物質科学実験 CIII タンパク質の取り扱い

海洋生命・分子工学基礎実験
タンパク質の取扱い
（3）
細胞分子工学研究室担当
4．試薬の調製（2）
SDS-ポリアクリルアミドゲル
調製用の溶液を作る
A 液を 25 mL 作る
• 7.3 g アクリルアミド
• 0.2 g N,N’-メチレンビスアクリルアミド
• 粉を蒸留水に溶かし，全量を 25 mL に合わせる
（注）
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アクリルアミドのモノマーは神経毒
手につけないように気をつける
重合してポリマーになれば無害
実習では教員か TA が作製したものを使います
B 液を 50 mL 作る
• 1.5 M Tris-HCl (pH 8.8) （分子量 121.14）
• 0.4% ドデシル硫酸ナトリウム（SDS），別名ラウリル硫酸ナトリ
ウム
• 粉を 35〜40 mL の蒸留水に溶かす
• pH を調整し，全量を 50 mL に合わせる
C 液を 50 mL 作る
• 0.5 M Tris-HCl (pH 6.8) （分子量 121.14）
• 0.4% SDS
• 粉を 35〜40 mL の蒸留水に溶かす
• pH を調整し，全量を 50 mL に合わせる
泳動バッファーを 100 mL 作る
o 泳動バッファーは，電気泳動槽に入れる液
o 作るのは 5 倍濃縮液＝直前に希釈して使う
• 125 mM Tris （分子量 121.14）
• 960 mM グリシン（分子量 75.07）
• 0.5% SDS
o 粉を 80 mL 程度の蒸留水に溶かす。
o 全量を 100 mL に合わせる（pH 調整不要）

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