28pmF126S 抗腫癌 サ イ トカイ ン TNFの医薬 品化 を 目指 した活性増強型 リジ ン欠損 TNFに対 す る部位特異 的バ イオ コンジ ュゲ- シ ョン 井上 雅己 1,長野 一也 1,鎌 田 春彦 1,3,堤 康央 1 , 2 , 3 , ○古賀 悠里恵 1,2,向 洋平 1, 角 田 慎一 1,2, 3( 1 医薬基盤研 ,2阪大 院薬 , 3 阪大 MEI セ) 【目的】ポ リエチ レング リコール ( P EG)な どの水溶性高分子で蛋 白性 医薬 品を修 飾す る高分子バイオ コンジュグー シ ョンは､バイオ医薬 品の医薬価値 向上に最適 な DDSの 1つ と位置づ け られてい る｡ しか し､汎用 されてい る リジン残基 をター ゲ ッ トに したバイオ コンジュグー シ ョン法では､高分子鎖が活性発現 に重要 な リ ジン残基 を修飾す ることによ り致命 的な比活性 の低下 をもた らす ことが問題 とな ってい る｡ この点､当研究室では､ファー ジ表面提示法 によ り抗腫療サイ トカイ ン として知 られ る T NF中の全ての リジン残基 を他 のア ミノ酸 に網羅的に置換す る EG修飾 し､比活性低下を回避可能 とす る ｢ 部位特異的 ことで､N末端特異的に P NFの医薬 品化 に バイオ コンジュグー シ ヨン法 ｣ を確立 してきた｡本発表では､T 叶 うp EGバイオ コンジュグー シ ョンの最適化 を 目的に､分子量の異なる P EGを用 いて部位特異的バイオ コンジュゲ-シ ョンを施 し､P EG 分子量 と薬効 との相 関を i nv i t r o､i nv i v oにて解析 した｡ 【 方 法 ･結果 ･考察 】 当研 究室 で開発 した活性 増 強型 リジ ン欠損 TNF で あ る mu t TNFK9 0 Rを､分子量 5 ､1 0 ､2 0 ､4 0k Daの P EGで修飾 し､ゲル櫨過 によって EG化体 を分取 ･精製 した｡得 られたサ ンプル を用い､TNF受容体-の結合 モノP 親和性 を表面プ ラズモ ン共鳴法で､生物活性 を受容体依存的な細胞傷害活性 を指 EGで修飾 した群 におい 標 に評価 した｡その結果 ､興味深 い ことに､高分子量の P て もその受容体-の親和性 はほ とん ど低下 しなかった｡細胞傷害試験では､P EG の分子量依存的な生物活性 の低下が認 め られた ものの､野生型 T NFと比較 してそ の低下は軽微 なものであった｡現在 ､i nvi v oでの体 内安定性及び抗腫癌効果 を検証 EG分子量 と薬効の相 関解析 を実施 中である｡ し､P
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