尼崎周辺のタンポポの遺伝子解析この領域の塩基配列が完全一致したからと言ってクローンであることが証明されるわけではない兵庫県立尼崎小田高等学校が、もし変異が見られれば一個体から単為生殖したクローン集団であることの反証となる。また葉緑体 DNA の塩基配列と校外のタンポポの＜目的＞塩基配列を比較することにより雑種形成時の母方本校は JR 尼崎駅の南約 4 キロの市街地に立地すの個体が一致するかどうかが解析できる。もしデる。公園・庭・花壇・街路樹など人により管理さータベースと分布調査とが充実しており、うまくれた土地以外はすべてコンクリートとアスファル検索ができれば雑種形成が行われた起源にあたるトで覆われた環境である。地域が推定できるかもしれない。先に述べたとおタンポポの野外調査は全国規模で様々な人が係り、今年 4 月の尼崎近辺の調査ではカンサイタンって行なわれている。私たちも 2011 年春に JR 沿ポポなどの在来タンポポは 1 個体も観察されなか線より南側の尼崎市内のタンポポの調査を実施しった。た。観察されたタンポポはすべて帰化タンポポで、＜先行究からわかっていること＞カンサイタンポポなどの在来タンポポは 1 個体も雑種タンポポと帰化タンポポを形態的特徴のみ観察されなかった。セイヨウタンポポやアカミタに基づいて明確に判断することは困難である（小ンポポなどの帰化タンポポが観察され、帰化タン川ポポの雑種率は５０％であった。めには，採集されたみかけの帰化タンポポ各個体これに対し 6 月に本校 1 年生ＳＲ科の理科の授 2001）。雑種であるか否かを正確に判断するたについて遺伝子解析を行うことが必要である。業で実施した中庭のタンポポ調査では雑種率は１００％であった。その後 10 月に再調査した時も雑種率は１００％であった。また中庭で観察されるタンポポはすべてアカミタンポポで、今までセイヨウタンポポは観察されていない。この違いが生じた原因はとして次のようなことが考えられる。「中庭に生息するタンポポは過去に一度侵入し、一個体またはごく少数個体から単為生殖により増殖したクローンである。最初の雑種率が１００％であったため、現在も変化なく１００％のままである。」。いわゆるボトルネック効果図１雑種形成の模式図が中庭において観察されているのではないかと考＊伊藤明「近畿における雑種タンポポの分布状況」をえた。一部改変中庭のタンポポを採集し、DNA のクローン解析雑種タンポポの外見は帰化タンポポ（セイヨウを行えばはっきりするのではあるが、予算的にもタンポポもしくはアカミタンポポ）と似ているの技術的にも現時点では無理であるので、ひとまずで、形態的に帰化タンポポと判定された個体がカ葉緑体ＤＮＡのｔｒｎＬ－Ｆ領域のシーケンスをンサイタンポポ由来の葉緑体（J）を持っていれば行い、中庭のタンポポと校外の尼崎市街のタンポ雑種ということになる（図１）ポの塩基配列を比較することにした。＜遺伝解析方法＞種アカミタンポポ・雑種セイヨウタンポポは 3 つ 1. サンプルの葉を 3mm×3mm 切り取り、A バッフのグループにそれぞれ分かれた（図）。尼崎市街でァ 100μL を加え、よく撹拌し、98℃で 10 分間加採集した雑種セイヨウタンポポ 3 個体には変異が熱し、4℃に急冷する。（DNA 抽出液）見られたが、アカミタンポポ（3 個体）と雑種ア 2. DNA 抽出液 2µL に PCR 反応液を 13µL 加え、PCR カミタンポポ（3 個体）の塩基配列は完全に一致法により DNA を増幅する。した。 3.アガロースゲル(2%)で電気泳動した後、染色・今回得られた塩基配列を BLAST を用いてデータ観察し、雑種判別を行った。ベース検索を試みた。雑種セイヨウタンポポにつ 4. このサンプルを業者に委託し、塩基配列を決定いてはすべてカントウタンポポ（Taraxacum した。 platycarpum）が一番相補性が強かった（スコア：約 845）。雑種アカミタンポポについてはすべて Taraxacum calocephalum が一番相補性が強かった（スコア：約 825）。この種は地中海沿岸でよく採集されている種のようである。＜考察＞中庭のタンポポの葉緑体解析に結果、尼崎市街における雑種セイヨウタンポポのものと雑種アカミタンポポのものが含まれていた。中庭の雑種帰化タンポポの集団はクローンではなかった。今後は生物班自ら中庭において種子を観察してサンプルを採集し、アカミタンポポとセイヨウタンポポ図 2 塩基配列を基にしたグループ分けを区別する必要があると反省した。中庭帰化タンポポ : Z-NAKA-* 校外雑種アカミタンポポ : Z-AKAMI-* 可能性が高い。今回解析した尼崎市内の雑種セイ校外雑種セイヨウタンポポ : Z-SEI-* ヨウタンポポの塩基配列はすべて在来タンポポと校外アカミタンポポ : AKAMI-* 相補性が高かった。また変異がみられたことから＜結果＞葉緑体 DNA は雑種形成時の母親を反映している日本で複数回雑種形成しいることが推察される。雑種解析に用いた中庭および尼崎市内のタンポこれに対し雑種アカミタンポポ 7 個体の葉緑体ポの葉緑体ＤＮＡのｔｒｎＬ－Ｆ領域のシーケンＤＮＡのｔｒｎＬ－Ｆ領域は完全に一致し、相補スを業者委託し、塩基配列を得た。解析を行った性の高い個体の原産地は地中海沿岸であった。このは尼崎市街で採集したアカミタンポポ（3 個のことは日本に移入する前からヨーロッパで雑種体）・雑種アカミタンポポ（4 個体）・雑種セイヨを形成していたか、もしくはアカミタンポポの系ウタンポポ（3 個体）と中庭の雑種帰化タンポポ統の一つに在来タンポポと同じ配列を持つグルー（4 個体）である。プが存在する可能性が高いと思われる。少なくとアラインメント解析をおこない、グループ分けを行うと尼崎市街で採集したアカミタンポポ・雑日本への帰化後に形成されたものではなさそうである。今後のさらなる調査が期待される。