ヒト白血病性B細胞株に関する研究第1編ヒト古血病性B細胞株(BALL-1株)の樹立とその性状岡山大学医学部第2内科学教室(主任:木村郁郎教授) 中村一夫 (昭和55年6月3日 Key words: human acute leukemic 緒近年,リ lymphoblastic B-cell 細胞一に分けられ,各 tissue culture, れることは極めて興味深く,今後それぞれの細胞型に最適な治療法の確立が期待される. 原性, 機能等の違いから,細胞起源の異なる2つ腺由来のT細 leukemia, line. 言ンパ球は細胞表面マーカー,抗 population-胸受稿) さて,このsub- れらのリンパ系腫瘍については,従来から臨床的,病理組織学的研究が進められる一方 ,腫瘍研究の場をinvitroに移す手段とし胞と骨髄由来のB 種疾患におけるその動態て様々な組織培養法が古くから試みられてきた. が追求されている1)-3).一般にりンパ増殖性疾患造血器系細胞の長期培養としては, 1964年Eps は単一クローン増殖性疾患と考えられるところ teinとBarr13)がBurkittリから,腫瘍細胞の細胞表面マーカー,抗パ芽球様細胞株の樹立に成功して以来 ,悪性疾患原性, ンパ腫患者からリン細胞生化学的特異性,超微細構造等の面から詳患者のみならず伝染性単核症患者や正常人から細な検討が加えられ,その細胞起源が議論されも多数の同様の細胞株が樹立されている14)-17). るようになってきた.リンパ増殖性疾患のうち, 多発性骨髄腫, Waldenstrom's nemia, non-Hodgkin 性白血病の多くはB細 Sezary症ところが小数の例外18)-33)を除いては,従来報告 macroglobuli lymphoma,慢されている細胞株のほとんどはEpstein-Barr 性リンパ virus (EBV)に胞表面マーカーを有し, 候群,mycosis fungoidesはT細した,い胞表よって正常B細胞がtransfom わゆるリンパ芽球様細胞株と考えられており14)-17)-34),35),造血器腫瘍細胞に由来する細面マーカ一を有するといわれている1)-6)急性リ胞株の樹立は容易なことではなく,こンパ性白血病(ALL)で病細胞株の樹立は極めて困難で数系の報告をみよびB細の約3/4はTお胞表面マーカーをもたないNull細型であり,T細 ALLはは,そ胞型ALLが少数とされている.さ約1/4, 胞るにすぎない18)-23),31),32). B細胞型最近,著者はB細胞型ALLの1例 me陰それぞれ特徴を有しており, 功したので,そ T細胞型ALLと治療に抵抗性で,ことに後者の性白血病性B細胞株(BALL-1)の抗白血病剤感受性,予症床像, 後に明らかな相違がみら患者: 75才,男 763 樹立に成の性状に若干の文献的考察を加えて報告する. 予後の悪いことが報告されている7)-12).このよっに細胞表面マーカーの違いによって,臨を経験し, 患者の白血病細胞由来と考えられるEBV-geno らに細胞型の違いによる発症頻度の差ばかりでなく,臨床的にも B細胞型ALLはとに白血性. 例 764 中主訴:血尿,全既往歴,家実験材料と方法来健康であったが中旬より全身倦怠感,下頻尿をきたした.さ院時,理和51年1月指触知する以外には床検査上,尿 104/cmm, %,リ Thr WBC 7.8×104/cmmで認めた.肝 398× ンパ芽球83 葉好中球1%,単あった.骨数25×104/cmmで,末めなかった.血 RBC 25×104/cmm(リンパ球15%,分 95%を蛋白沈渣に赤血球と白血球を多数認めた. 末梢血液検査ではHb12.3g/dl, 球1%), 梢血と同様のリンパ芽球機能および腎機能は異常を認とに γglobulinが0.57g/dlと採血し,培養に用いた.採た(図 ①).この83%が子量264,000, 減少していた.末浮遊させ,直み, 37℃, 養液2.5mlに径35mmの 7.5% 牛血清(FCS, 含むRPMI GIBCO製)をあることよ量を静かに更新した2. daunoru 下には減少せず,休薬中ふたたび急増した.次 soloneをいでneocarzinostatin, cytosine arabinoside, cyc predni 加えたものと, 20% ごとに半ゼットおよび細胞表面免投与したところ,末梢白血球数は一時これらの検索は,いずれもJondalとKlein35) の方法に準じて行なった.ヒ Alsever液中で4℃ に保存し, phosphate ered saline (PBS)に家兎抗E抗ツジ赤血球(E)はて3回体: E5×109個を計10回家兎に静注し,そたため上記治療を再度追加した.な得られた抗E抗体をセファデックスG200カ過の1週間後に採血して抗E抗中に軽度の神経症状が出現し,髄液中に白血病ロマトグラフィーにてIgG 細胞多数を認めたためmethotrexate, 分画に分離した.そ arabinoside, prednisoloneを cytosine 髄注した.同年2 月岡山大学医学部第二内科に転院したが,転後も血尿が続き,尿された.胸認め,高剤,艶培養でCitrobacterが院検出部レ線検査で左下肺野に浸潤影を熱が出現したため抗生物質,抗真菌グロプリン製剤を大量投与したが効果管,中門部リンパ節, 枢神経系に認めた. なわちゼットに, IgM分 Eロゼット:培養細胞4×106/meをFCSに EのFCS浮ずつ等量混合し, 500rpm の1滴血病細胞浸潤を骨髄,肺 1時間の反ゼットに使用した. 遊させたものと, 1% 時間反応させた.そ脾臓,尿れぞれEと37℃ 画は20倍希釈でEACロ死亡した.病で,白ラムク (7S)分画とIgM (19S) 画は400倍希釈でEAロなく,全身状態が急速に悪化し,同年3月11日理解剖診断は急性リンパ性白血病体を得た. 応で凝集をおこさない最少希釈濃度,す IgG分 buff 洗浄後検索に用いた. 減少したが休薬すると短期日でふたたび増加しお,経児家製)を加えたものの養液は3∼4日 EACロペニシ 1640に20%胎疫グロブリン(Ig) bicinによる化学療法を開始したが,末梢白血球 lophosphamide, E, EA, を卵器にて静置培養した。培養液はストレプトマイシン100γ/mlと 2種類を使用した.培数は5×104/cmm以洗浄後, 細胞2.5×107個ガラスシャーレに植えこ CO2ふ胞 zinostatin, vincristine, prednisolone, 割合 1640 (Flow製)で1回ヒツジ赤血球とのロゼット陽性細胞1%,細診断された.直ちにneocar キストラン(分白血球が濃厚となった血漿層を遠沈し,得ちれた細胞をRPMI ヒト臍帯血血清(HCS,自りB細胞型ALLとリンパ芽球であっ Pharmacia製)を5:1の梢血リンパ系細胞の細胞表面マーカーの検索で, 表面免疫グロプリン陽性細胞99%で梢白血球数に混じ, 37℃ ふ卵器内で45分間垂直に静置した. リン100単位/mlを低値で,こ血時,末の静脈血に6%デ培養に用いた.培髄は有核細胞清蛋白は5.3g/dlと養方法 25×104/cmmで,そ某病院に入院した.入異常所見を認めなかった.臨 1.培未治療時の患者からヘパリン加静脈血10mlを腹部痛, らに血尿と排尿障害が出現学的には脾を1横陽性,尿夫もに特記事項なし. 現病歴ならびに臨床経過:生したため,昭一身倦怠感. 族歴:と昭和50年12月村した.被 EAロ 3分間遠沈後, 4℃ 1 の後静かに再浮遊させ,そをスライドグラスにとり, 400倍にて鏡検検細胞を300個以上数え, 付着した細胞をEロ Eを37℃ 浮遊液を0.1me Eが3個以上ゼット陽性細胞と判定した. ゼット:抗E抗体IgG分 30分間反応させ(EA), 画(A)で5% PBSにて3回洗ヒト白血病性B細胞株に関する研究 765 図 ①: 患者末梢血のMayGrunwaid-Giemsa染色標本. ×1200倍.図のようなリンパ芽球が83%を占め,細胞の胞体は幅狭く,核は大型,核網は繊細で,しばしば1∼ 数個の明瞭な核小体を認める. 図②: BALL-1細胞の位相差像. ×150倍.細胞集塊を形成せず,単遊状態で増一,浮殖し,個々の細胞はほぼ球形, 均一で,少数の細胞に突起を認める. 図③: BALL-1細胞のMayGrunwald-Giemsa染色標本. ×1200倍.図 ① にみられる患者の白血病細胞に類似し,時に胞体内に数個の空胞を認める.少数の細胞は,小型で核小体を欠き成熟リンパ球に類似する. 766 中村一夫細胞表面Ig: FITC標 μ,δ,ε,κ,λ chain 識ヤギ抗ヒトIg-γ.α. specific-はHyland製のを使用した.培養細胞をPBSに 10倍希釈の抗血清0,3meにさせ, のもて3回洗浄後, 細胞4×105個を浮遊 4℃ 30分間反応させた。次いでPBSに 3回洗浄後, 50%グてリセリン緩衝液で封入し, オリンパス螢光顕微鏡(落射型)で観察した-被検細胞を300個以上数え,明らかに膜螢光を発するものを陽性と判定した. 3. EBV特異核抗原(EBNA)の ReedmanとKlein36)の図 ④: BALL-1細胞の透過型電顕写真. 細胞質に乏しくorganelleの型のmitochondriaを lipid dropletが ×7500倍. 発達は未熟で,や数個認め,しばしば1∼ 存在する.核は大型,ほや大数個のぼ円形で, 大多数に小型の核小体を認める. microvilliは B細正常を用いた.培検索螢光抗体補体法の変法養細胞の塗抹標本を一晩乾燥後, 四塩化炭素で室温にて15分間固定し,まず非働化したEBNA陽性血清とEBNA陰体(非働化していないEBNA陰性血清に補性血清)をそれぞれ混じたもの(いずれも最終濃度10倍希釈)を37 胞に比べ少数である. ℃30分間反応させた.次 tion (BSS)にいでbalanced て洗浄後,抗 salt solu ヒトβIC/βIAヤFI- TC標識抗体(40倍希釈)を37℃ た.ふたたびBSSで 30分間作用させ洗浄後, 50%グリセリン緩衝液を滴下し,ガバーグラスをかぶせてオリンパス螢光顕微鏡(落射型)で観察した . 4.電子顕微鏡観察培養細胞を2000rpm を作り,3%グ定した後,1%オ図⑤: BALL-1細胞の膜螢光抗体写真. ×1400倍. 10分間遠沈し, cell pellet ルタ-ルアルデヒドで1時間固スミウム酸で30分間固定した. 次いでエチルアルコール系列で脱水し,プロピほとんどすべての細胞は,図のように細胞表面Ig強レンオキサイドを経てエポン812に包埋した. LKB 陽性を示す- ウルトラトームを用いてガラスナイフで超薄切片を作製し,酢浄後1% EAと 106/meのPBS浮 rpm した. 1% EAと培養細胞4× 遊液を0.1meずつ等量混合し, 500 3分間遠沈後, 37℃ 30分間反応させ, Eロゼットと同様に陽性細胞を算定した. EACロ %Eと37℃ ゼット:抗E抗回洗浄後,さ清(C)を画(A)を5 PBSに 0.1meずつ等量混合し, 500rpm 37℃ 30分間反応させ, 細胞を算定した. て3 マウス新鮮血にて30分間complement て3回培養細胞4×106/meのPBS浮 HS-8型電子顕微鏡で観察した. 5.染色体分析染色体分析は原則としてMoorheadら37)の PBSにらに10倍希釈のA系等量加え,37℃ を反応させた(EAC). % EACと体IgM分 30分間反応させ(EA), 酸ウラニルおよびクエン酸鉛で重染色を施し, Hitachi 洗浄後, 1 遊液を 3分間遠沈後, Eロゼットと同様に陽性方法に準じて行なった.すなわち,培養シャーレに 1γ/mEの濃度のコルヒチンを加え, 37℃ 60分間静置した後, 0.9%クエン酸ソーダにより低調処理を行なった.次いでメタノールと氷酢酸の等量混合液にて固定し,細下し,乾燥後Giemsa染胞をスライドグラスに滴色し,顕微鏡写真撮影により染色体分析した.次によりbandingになわち,写にKajiiら38)の方法よる染色体分析を行なった,す真撮影の終ったGiemsa染色標本をヒト白血病性B細胞株に関する研究脱色し,ト 767 リプシン処理の後,ふたたびGiemsa 染色して顕微鏡写真撮影により分析した. 結 1.培果養経過用いた2種の培養液のうち,培養液80% 1640+20% 後5日 FCSに RPMI は,培 1640+20% 図⑥: BALL-1細胞の染色体分布図.モードは46 HCSに方,培養液植えこんだ細胞養開始後徐々に変性し, 14日目頃には生細胞が約60%に本である. 養開始目頃より急速に変性し, 14日目頃にはほとんど生細胞を認めなくなった.一 80% RPMI 植えこんだ細胞は,培減少したが,その頃より生細胞は漸次増加し始め, 34日目に最初の継代培養に成功した.そを重ね,現の後は7∼10日目ごとに継代培養在培養開始後25ヶ月を経過している. 細胞株樹立後約1年間は80% FCS+5% HCSで培養を続け,現 % RPMI 1640+15% ある.細胞分裂指数は1.0で,細 timeは FCSで培養液80% 時間,培 RPMI 養液80% 間で, maximum あった.位た.個 1640+15% 在培養液85 も培養維持が可能で胞のdoubling 1640+20% RPMI HCSで80 1640+20% FCSで66時 cell densityは3.7×106/meで相差顕微鏡による観察では,培胞は細胞集塊を形成せず,単殖し,ガ RPMI 一,浮養細遊状態で増ラスシャーレ底への付着は認めなかっ々の細胞はほぼ球形を呈し,均一で細胞質突起はほとんど認めなかった(図 ②).樹胞株はBALL-1株 2.細立細と名づけた. 胞形態 BALL-1細胞はMay-Gruwald-Giemsa染色標本上,形態学的に患者の白血病細胞(図 ①)に類似し,細胞の直径は10∼21μ(平均14μ)で,胞は幅狭く,中等度の好塩基性を示し,時の空胞を認めた(図 ③).核核網は繊細であり,し核小体を認めた.少は大型,ほばしば1∼ 体に数個ぼ円形で数個の明瞭な数の細胞は小型で核クロマチンが凝集し,核小体を欠き,成熟リンパ球に類似していた. 透過型電子顕微鏡による観察では, 図 ⑦: Giemsa-bandi㎎法によるBALL-1細胞の核型. 4本のマーカー染色体(大きいmetacentricと telocentric各1本 ,中等大のtelocentric 2本)を有するpseudodiploidであることを示す.その他にも複雑な染色体異常が存在する. 細胞は細胞質に乏しく, 熟で,や rough organelleのや大型のmitochondriaを endoplasmic しばしば1∼ reticulumの数個のlipid BALL-1 発達は未数個認めた. 発達も悪く, dropletを認めた.核 768 中は大型,ほ村ぼ円形で大多数に小型の核小体を認めた(図 ④).なお,ウィルス様粒子の存在は認められなかった. 3-細胞の細胞表面マ-カ EACロ EAローの検索では, ゼット陽性細胞ゼット陽性細胞35.6%,細面Ig陽性細胞(図 ⑤) 100%で胞表あった.細胞表面Igの subclassの検索では, γ-10%以下, α-0%, μ-100 %, δ-100%, ε-0%, κ-0%, λ-100%であり, BALL-1 細胞が λ型のIgMとIgDの2種方,患パ系細胞の細胞表面マ-カ-のゼット陽性細胞1%, EACロ 4. EAロ者末梢血リン検索では, Eロゼット陽性細胞40.5 ゼット陽性細胞59.5%,細 Ig陽性細胞99%で胞表面あった. あるという.そめ他の報告 B細胞型ALLの胞型ALLとT細胞型ALL, 間には発症頻度の差ばかりでなく, 臨床像にも明らかな相違が認められ,ことにB細胞型ALLの予後の悪いことが知られている7)-12). 私達の症例は, 75才という高令者に発症した ALLで,末梢白血球数は著増し,そまた,臨のほとんど髄像も同様であった. 床経過の面からは,強力な化学療法を行なったにもかかわらず治療に抵抗性で,寛解を得ることなく急速な経過で死亡した.こ点は,大多数のALLのの白血病細胞がB細れらの臨床像と一致せず,患者胞表面マーカーを有した点細胞型と臨床像との間に緊密な相関がみられることは極めて BALL-1細胞のEBNAは,細胞株樹立後早期より数回にわたって検索したが常に陰性であった. 色体培養9ヶれぞれ26%,4%でが注目される.このようにALLの EBNA 5.染胞表面マーカーを有するものはそをリンパ芽球が占め,骨類の細胞表面Ig を有することを示した.一 %, TおよびB細に,大多数のNull細 Eロゼット陽性細胞0%, 40.1%, 夫でも大体同様の結果が得られている7)-11).さら胞表面マーカー BALL-1細一興味深く,このことはALLが能性を示し, in vivoに単一疾患でない可おけるそれぞれの細胞性格が臨床像に反映されているのかも知れない. 月目にBALL-l細胞50個の核板について染色体分析を行なった.染色体数のモードはしたがって, ALLにこのような細胞型分類を試みることは, Wybran2)やBelpommeら12)のい 46本にあり(図 ⑥),これらはすべてpseudodiploid うように予後の判定や治療面でより有効かつ選で, 4本のマーカー染色体(大きいmetacentric 択的な化学療法を確立してゆく上からも有意義とtelocentric各1本,中等大のtelocentric 2 本)を有し(図 ⑦),そのほかにも複雑なbanding であろう. 腫瘍研究の場をin vitroに移す手段として種異常が認められた。患者の白血病細胞について々の培養法が古くから試みられてきた.造も染色体分析を行ない,分析可能な2個系細胞の長期培養については, ともにpseudodiploidでの核板はあった. 考とBarr13)がBurkittリ 1964年Epstein ンパ腫患者のリンパ節生検材料からリンパ芽球様細胞株の樹立に成功し察て以来,悪 1970年頃より,動物におけるリンパ球のsubpopulationの血器性腫瘍患者のみならず,伝染性単核症患者や正常人からも多数の同様の細胞株が樹知見から,ヒトについても同様の立されている14)-17).ところが最近,多概念が導入されはじめ,正常人や各種疾患にお者によって,正常ヒトリンパ球がEBVにくの研究感染すけるその動態が追求されてきた1)∼3).リンパ性白るとtransformationを血病は,従で恒久的増殖系となることが報告され14)-17),34)-36), 来より臨床経過や細胞形態の面から慢性リンパ性白血病(CLL)とおこし,容易にinvitro 急性リンパ性白血サルのリンパ球についてもまったく同様の結果病(ALL)に分けられてきたが,細胞表面マーカーの検索が進むにつれて次のようなことが明らかが得られている36),39).これらの細胞は,形態学となってきた.す由来する細胞と悪性腫瘍患者に由来する細胞と胞表面マ-カなわち, CLLの大多数がB細ーを有する5)のに対し, Belpomme ら12)の報告によると, ALLの70%はTお細胞表面マーカ-をもたないNull細よびB 胞型であり, 的にリンパ系幼若細胞の形態を呈し,正常人にが極めて類似し, EBV抗原やEBNAが陽性で, B細胞性格を有することが明らかとなった.さらに,その細胞表面Igがしばしば多クローン性ヒト白血病性B細胞株に関する研究 769 を示すこと,培養液中で細胞集塊を形成するこを占めるNull細と,活発な運動能を有し,形態学的にしばしばーカーを有しないとされているが ,これがリン hand-mirror パ球の腫瘍化に伴う現象であるのか,あ shapeを呈すること,成熟度の異胞型ALLは既知の細胞表面マるいはなるリンパ系細胞が混在すること,正常な染色リンパ球の機能分化の過程でより幼若な段階に体構成を有するものが多いことなど多くの共通ある細胞が腫瘍化したのかという問題も解決さした特性を有することが知られている14)-17)-34)-36) れていない.最この結果,少ト, EACロ数の例外18)-33)を除いては,これら近, BALL-1細胞にEAロ細胞株のほとんどは培養に用いた細胞に少数混なり,これは長期培養の経過でEAレ在した正常B細 EACレした,い胞がEBVによってtransform わゆるリンパ芽球様細胞株と考えられており,ヒトの造血器腫瘍細胞自身に由来する細胞株の樹立は容易なことではない. このことが細胞の分化や幼若化と関係しているかどうかについても明らかでない.こ来していることは次の点から明らかである.す胞が形態学的に患者の白すべきで,将来,細胞生化学や細胞機能面からの積極的アプローチが必要となろう. BALL-1株樹立の経過でFCS添血病細胞に極めて類似していること, ② BALL-1 は樹立されず, HCS添細胞の細胞表面マーカーがEロれたことは興味深く, HCSがin ゼット0%, EACロ面Ig 100%で,患者の白血病細胞の細胞表面マ EBNA陰ゼット35 .6%,細 EA ロゼット40.1%, ーカーと-致性であったこと, ④ BALL-1細 dodiploidで胞表したこと, ③ 数回にわたる検索で色体構成が4本胞の染のマーカー染色体を有するpseu- あり,患者の白血病細胞の染色体構成もpseudodiploidをのように, ことは難しく,その検査結果の解釈も慎重を期胞性格を有し,患者の白血病細胞に由なわち, ① BALL-1細セプター, セプターが消失したものと考えられるが, 現在細胞表面マーカーの意義を正当に評価する今回,.私達が樹立に成功した細胞株(BALL-1 株)はB細ゼッゼット陽性細胞をほとんど認めなく示したことである.これ加培養液から加培養液からのみ樹立さ vitroにおける細胞の増殖開始に促進的に働くなんらかの物質を有し,培養細胞中に少数混在した正常B細のEBVによるtransformationをと考えられる.ヒ胞抑制したものトの造血器腫瘍細胞に由来する細胞株の樹立は容易なことでなく,現在までにALL18)-23). 33),リンパ腫24)-27),多発性骨髄腫 28)-30) ,急転時CML31)-32)患者から少数の細胞株らの点は前述のリンパ芽球様細胞株の特性とはの樹立が報告されているにすぎない.こまったく異なっている.な血病細胞に由来する細胞株の樹立は極めて困難細胞表面Igのheavy が λ型を示したが,こお, BALL-1細 chainがのことはRowe40)やFu ら41)がそれ-それ,正常リンパ球, CLL細たように同一細胞表面に2種と考えられ,染胞株が単-ク胞の μ, δ,light chain 胞で示しのIgを有するもの色体分析の結果とともにこの細ローン細胞から成ることを強く示である.造血細胞のうち,リとに白ンパ系の腫瘍細胞に由来する細胞株については, 1972年Minowadaら18)がALL患者からEBV抗原陰性で, T細胞表面マーカ-を有するMOLT株の樹立を初めて報告した.その後, T19)-22), B23)-30), Null 19),27).32).33)細胞性格を有するリンパ系腫瘍細胞株唆する.本症例で低 γグロプリン血症を認め, がそれぞれ数系ずっ樹立されている.文すべての免疫グロプリン分画が減少していたことについてはいくつかの可能性が考えちれる. 骨髄腫細胞とリンパ腫細胞に由来するB細胞株 24)-30)を除いては ,ヒト白血病性B細胞株としてすなわち,白の報告は, Minowadaら23)がALL患血病細胞の著増のため正常な免疫グロブリン産生細胞やhelper細胞が減少したこに成功したBALM株と,白血病細胞によるこれらの細胞への抑制効がBALM株果,あ考えた根拠は,細るいは多発性骨髄腫やWaldensttrom's macroglobulinemiaの細胞が細胞表面Igを献上, 者より樹立をみるだけである.彼らを患者の白血病細胞に由来すると胞表面Igのsubclassがそれぞ場合とは異なリ,白血病れ一致し,同じマーカー染色体の存在を認めた有してもその分泌能を欠い点である.ところがBALM株ていたことなどの可能性である. ALLの大多数胞集塊を形成し, EBNA陽は培養液中に細性である.このこと 770 中村一夫た,いわゆるリンパ芽球様細期にあったかは不明であるにしても, Burkittリ胞株と考えられ, EBNA陽性であることが特徴ンパ腫由来の細胞株以外にもEBNA陽的とされている.今回,著者が培養樹立に成功しは, EBV感染がBALM株樹立の経過のどの時性のリンよりtransformしパ系腫瘍細胞株が樹立される可能性を示す知見たBALL-1株として重要であろう.私達の樹立したBALL-1 がそれぞれ患者の白血病細胞のものと一致し, 株はEBNA陰 EBNA陰性である点がBALM株たく異なり, EBNA陰とはまっ性のヒト白血病性B細胞胞回転,細は,ヒトの白血病細胞の代謝,細胞機能,抗胞表面マーカーくの点でリンパ芽球様細胞株の性格とは異なっていた.細り扱胞株樹立の経加培養液からのみ樹立されたことは興味深く, HCSがEBVに原性などを研究する上で, 純粋な細胞材料を常に容易に供給でき,取胞形態,細性であり,多過で, HCS添株としては最初の報告である. BALL-1株は,細 transformationをよる正常B細胞の抑制し, in vitroにおける細胞の増殖開始に促進的に働くなんらかの物質をいが簡便であることから, in vitroにおける種有することを示唆するが,そ々の実験系の成立を可能にする.さらに, in vitro 未だ明らかでない.リンパ腫や骨髄腫に由来するにおける抗白血病剤の薬剤効果の判定に有用で B細胞株を除いては,ヒあるばかりでなく, in vivoにとしての報告はMinowadaらおける種々の実験系成立への可能性を秘めている点からも,すぐれた実験手段を提供するものとして重要である. である.と著者はB細語胞表面マーカーを有し,治療に抵ちに,この樹立に成功した.文例の患者の末梢血中のリンパ系細胞を培養に用い,細ころがBALM株はEBNA陽だけ性であとはまったく性のヒト白血病性B細胞株とは, 今後多方面にわたる白血病研究の上で極めて有用であり,すぐれた手段を提供するものと考えられる. 胞株(BALL-1株) 献上,現在まで多数のリンパ系細胞株の報告があるが,今細胞株のほとんどは正常B細胞株のBALM株しては著者の報告が最初である. BALL-1株抗性で急速な臨床経過をたどったALLの1症を経験した.さトの白血病性B細る点が著者の樹立したBALL-1株異なり, EBNA陰結の性状については日ではこれら胞がEBV感染に本論文を欄筆するにあたり,御懇篤なる御指導ならびに御校閲を賜わった恩師木村郁郎教授に深甚の謝意を表します.また,終始御懇篤なる御指導を賜わった三好勇夫講師,平木俊吉博士に深謝します. 文献 1. Seligmann, M., Preud' Homme, J. L. and Brouet, J. C.: B and T cell markers blood diseases and primary immunodeficiencies, globulins. Transplant. Rev. 16, 85-113, in human proliferative with special reference to membrane 1973. 2. Wybran, J. and Fudenberg, H.: How clinically useful is T and B cell quantitation? 80, 765 -767, 3. bound immuno Ann. Intern. Med. 1974. Seligmann, M.: B-cell and T-cell markers in lymphoid proliferations. N. Engl. J. Med. 290, 1483 -1484, 1974. 4. Alper, C. A.: B-lymphocyte malignancy. N. Engl. J. Med. 289, 154-155, 5. Piessens, W. F., Schur, P. H., Moloney, W. C. and Churchill, W. H.: Lymphocyte surface immunoglo bulins: Distribution and frequency in lymphoproliferative diseases. 1973. N. Engl. 1.Med. 288, 176-180, 1973. 6. Gajl-Peczalska, K. J., BloomfiIid, C. 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Establishment and characterization of human leukemic B-cell line (BALL-1) Kazuo NAKAMURA The Second Department of Internal Medicine,Okayama UniversityMedical School, Okayama, Japan (Director: Prof. I. Kimura) A human B-cellline designatedas BALL-1was establishedfrom the peripheral blood of a patient with acute lymphoblasticleukemia (ALL). Neither Epstein-Barrvirus (EBV) nor its genomewas detectable. The morphologicaland growthcharacteristicswereclearlydistinct fromthose of numerousEBV-positivelymphoblastoidcell lines previouslyreported. BALL-1 cellsprobablyoriginatedfrom the donor's leukemiccells judgingfrom their cytogenetic,mor phologicaland surfacefeatures. This BALL-1line is the first EBV-negativeB-cellline establish ed from ALL.