発現は、 LPS刺激後もほぼ一定であった。一方、未刺激の状態樹状細胞成熟過程で誘導されるチロシンホスファターゼの機能解析（PTPepsilon）およびPTP-1 Bの発現が、 LPS刺激後、上昇す田沼延公［北海道大学遺伝子病制御研究所／助手］ griseochromogenes由来の抗生物質であるトウトマイセチンでは発現がほとんどみとめられない、あるいは比較的低いPTPe ることが明らかになった。我々は最近、土壌細菌の一種であるS t r e p t o m y c e s が、PP1特異的阻害剤としてはたらくことを見出した。オカダ酸背景・目的に代表される既知の阻害剤が、セリン・スレオニン特異的プロテ樹状細胞は、生体内において、最も主要かつ最強の抗原提インホスファターゼのうち主にPP2A（protein-phosphatase 示細胞である。最近の研究により、樹状細胞に作用してその成 type 2A）を阻害するのに対し、トウトマイセチンは、主にPP1を熟・活性化を制御する種々のligand分子が明らかにされ、また、阻害するという特徴をもつ。 PP1とPP2Aは、ともに細胞内におけその受容体からの細胞内シグナル伝達機構が明らかになりつる主要なセリン・スレオニンプロテインホスファターゼであり、これつある。しかしながら、樹状細胞機能の調節・制御機構についらの活性は、細胞内の全プロテインホスファターゼ活性のほとんては不明な点が多い。どを占めることが明らかになっている。新規PP1特異的阻害剤、他の多くの細胞で明らかにされてきたのと同様に、樹状細胞トウトマイセチンを用いて、BC-1細胞の貪食におけるPP1の役においても、タンパク質のリン酸化は受容体からのシグナル伝割について検討した。まず、未成熟BC-1細胞をLPS存在下で達・細胞運動/遊走性の制御等に重要な役割を果たしている 24時間培養して成熟BC-1細胞とし、この細胞のFITC蛍光ラと考えられている。タンパク質リン酸化の負の調節因子であるプベルしたデキストラン（FITC-デキストラン）の取込み（エンドサイロテインホスファターゼは、シグナルの強さ、長さを適正に保ち、トーシス）能を測定した。LPSにより成熟させたBC-1細胞は、そ結果、樹状細胞の活性化や機能を調節する因子として、有力のままではほとんど貪食能をしめさないが、この細胞に、ケモカイな候補である。本研究では、樹状細胞の機能調節におけるプンの一種であるCCL19を添加することによりFITC-デキストランロテインホスファターゼの役割を明らかにすることを目的とした。のエンドサイトーシスが著しく上昇した。一方、成熟BC-1細胞を、予め1 μMトウトマイセチンで5時間の前処理を行っておくと、内容・方法実験には、 G-CSF 依存性マウス未成熟樹状細胞、 BC-1細胞を用いた。BC-1細胞における各種プロテインホスファターゼの発現を、ノーザンブロット法やウエスタンブロット法により検討した。プロテインホスファターゼは、その基質特異性により、チロシン残基特異的なものと、セリン・スレオニン残基特異的なものに大別される。発現が明らかになったいくつかのチロシン残基特異的プロテインホスファターゼ（PTP）分子種について、 siRNA CCL19によって誘導されるFITC-デキストランの取込みが、大きく減少した。これらの結果から、トウトマイセチンによるPP1の阻害により、成熟BC-1細胞のCCL19で誘導されるエンドサイトーシスが大きく阻害されることが明らかになった。すなわち、 CCL19により誘導される樹状細胞の貪食において、PP1が重要な役割を果たしていることが示唆された。今後の展望（small interfereing RNA）を発現するplasmidベクターやレト本研究により、特定のプロテインホスファターゼ分子種が、樹ロウイルスベクターを用いて、それらPTPの発現を細胞から特状細胞の活性化や機能の調節に関わることが強く示唆された。異的に欠損させることを試みた。また、生体内における主要なセ今後、これら各プロテインホスファターゼ分子種の機能、基質タリンスレオニン残基特異的プロテインホスファターゼのひとつでンパクを含めた作用機序を明らかにできれば、これらプロテインあるPP1 （protein-phosphatase type1）について、我々が新たホスファターゼを治療標的として、種々の免疫疾患に対する新に発見したPP1特異的阻害剤を用いて、BC-1細胞におけるたな治療法が開発できる可能性がある。さらに、現在開発が進 PP1の機能を検討した。められているがん免疫療法においても、樹状細胞は重要な役割を担っている。PTP-1BやPTPe、 PP1を標的とした樹状細胞結果・成果 G-CSF 依存性マウス未成熟樹状細胞、 BC-1におけるプロテインホスファターゼの発現をウエスタンブロット法により検討した。BC-1細胞をLPSで刺激し、刺激後2-24時間後の細胞を回収し、その全細胞抽出液のイムノブロット解析を行った（図１）。チロシンホスファターゼ、S h p - 1（ S H 2 - c o n t a i n i n g phosphatase-1）が未刺激のBC-1細胞に発現しており、その ― 21 ― の機能修飾を、それら癌免疫療法と組み合わせることにより、より良好な治療プロトコールを開発できるかもしれない。