31 目緒細谷省吾教授) ( 第一報)( 下) Lepc .t ierohaemorの r簡 h單 ag なi るa 大e 量培養法 Leptospira a ie cm to er rr o a h h gの ia 免e疫に關する研究第二篇醫學專門學校細菌學教室(指導帝國女子藥學五倍濃縮液は幼若家兎に対し毒性た有するか百枝 Soyed Ma omoe y 五倍濃縮液は幼若海猿に対し毒性た有するか田第二項添次第三項低温濃縮液による免疫言クロ、フォルム處理液な以て家兎な免疫した場合第二節第七章加里明馨による處理 Shwart現 z象 man 超音波處理ワクチソの精製液による免疫第八章培養基の製法第九章第一章細谷・宮田法による精製第二章 Tanninto製 x法 oid 総括虹びに結論参考文献言博士が一九一五年Lep. icteroha ag ei ma o のe r 純r 培h 養に成功されて以來、(伊 2) 野口博士の考案した再蹄熱スピロヘータの培養基た改良して、(稻 1) 田・井戸両緒第十章第一節大量た一囘皮下注射した場合少量頻囘免疫した場合第二節第一項一〇〇度 C 三〇分開加熱ワクチンと超音波處理ワクチンとの比加熱ワクチンと超音波處理ワクチンとの比較第二項第三章第二項較東・松崎、(大 3) 原、(大 10 庭) 、(15) 野( 口1 、6 () 1( 和 8 週 2 ) 、 7( )高 2 (木 4 2) 、 8( )福 2島 9) 氏等、欧洲に於て五六度 C 三〇分間加熱ワクチンと超音波處理ワクチンとの比較各種防腐劑添加によるワクチンに就て第二項 Vaudremer,(13)Dietrio, h( ,1 ( S9 1 t) 4 e) fU ah n, l oe pn oh uu lt oh,(17)K (12 ,)Martin 第四章 u. は、(7)Ungermann,(8. )UF hr lo em nm he u R , t e ( h i 9t ) u erRa um .me, Pettit ワクチン竝に精製液に補助物質た添加して免疫した場合細谷・宮田法精製液にTanni沈 n澱た浮べて免疫した場合 Merzn onワ iクチンに種々なる補助物質々添加して免疫した場合第五章第咽節五〇一私は細谷教授指導の下に、海猿の在る所で直に作れる簡單な培養基為考案しの不便た感するのでのる。ぼつて居る。其の多くは、馬、家兎の血清又は血漿た使用する鮎により實際上 (2M ) 0anteu等 f多 el 数の學者に依つて、種々な培養基が考案され、其敷も多撒にの icteの r免 o疫 hに a關 eす mる o研 r究 rhagiae 五倍濃縮液により家兎た免疫した場合長永式濃縮法による場合濃縮液の免疫元性竝びに毒性に就て細谷・宮田法製精液にタピオカた加へて家兎た免疫した場会第二節第三節第一節第六章第一項添田=Leptospira 32 た。増養基の製法添田=Leptospira 第一章 icteの r免 o疫 hに a關 eす mる o研 r究 rhagiae 〇・二 % Carnopep 水t 道o水 n溶液々蝕六・八- 七・〇に修正し (〇・一% にてもよく、この場合は反應修正不要)、ヂフテリー毒素製造用コルベン(内容一立入) に五〇〇蝿づゝ分注し、一二〇度 C 二〇分間滅菌し置き、用に臨み、新鮮な海猿拘蘇酸曹達血液叉は海瞑血液のみ々凝固しない内に手早く、蕪菌的に約〇・五 % の割合に加ヘ、二七度 C 一書夜叉は三書夜静置し、雜菌の有無々確かめたる後使用に供す。即ち無菌的ピペッレ又は注射器により Lep.な接種し、三〇度四日乃至五日間培養する時な毎常一視野︹Lei 接t眼 z鏡八倍、接物鏡七 ( 乾燥系 )︺趨看波處理ワクチンの精製液による冤疫細谷・宮田法にょる精製 ( 第十表 ) 化亜鉛 I 、家兎に於ける免疫 (第十一表 ) 五〇六免疫元 H な用びて、家兎 No・33(三ご五〇荻 )の背部皮下へ原超ワ量三.〇髭に相意量た速ぼ三囘注射し、No. 34(二三七〇瓦)には原超ワ量一五耗に相當細谷。宮田法精製液液た採取して、暗視野装置により検備した。し、二- 四- 六日目に生菌培養液〇・六蛭を腹腔内に接種し、時間な逐うて腹腔超ワ〇・四四耗に相當量)及び三匹には〇・六蛯 ( 原量一・三二耗に相當量 )た注射細谷・宮田法精製液た用びて、艦重一〇瓦のマウス九匹の腹腔内へ〇・二蝿(原 II、マウスに於ける免疫 ( 第十二表 ) 後は漸減する。債が最も高くなるのは五週間後で、超ワの抗體の上昇状態に似そ居る。入週以一〇 - 一三週間目に耳静脈より採血して Spira o e t co hly債 si だn 測定した。抗盤量た一囘皮下注射した。最終注射後型の如く、二日、五日、一- 三- 五- 七- 第十一表に二〇個以上の發育旺盛なるLep. た認める事が出來る。第二章第一鮒超ワた細谷・宮田法による菌體外毒素精製法に依つて處理した即ち層加へる事・によつて生じた沈澱た第十表の如く處理した。かえお免疫元 H な以て、家兎及びマウメな免疫した。超ワた細谷・宮田法第十表 33 細谷・宮田法精製液によるマウス免疫第十二表第+ 二表に示す如く、封照に於ては Lep. は腹腔液中に三日六日目感染に於ては、原量 ○ ・四四蝿に相當量により一- 二時間で腹腔液中より浩失する。第コ節Tann i ntoxoi d 製法超ワに一〇 %ram ぼ水溶液を加へて生じた沈澱を二一三同水洗した後〇二二%Carnopep- t on 水に浮べ、この免、二五週の間 )一ハ倍を示した。三回注射例に於ては豫想通りの成績は得られなかつたが、七同注射の場合にそれ以後漸減し、長日月 (一七て四倍、三週間目六四倍、四乃至九週間目に於て最も高く六四〇倍、結果は第一四表の如し、一同注射の場合には二週間目に於て、初め盤の清長を検査しれ。行び、劃各々最絡注射後三日、二週間及び殆んど毎週江例の如く探血し、免疫抗元 Tを二回皮下注射(No.)、 3連 5日三同(No.36)叉は七同 ( No. 37)皮下注射を髄重二三〇〇瓦内外の白色健康家兎を選び、原超ワ量一〇耗に相當量の免疫ろ)。た (第十三表で説明す迄存在す小量頻同免疫した場合疫元を T 定して用び、第一項るに拘らす、免疫後二日目感染群に於ては原量 ○ ・四四蛭或はその三倍量を注射しても、同じ成績で封照より一日早は初同注射より六週目一〇二四倍、七週間目に二〇四八倍を示した。二免疫抗膿産生上興味ある事は抗元を水に不溶の状態で皮下注射すると、く Lep. は浩失す水溶性抗元注射の場合よりも抗盟は逞く産生され、長期間有数なる歌五〇三る。四ー添田擁ピe℃ざ s・℃i霊 i 6te3 h器 m自 rh9αQi ae の免疫に關する研究 34 澱を以て免疫した場合添田= Leptospr i a ictem haemorrhagiae の免疫に關する研究態で持綾すると云ふ事に於實を、此の L㊦p 事を認めた。第三章五〇四一二八結果は第一五表の姶し、注射後五旧目に抗匿償三二倍、三週間目に一〇二四 i 二〇四八倍、五週間目に四〇九六倍、六週問目に八一九二倍に達し、四〇九六倍の憤七週より一六週間目迄實に九週日間二〇四八を持綾した。此の實験例に於て、免疫元の大量を一同だけ注射する事により ,早耕 ( 注射後五日目協に於て、かな6 高い抗禮を産生し、しか・も長期間張い抗禮慣が持績する一〇〇度三〇分間加熱ワクチンと超音加熱ワクチンと超暑波虜理ワクチンの比較第一項波庭理フクチンの比= 較大量培養液を用びて、 (一) 一〇〇度三〇分間加熱し、此の場合海瞑血液が入つてゐるので、赤褐色のかなり大きい紫状沈澱を生じ、液膿は白濁する。太い注射器により、此の紫歌沈澱も一緒に注射しぬ︹家兎、 No .46(一二一五〇瓦)、三〇践)} 。 (三)超ヲを家兎 No. 41(二三九〇瓦 )、 No. 42の(二四一〇瓦 ). 注射量沈澱を生するが (一)ビ同じく注射し索︹家兎 No. 43(二三六〇、瓦 )、No .45(二三免疫元は本篤第五章に記載する日Mer Nonぎ殺菌液をT anni tn oxo製 i法 dに準盤債を検査した。 No.83(二四〇〇瓦 )の脊部皮下へ一同注射し、例の如く耳静脈より探血し、抗 No.47(二四入 ○ 瓦)︺。 (二)超フを一〇〇度三〇分間加熱するど (一)ぜ同様な大量を一同皮下注射した場合澱の大量を1同注射した場合第十五表Tannin沈じて庭理したものを用び、原量五〇〇耗に相當量を家兎 No. 82(二三五〇瓦)、第二項ても護明する事が出來た。第十四表Tamnin沈 ' 35 は各々一〇琵づゝ一回脊部皮下注射しれ。注射後三日目、一週間及び毎週に例の如く耳静脈より探血して発疫抗腱の清長を検査し第二六表に掲げた。この實験例に於て,封照超ワ注射群の抗禮債は一番高く注射後二週間目に三ニー六四倍 ( 表の繁雑を避ける洗め他の一匹は同様な成績を得たので省略した )。 (一)群は八ー一六倍、 (; 群は二倍、抗禮の最も上昇するのは、四乃至六週間に於て、朝封照酬群ごは二〇二一四倍h 、( 二と群∴ は六四- 二五六位旧、 ( 一二)群は四 -一一二八晒惜五六度三〇分間加熱フクチンと超音波の抗元は耐熱性なる事を認める。第二項虚理フクチンの比較前記大量培養液を五六度三〇分間加熱し ( 防腐鋼を加へす )、直に一〇蛭一回㌦家兎 N9 61(二四六〇翼 )、 No. 62。(二三五〇瓦)、 NC 2。71(二四一〇瓦 )に皮下注射した。封照ビして、同じ培養液で超ワを作り、 No. 63(一九九〇瓦 )、 N9 2DO。O(二四〇〇瓦)に同量を一同皮下注射した。注射後三日目、一週及び毎週に、型の如く耳⋮ 静脈より探血し、免疫抗膿の消長を検査しれ。結果を第一七表に示す。封照超ワ群は一週間目に於て一六 ! 三二倍、五六度三〇分群はニー八倍、三週間目に於で封照群は二五六i 五二二倍、加熱群は四一六倍、四週間に於ても加熱群は四一六四倍を示したに過ぎない。五〇一以上の實験威績により、、家兎の個性に差のある事は今迄の實験中に添田 = Leptospi ra icte hr ao e morrha iaeの免疫に關する研究以上の實験により、一〇〇度三〇分間加熱によつて、抗元牲は超ワよ、も認められる庭であるが、しかし、此の實験の範園に於て云ひ得る事超ワとの比較り劣るけれさも、破壌されない。從つて L①p i gerohaomorrhag i ae を示した。ワクチン・第十七表56℃30分間加熱ワクチンと超ワとの比較第十六表100℃30分 36 添田 = Leptop sira icteh ra oe morrhag ni 器の免疫に關する研究各種防腐剤添加によるワクチンに就ては、超ワで免疫した家兎群の方が高い抗禮橿を示した。第四章大量培養液の一〇〇琵づゝに、 (一)rgu。一ハロ本製晶 )一・○ 蛇を加へよく振湯皿し、三〇度二四時間静置すると Lep は翌日迄に浩失する。使用にのぞみ、濾紙 (東洋濾紙 No.10 )を 1 以てToluoを lのぞき使用する。 (二)石炭酸 ( 濁逸製晶 )を〇二 % の割合に加へ、 (三 )M窪 N o三謬( 来國製晶 )を ○ ・○ 〇一% (一〇三借 )の割合に加へ、三〇度二四時間静置すると、 Le7 は各々の防腐刺により殺菌されることを培養試験立に動物試験 (マウス立に海猴腹腔内注射 ) により確め表。從つて是等の殺菌液を、 (二)Tolol﹁ワクチン﹂、 (二)石炭酸フクチ嫉、 (三) Merzonin ﹁フクチン﹂として使用し、ワクチンを便宜上ヲと略記する。家兎に於ける實験琢硬五〇二 ( 二三五〇瓦)、 ( 二)石炭酸ワを Nや 67 へ二三三〇瓦)、 ( 三 )MerNoni n ワを No.66( 二三八〇瓦)に各々一〇琵づゝ一同皮下注射し、注射後五日目、一週間及び毎週に例の如く耳静脈より探血し、発疫抗贈贋を検査した。結果は第一八表に示す。五日目に於て、( 一 )、(三)ワ注射家兎に於て六ハ倍、(二)ワは未だ抗髄陰性、二- 四週間に於て、三者殆んさ同様な抗禮債 ( 五一ニ︱一〇二四倍 )を示し、六週間目に於ては、(一)は二五六倍、 ( 二)は一〇二四倍. (三)は二〇四八倍を示した。 M㊦rzOn宣して発疫した場合 ⋮ Merzo nnワ iに種々なる補助物質を添加て冤疫した場合ワクチン拉びに精製液に補助物質を添加し、使用は極少量で足りるので超ワの代りに專ら Merzoni n ワを使用する事にした。第一節第五章第十九表ワに各種補助物質を加へ家兎を免疫したこ場合膿重一三二〇〇瓦内外の白色健康家兎を選び、 (一).Tu oo llワをN o.65 第十八表各種防腐剤ワクチンによる家兎を菟疫.したこ場合 37 全量一〇蝿を高家兎 (二)M e rz onn iワに一〇 % アラビヤゴム溶液を二% の割合に添加して、全量一〇耗を家兎 No.10( 0 二三五〇瓦 )に皮下注射した。 (二)同ワに一○% 薦糖溶液を一% の割合に添加陛 No.101(二三五〇武 )に皮下注射した。 (三 )封照として、同ワに石炭酸を ○ 。五 % の割合に加へて全量二〇琵一同家兎脈より探血して抗讐を測定し、添加物質による優秀性ありや否や No.10 (三 2 三入○ 瓦 )に皮下注射しれ。各々注射後四日目、一週間及び毎週に例の如く轟添潤剥 Lepto ps ira icto e hr ae morrhagiaeの免疫に關する研究を検討した。結果は第一九表に示す。以て家兎を反覆免疫したこ場合免疫元HTを第二十一表製法免疫元HTの第二十表 (一)注射家兎に於て、四日目に二倍、一週間目一六倍、三週間目一二八倍・月週間目三二倍を示した。 ( 二 )注射家兎に於ては、四日目に一以上アラビヤゴム及び藤糖添加により、封照と比較して Lep の上昇六倍、一週間目同憤、三週間目六四倍、五週問目に二五六倍を示した。細谷・宮田法精製液に日am ぎ沈澱を浮疋て兎疫しだ場食第二十表 ) に優秀な影響を與へない事を認め弛。第二節 Merm zi n ワを細谷・宮田法. により虞理し嚢精製液に、同ワを Tam intox製 id 法により慮理した沈澱を浮べて免疫元 H T とする。此の製法は第二實験免疫元 H T を十表で説明する。以て家兎を反覆免疫しれ場合 (第三一表 ) 免疫元 H T を一同注射量五蛇 (原量は三七。五蝿に相當量 ) を二匹の家兎︹ No.78 (二三五〇瓦 )、No. 79(二三八〇瓦 )︺に四- 六日間隔を以て反覆皮下注射した。' 第二二表忙試血週藪とあるのは初同注射を基として、試血し、免五〇七 38 添田腔 Lep tospi raicet rohaemorrhagai e の免慶に幽鋼する肝究疫日撒と記してある日に注射した。注射一週間後に抗禮は ○ー入倍、二週間日にご五六倍、四週間目に二〇四入倍、九週問目に一六二九四倍、一〇週問目に入晶九二ー入一九二〇倍に達し、五〇入五蛭(原量一二。五蛇に相當量)にタピオカを加へ(一立につき二五瓦の割合)二匹、の家兎︹ No.8(0 二三〇〇凡 )、No 81 (二三三〇瓦)︺に四︱六H間隔で反覆皮下荘射を行つた。第二二表に発疫日数と記した日に注射し、初同注射日を基として、一一〇倍に減少し、こに一二八︱五ご二倍、九週間目に一〇二四倍、一〇週間目に二〇四八注射開始後一週間目に八倍、三週間目に二六− 一, 一五六倍、五週問目試血週藪と示した日に探血を行ひ、各々発疫抗膣償を検査した。の抗膿債は二〇週間にて使用した。長永式濃縮法に、よう揚合濃縮液の冤疫元鼓びに毒性に読て第一項 Le p 五倍濃縮液により家兎を免疫して五倍に濃縮し、帥ち二立を四〇〇蝿に濃縮し索。之を Le p 五倍濃縮液とし Mer zoninワを長永式濃縮器により、外水温四五1・五〇度 ( 低涯減膣濃縮)に第一節第六章一一〇週聞目に六四一一五六倍、二四週間目も同償を示した。倍、これ窓り免疫を中止したので、 N三週間目には一一五六倍に減少し、細谷・皮下注射し、注射後三日目、一週間及び毎週に、、耳静脈より探血し、免疫抗骸距揚合 ( 第二十三表 ) 評白色健康家兎 No.謡(二三五〇瓦)に本液一〇蛭(原量五〇耗に相當量)を一同加へて家兎を複第二項 Le p 五倍濃縮液は幼若家兎に封し毒 69(一○二〇瓦 )を選び、本液・性を有するか幼若健康家兎 No. 68 (一〇一 ○ 瓦 )、多 ' 間目三二倍、五週間日一〇二四倍、七一一〇週間に於て一二入倍を示す。結果は第二三表に示す。注射後三日目に抗謹債三倍、一週間目一六倍、三週の稍長を槍査しれ。 ( 第二十その精製骸一同注射量宮田法により庭理し、 Mer z oniワ nを細谷・二表) 場合反復発疫したにタピオカを宮田怯精製液第三節膿を生ぜしめる。により、強力な免疫抗家兎を反覆免疫する事 T餌nni n 沈澱を加へて、細谷・宮田法精製液に以上の實験により、到るぴ縫綾した。問目には一〇二四! 五一一週問目に五一一〇- 四〇九六〇倍、一〇週以降注射を中止したので一二週細谷・宮田法精製液にタピオカを加へて家兎を反覆免疫したこ場合噂、第二十二表 39 一〇蝿 ( 原量五〇耗に相當量 ) を一同皮下注射し、全身症状として、體温及び膿重の変化殊に眼所見に封する毒性を検せるに、観察期間一ケ月を経過したが注射後、膿温に動揺なく、體重はむしろ増加し、全身状態異 Lep 五倍濃縮液は幼若海猿に封し毒性を有するか ( 尚日家兎及び海狸の眼所見に開しては、帝國女子医專病院眼科部長須田経宇教られなかつ索。第七章低温濃縮液による免疫 ( 第二十四表 ) (一)M er Noi n ワ一〇〇竓を外温五〇竓にて三日間 ( 濃縮時間は回 . 日八時間から九時間 )に一〇竓しか濃縮されない。かゝる液を用びて、家兎 No. 94(二二八○ 瓦 ) に一〇竓一同皮下注射した所、免疫元性は著しく減弱し、抗體の最も高くなる六週間目に於て、六四倍を示したに過ぎない。鹸實験を進め、る過程に本章の如き現象を経験したので参考上附記して置く。五〇九に一週間放置すると、殊にクロ、フォルムとの接鯛帯に赤褐色の沈温上昇なく、膿重はむしろ増加した。眼所見帥ち、角膜、虹彩、水晶膿、眼底添田= Leptospr i ai gem haemorrhaoq冨ゆの免疫に關⋮ する研究けると同じく無毒性なる事を認める。矯 I 、超ワの大量を保存する目的でクロ、フォルムを加へ、冷所四度た場合 ( 第二十五表 ( - )、 (2 )、 ( 3 )) クロ・フォルム塵理液を以て家兎を冤疫し從つて、低温濃縮により、長い時間を費すにも拘らす、期待すべき結果は得二倍を示したに過ぎない。 (一三〇〇瓦 )に一〇耗一回皮下注射した。この例に於ても、六週間目に於て三 ( 濃縮時間は一日七時間 )で三〇耗濃縮された。かゝる液を用びて家兎 No.97 (二)M er z oninワ一〇〇蝿を低温濃縮法により、外温六○ 度に於て、二日間第二節授の教示によち。茲に謝意を表す。) 低温濃縮液による免疫第二十四表及び視紳縄等総て所見なし。從つて、該液は幼若海猿に封しても幼若家兎に於的と同様眼所見に封する毒性を検せるに、観察期間三週間以上輕過しぬが、燈五蝿に相當量 )を腹腔内に一同注射し、髄温及び艦重の変化蛇びに家兎實験の目幼若海狸を用ひ、 No.1 22(三〇〇瓦 )、No 1203(三〇〇瓦 )に該液五蛯 (原量二一第三項見なし。部ち本液は幼若家兎に封して毒性を示さす。常なく殊に眼所見帥ち角膜、虹彩、水晶髄、硝子艦、眼底及び視神輕等総て所第二十三表Lep.5倍濃縮液を以て家兎を免疫した場合 40 斯如くクロ・フォルムを加へる事により、その濾液は著しく免疫元性五一○ 澱壕生する。之な濾紙 ( 東洋濾紙 No.10 )に 1より濾過し、濾液 ( 淡紅色が低下する事實に遭遇したので、 Le戸 p 抗元はクロ上フォルム沈澱としの免疫に開する研究を呈す)(ご二〇蝿を家兎 NO 2。74( 二三五〇瓦)に皮下注射し、 ( 二 )四て集められるものなりや、次の如き實験を行つた。添田＝ Loptospi ra i cterohaemorrhag 三〇竓を長永式低温減歴濃縮器によめ外水温五〇度にて一〇分の二實験と同様に二週間四度に静置して使用した。にて四倍、六週間月に於て八倍を示したに過ぎす、著しく抗體産生は濃縮せざる液を注射した家兎に於て、三週問目迄抗體陰性、四- 五週瓦に注射した。之を第一噛} 群とすゐ。そのまゝ注射器にとり、家兎 N o 56(二三〇 ○ 瓦 )、 N 。.57( 二八〇〇 (一)クロ・フォルムは重いので最下層に沈下すろので上清一〇竓を亙、超ワ一二〇〇竓に少許のクロ、フォルんを加へ、よく振盈し、 1 のに濃縮し、之を一同に家兎 No 272。、 ( 二四五〇瓦)の脊部へ皮下注射し、注射後三日目、各週毎に耳静脈より探血し、、抗體償を検せるに、障碍された。濃縮液注射家兎に於ては、試血週数六週間に至るも、抗 ( 二 )濾紙で濾過し、濾液一〇竓を家兎第二十五表(3)クロロブォ1ルム涜澱と上清を加へて家兎を免疫したこ場合一體産生陰牲に終つた。かゝ胤家兎に六週間目試血後超ワ一〇竓を二同皮下注射するぐ)一三日目に於て、抗體二倍、k週間目三二倍、二週間目 ( 二一八〇瓦 )、 N o.60 第二十五表(1)〃口ロフォルム塵理による免疫元往所に就て N O 54 に於て一二八倍に上昇した ( 第二十五表 ( 1))。第二十五表(9)クロロフォルム庭理濾液を以て家兎を免疫したこ場合 41 (一九六 ○瓦 )に注射した。第二群とする。 ( 三)二五〇〇同一五分間遽心し、沈澱物を集め ( 上清は全く清澄)、生理的食臨水に浮べ ( 該沈澱はPH 九・四で溶解するがPH七覧・八では溶解せす )、p七 H・二にて原量二 ○竓に相當量を No.58 (二三五○ 瓦)、 No.59 ( 二三八〇瓦)に注射した。之を第三群とする。総て、一同皮下注射による。注射後三日目、毎遡に、耳静脈よめ探血して、抗體償を検せるに、第二五表 ( 2) の如き結果を得た。第一群は二匹共陰牲に終る。第二群は二週問目迄陰牲、三逓間目に二i 八倍、五週聞目に三二倍、一〇週間目に六バー六匹倍、一二週問目に八倍を示し弛。第三群は一涯は陰牲終り、他の一匹∴ は一二渦一間h 日迄陰 N 粧、隠櫨週間目に四) 穣旧、五咽週闘目二六晒惜、七遡問目三二偲、一C週間目八倍を示し距。超. ワ NC髭注射し牝封照家兎 No 2。64 と比較しクロ・フォルム虞理によ O 、上清申に抗元は認め得ない。沈澱として抗元ば集められるが著しく障碍される。濾液 : :抗元は濾紙を通過して濾液中に存在する。しかし抗元牲は微霧である。懸、超ワにクロ・フォルムを加へ、直に分液ロートへ入れ、強く振鑑すると上清は全く透明となる、之を三〇〇〇同遠心し、沈澱物を蒸溜水に. 浮べ、恥七・六に修正すると、仙浴解すろ。之を原 } 量と同旦毘になし、該液一〇竓、蓮心上清 . 一〇竓を混じて全量二〇竓を家兎 NOb 雛鳩No﹄。。4 に各々一回宛皮下注射し、三日目、悔週に探血し、抗體憤を検したる塵、弓陰冒wart zm碧現象発疫する事によ O. 一匹の家兎に於ては、満足すべき成績を示した。' 第八章接種材料は Mer きn宣ワを用ひ、體重二一二〇〇瓦内外の白色健康家兎五匹を選び、立既庭置には該液を〇二一竓、 ○・N、 ○・〇五、○・〇二五、○・〇一一五竓を豫め毛を剃っ郭皮内に接種し、二四時間後、同液二・ ○竓を同じ家兎の耳静脈内に注射し来所、注射量の多い個所に極めて輕度の発赤を認める事もあつれべ加里明馨による虞理。が、賓験全例に於て陰性に終つ衷。小野武の貴験成績と二致する。第九章 Mer zcni uりに一〇%加里明馨を加へ索所私の培地に培養し索培養液では沈澱総括拉に結論を生じないので加里明響による精製は不可能であつた。第十章 (一)Lop i ct①roha①morrha臨ae の大量培養基として、私は一新培地を考案した。本培地は大量製作に操作極めて簡単であり、馬の居ない研究室及び病院等に於て、海狽の在る揚所であれば、簡単に大量に作られる。從つて、大量ワクチン製作及び之の濃縮、精製法に適する。 ( 二)超音波腿理ワクチンを細谷・宮田法により虜理し、その精製液により家兎及びマウスを免疫せるに家兎血清申に免疫抗體を登明し、短期間にして、マウスに SPi <ocha⑦tgySi 昌を生ぜしめる。 (三)超一者轄撚虞理フクチンを日anni n8 姥oi 創製法により虚ハ理し・た日a55i n 沈澱を以て家兎を免疫すると、その血清中に長期間強い免疫抗體を生ぜへ四)日導 ni n浴澱の大量を一同たけ注射する事により、注射後五日目しめる。に於て、抗體慣三二i 一二八倍、六週問目に於て八一九二倍、長期闇高第二十五表 ( 三)の如ぎ結果を得た。 k週間目二匹共陰性、二週間目に於て二- 四倍、四週間目に於て六四- 五二二倍、之が九週間迄績いた。い抗體慣が持績する。五一沈澱申に集められた抗元と抗元の存在しない、遠心と上清と珍合せて添田 = L④姻 )ぢ巷 i舞 i cteroh鐵em orrhaα蛮iae の免疫に開する研究 41 添田擁 Lep t oss i r p a icterohaemorrhagqi ae の免疫に開する研究 ( 五)五六度三〇分間加熱ワクチン、一〇〇度三〇分間加熱ワクチン及び超音波庭理ワクチンを比較するに、本實験の範薗に於て、超音波塵理ワクチンが一番優秀である。超音波ワクチン及び培養液を一〇〇度三〇分間加熱しても抗元は破壌されない。元は沈澱の方に移行し、上清中には存在しない。五一二 ( 十四 )家兎を用ひ、 Herzoni n フクチンにより、 ShWartzm餌n 現 ∼ 象を試みたが反應は陰性に終つた。 ( 十五)加里明馨による塵理は沈澱を生じないので精製不能であつた。本稿を終るに臨み、絡始御懇篤なる御指導御鞭燵立に御絞閲を賜はりたる恩師細谷省吾敏授に満腔の謝意を表す。 (六)防腐剤として、Tpu iopl日 l(本製品 )、石炭酸 ( 獨逸製品 )、M er oni n ス米國製晶)を培養液に加へて殺菌し、各種ワクチンとして使用し、家兎絞長額田晋先生に敬意を表し、御便宜を與へられれる額田年助敏授に感謝す。謝する。参考文献 (超音波ワクチン文獄) 961. 旧本医事新報. 1055, 秋山 1121. 491. 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