁C TC PRM-TC ML-TC 50% 25 25 25 25% 12.5 12.5 12.5 50 生存率 ( 堵) 10% 6.25 1% 6.25 12.5 6.25 6.25 6.25 Cσnt. 6.25 6.25 6.25 (mcg/ml) 第6表観察日戴讃後1:各 α05m蜘ス(sc) ＼㌔一＼9樽糟櫓轍噛讐鱒ML炉TC 0.19 0.19 0.19 0。78 0.78 0.78 6.25 6.25 6.25 6.25 6.25 イC 6.25 12.5 12.5 12.5 t n O C ＼_。___,___鱒____櫛_____畠_PRtv;・ MレTC PRM-TC TC 5 6 6 8 第4図(その2)マウス実験的フ窄ウ球菌感染症t:"aするTC群抗生物賃の動果溜1醐抗菌作用におよぼすpHの影響 StaPh夕lococcusaureus209-P t (mcglml) 第7表毒5。妻＼ )' 抗菌作用におよぼす菌量の影響 StaPhyteeoceusaureus209-P 薬剤 PRM-TC TC ML-TC 菌量＼＼ 12.5 12.5 12.5 1.4×106 12。5 12.5s 12.5 2.1×10s 12.5 25 25 7×105 観寮日敗一第5図マウス溶血しンサ球菌感染症に文彊るTC群抗生物質の効果 18翻嗣日禰=各 α5mヅマウス(RO) 5frepfec・ccushe〃 (mcg/m1) ・6・伽5323 ioo 第8表『1禰、、顯一in'■ 一訳・一一顯PRM-・TC TC 14.5 -鳥 ¶← 16 (mm) 観察日数rゆ TCに獲得状態を比較検討した。その成績は第1,2,3図に示される如くである。比しTC,ML-TCの上昇曲線は低くinvitro耐性獲得については3者のテトラサイクリン群抗生物質中本剤の耐性化は一番ゆるやかである事が認められた。、即ちブドウ球菌については15世代継代の結果,3者の上昇曲線は全く差異は認められず溶血レンサ球菌についてはPRM-TC,TCに 15 50 mcg/m1 Qり -鳳 MレTC 7 蔭 00 1 1 PRM-TC 100 mcg/ml 9臼 ■← 鱒_葡________ 200 mcglm1 ハ6 噌⊥ 50 生存率 (驚 ) 一ブドウ球菌に対するTetracycline 群抗生物質含有Diskの阻止円の比較 Staψhptlecoccusaureus209-P 一ML-・TC 比しML-TCの上昇はやや低く差異が認められた。また肺炎双球菌についてはPRM一 6)生体内抗菌作用マゥス実験的細菌感染症に対する3者の治療効果の比較検討を行なつた。感染菌はブドウ球菌,溶血レンサ球菌,肺炎双球菌の CHEMOTHERAPY VOL.13NO,3 151 ' 第6図(その1)マウス曳験的肺炎球薗感染症1=対するTC群抗生物質の効果 3種でそれぞれ薬剤は経口または皮下に投与し, その延命効果を観察した。まず体重16∼179純 1脚微系マウス1群10匹の各々蝋麟㎎/マりス(P。) 0卿c・ccuspneum・nlcte-∬ '燃にブドウ球菌StaPhylecocc%saureusNewman 株を5LD5。静脈内に感染せしめ,1時間後にTC, 各々o.5mg/マウス1回経生 PRM-Tc,ML・-TCの 50 ・存口投与し,無処置の対照群とその延命効果を比較した。その成績は第4図(そ ML-TCのの効果はTCとの1)の如く, ほぼ同程度の著明な＼N 効果が得られた ◎ この場合PRM-TCの -一`一成績が最も有効であつた。績は第4図(そウス皮下に注射した場合の成の2)の如くML-TCが次でPRM--TC,TCは一一・一一■・一・-PRM-TC 10 観察臼敗一一次に同様な感染実験に於てこれらの薬剤を1時問後にo・05mg/マ蔭一一嘘一・一虚一一画・一一■・」一一・一第6図(その2>マウヌ実験的肺炎球菌感染症に対するTこ群抗主物賃の効果最も有効, }0酬同程度の効果であつた。鯛後働厳に各 α25mg、々ウス(S・C) ioO 然しながら以上のブドウ球菌感染症に対する3者の効果は大きな見地からすれば,効果の上で余り轟ii 大差はない様に思われる。 50 生存率次にマウス溶血レンサ球菌感染症に対する治療効果については、同様に実施した ◎ 即ち100LD5Gの (駕 ) 溶血レンサ球菌StreptOcoccushemelyticusS23をマウス腹腔内に接種し,1時聞後に薬剤をo。5mg/ 一一一一一一一一一一一MしTC P脳1L Tcl マウス経口投与しその延命効果を観察した。その成績は,第5図観察日敗に示す如く,この場合前者のブドウ球菌感染症の場合と異なり,ML-TCのれており,TC,PRM-TCの効果は特に優延命効果と遙かに差異が認められた。であるが,上記同様に100LD5。内に接種し,1時の感染菌をマウス腹腔間後と6時閲後の2回各2.5mg計5 試験管内における抗菌力ならびに抗菌スペクトラム,患者分離を皮下に注射した場合の2通の1)おりについて検討した。そのな治療効果を示し,TC,PRMTCと量などの影響Disk濃度による阻止帯の大ささ,耐性獲得状態などの面につい cyclineなよび(その2)に示される如くである。両実験群を観察すると明らかにMレTCが作用に及ぼす血清蛋白,pH,菌抗菌ては従来のPyrrolidinomethyl-tetracyclineやTetra- 経口投与した場合と,各々0・25mg計0.5mg 成績は第6図(そ lenelysineについて基礎的研究を行なつた結果の病原ブドウ球菌,赤痢菌に対する感受性は勿論次にマウス実験的肺炎双球菌感染症に対する治療実験 mgを一一ゆ顕著の間に可成りの差異どと全く同一成績が得られたが,安ではPyrrolidinomethy1-tetracyclineと Tetracyclineよ定性の面殆んど同様にり不安定であつた。しかしながらマウス実験的感染症に対する治療効果については,はべた本剤の吸収,排池じめに述臓器内濃度その他の特徴ある諸が確認された。以上の動物実験の結果,溶血レンサ球菌性質によるためと思われるが,Tetracycline,Pyrrolid- 肺炎双球菌感染症に対しML-TCの inomethyl-tetracyclineの2者 PRM-TCの2者生体内効果が,TC, より確かに優れている事実が確認出来た。1・DECARNERIらはマウス溶血レンサ球菌感染症に対するTC,PRM-TC,ML-TC3者明らかにPRM-TC り優れた成績を得ており,私どもの成績もま伊CarloErba社認された事は注目すべきである。稿を終るに当り,本研究に協力された京都薬科大学微生物学教室,横田芳武,江本栄子両助手に厚くお礼申上げます◎ たこれと一致している。お薬剤よりも遙かに溶血炎双球菌感染症に対して著明な効果が確の経口投与による治療効果を比較検討し,ML-TCはやTCよレンサ球菌,肺わりにの研究陣によつて合成された新しいテトラサイクリンの誘導体たるTetracycline-L・-methy一参考文献 1)第12回日本化学療法学会Tetralysa1総ポジウム講演予講集。会シン 152 CHEMOTHERAPY 2) I. DE CARNERI,et al. : A new soluble tetracycline : tetracycline-L-methylenelysine. II Farmaco. Ed. Pr., 16, 2: 65 (1961) 3) I. DE CARNERI: Pharmacological properties MAY 1965 of combinations of tetracycline with amino acids, in particular tetracycline-L-methylenelysine. Giorn. Malatt. Infett. Parassit., 19, 614 (1961)