物質科学実験 CIII タンパク質の取り扱い

海洋生命・分子工学基礎実験
タンパク質の取扱い
(3)
細胞分子工学研究室担当
3. 試薬の調製 (2)
SDS-ポリアクリルアミドゲル
調製用の溶液を作る
試薬の調製
1. A 液を 25 ml
– 7.3 g アクリルアミド
– 0.2 g N,N’-メチレンビスアクリルアミド
– 以上の粉を蒸留水に溶かし,全量を 25 ml に合
わせる。
(注) アクリルアミドのモノマーは神経毒なので,手
につけないように( しびれる!)重合してポリマー
になったら無害。
試薬の調製
2. B 液を 50 ml
– 1.5 M Tris-HCl (pH 8.8) (分子量 121.14)
– 0.4% ドデシル硫酸ナトリウム(SDS),別名ラウ
リル硫酸ナトリウム
– 蒸留水に溶かして pH を調整し,全量を 50 ml
に合わせる。
試薬の調製
3. C 液を 50 ml
– 0.5 M Tris-HCl (pH 6.8) (分子量 121.14)
– 0.4% SDS
– 蒸留水に溶かして pH を調整し,全量を 50 ml
に合わせる。
試薬の調製
4. 泳動バッファー(電気泳動槽に入れる電極
バッファー)の 5 倍濃縮液を 100 ml
– 125 mM Tris (分子量 121.14)
– 960 mM グリシン(分子量 75.07)
– 0.5% SDS
– pH を調整する必要はない。