SPE Technical Note 7 培養黄体細胞中のロイコトリエンB4の分析 GL Sciences Inc. ロイコトリエン（Leukotriene）は、細胞内で5-リポキシゲナーゼによってアラキドン酸から合成される生理活性物質です。ロイコトリエン群には、LTA4、LTB4、LTC4、LTD4、LTE4およびLTF4の6種類があり、それぞれ気管支喘息やアレルギー反応に関与している重要な物質です。とりわけLTB4は炎症反応を知る上で標識となる対象物質であることから、生化学的にその濃度が測定されてきました。 1. 固相前処理のフロー図【ロイコトリエンB4の構造】 OH OH O OH Leukotriene B4 Structures are created using Chemistry 4-D Draw which is provided by ChemInnovation Software, Inc. 【ロイコトリエンB4の前処理例】培養液 0.4 mL 酢酸エチル / メタノール（2：1）2 mLを加えて混和冷却遠心分離（3000 rpm, 4 ℃, 10 min）水層石油エーテル 2 mLを加えて混和した後、再度冷却遠心分離コンディショニング水層 50 mmol/L酢酸緩衝液（pH 4.0）3 mLを加えて混和 ① メタノール 5 mL ② 水 5 mL C8* (100 mg) ＊：InertSep LSC C8など洗浄 ① 水 5 mL ② n-ヘキサン 5 mL ③ n-ヘキサン / 酢酸エチル（95：5）5 mL 溶出 n-ヘキサン / 酢酸エチル / エタノール（30：65：5）5 mL 濃縮乾固窒素気流下、35 ℃ RIA 参考資料 : Acta Obst Gynaec Jpn., Vol.42（1990）バックナンバーやアプリケーション検索はこちらから・・・ http://www.gls.co.jp/sp.html GL Sciences SPE Technical Note 2. 固相抽出関連製品【InertSep® C8】 Si-(CH2)7CH3 平均粒子径炭素量エンドキャップ表面積細孔容積細孔径 pH使用範囲：：：：：：： 60 µm 12 % ○ 450 ㎡/g 0.7 mL/g 60 Å 2～8 InertSep C8 は、オクチル基をシリカゲルに結合しているため、C18 より弱い無極性相互作用が利用できる固相です。C18 では保持が強すぎる疎水性の高い化合物に適しています。また、高度なエンドキャッピング処理により、シラノール基による陽イオン交換相互作用が抑えられているため、塩基性化合物の吸着が少なくなります。ラージサイズカートリッジ LSC 品名カラムサイズ入数 Cat.No. 100 mg 50本 5010-63081 200 mg 50本 5010-63082 500 mg 50本 5010-63083 今回のおすすめ InertSep LSC C8 【GL-SPE吸引マニホールドシステム】セット内容 GL-SPE吸引マニホールドシステム一般分析用 GL-SPE吸引マニホールドシステム環境分析用・GL-SPE吸引マニホールド・ダイアフラム真空ポンプ・吸引ろ過ビン 1 L ・バキュームホース 2 m ・ホース接続コネクター・ストップバルブ・共栓目盛り付きスピッツ管12 mm ・共栓目盛り付きスピッツ管16 mm ・GL-SPE吸引マニホールド・ダイアフラム真空ポンプ・吸引ろ過ビン 1 L ・バキュームホース 2 m ・ホース接続コネクター・ストップバルブ・LSチュービング 6本入・共栓目盛り付きスピッツ管12 mm ・共栓目盛り付きスピッツ管16 mm ×1 ×1 ×1 ×1 ×2 ×12 ×12 ×12 品名 ×1 ×1 ×1 ×1 ×2 ×12 ×1 ×12 ×12 入数 Cat.No. GL-SPE吸引マニホールドシステム一般分析用 1式 5010-50001 GL-SPE吸引マニホールドシステム環境分析用 1式 5010-50002 ジーエルサイエンスでは、分析ノウハウときめこまやかなフォローもお付けしたシステム提案を行っております。お近くの営業所やカスタマーサポートセンターまでお気軽にお問い合わせください。ホームページはこちらから・・・ http://www.gls.co.jp/spe.html 〒163-1130 東京都新宿区西新宿6丁目22番1号新宿スクエアタワー30F TEL.03(5323)6611 FAX.03(5323)6622 TEL.03(5323)6611 TEL.06(6357)5060 TEL.045(985)7900 TEL.024(534)2191 TEL.029(858)3700 TEL.043(248)2441 TEL.048(667)1611 TEL.052(931)1761 TEL.082(233)1101 TEL.092(738)6633 F A X. 0 3 ( 5 3 2 3 ) 6 6 2 2 F A X. 0 6 ( 6 3 5 7 ) 4 5 8 0 F A X. 0 4 5 ( 9 8 5 ) 7 9 0 1 F A X. 0 2 4 ( 5 3 6 ) 1 5 1 8 F A X. 0 2 9 ( 8 5 8 ) 3 7 8 0 F A X. 0 4 3 ( 2 4 8 ) 2 4 8 5 F A X. 0 4 8 ( 6 6 7 ) 1 6 5 6 F A X. 0 5 2 ( 9 3 1 ) 1 8 1 4 F A X. 0 8 2 ( 2 3 3 ) 1 1 1 0 F A X. 0 9 2 ( 7 3 8 ) 6 6 3 6 ｶｽﾀﾏｰｻﾎﾟｰﾄｾﾝﾀｰ T E L . 0 4 ( 2 9 3 4 ) 1 1 0 0 F A X. 0 4 ( 2 9 3 4 ) 3 3 6 1 東大横東筑千北名広九京営業阪支浜支北営業波営業葉営業関東営業古屋営業島営業州営業部店店所所所所所所所ジーエルサイエンス SPE テクニカルノート