カタログコード： m-EC ブイヨン m-EC BROTH OXOID コード：CM0990 2 CULTURE MEDIA E 組成（培地1Lあたり）の直接増菌に使用される1）。ノボビオシンは一次増菌培地の選択性を高めるために添加してもよい。組成中には緩衝乳糖ブイヨン及び Szabo 2）らの推奨に基づく低濃度の胆汁酸塩トリプトン ……………………………… 20.00 g 乳糖 ………………………………………… 5.00 g No.3を含有する。低濃度の胆汁酸塩は芽胞形成菌や腸球菌胆汁酸No.3 ……………………………… 1.12 g の発育を阻害するが、37℃でE. coliO157の発育は阻害しなリン酸水素二カリウム …………………… 4.00 g リン酸二水素カリウム …………………… 1.50 g 塩化ナトリウム …………………………… 5.00 g い。Okrendが提案した37℃（低温）でノボビオシンサプリメント（ SR181 ）（最終濃度 20mg/l ）を添加した場合、 E. coliO157の発育を抑制することなく共雑菌を抑制できる3）。 pH 6.9±0.2 E 方法ノボビオシン選択サプリメント(SR181) 1バイアルあたり：500mL用ノボビオシン …………………………… 10.00 現在、用いられている 1 つの方法は次の通りである mg （Okrend3）に基づく)。10倍希釈した検査材料を本培地に添加し、ノボビオシンサプリメントを加える。ストマッカーで2分間ストマッキングする。37℃で6時間、100rpmで振盪培養を E 調製方法本品 18.3g を 500mL の精製水に溶解し、 121 ℃で 15 分間、高圧蒸気滅菌する。溶解したノボビオシン選択サプリメント（SR181）を1バイアル添加する。行うか、35℃で24時間、静置培養を行う。培養後、振盪培養を行ったものは 10-2倍希釈、一昼夜培養したものは 10-6倍希釈する。適当な選択寒天培地に塗沫する(例：ソルビトールマッコンキー（CM813）やBCIG加ソルビトールマッコンキー。選択性を上げるため CTサプリメント（ SR172）を添加すると良い)。 37℃で24時間、培養を行うとE. coliO157は白色のコロニ E 用途・特徴ノボビオシンはStaphylococcus aureus（メチシリン耐性株を含む）や他のブドウ球菌のようなグラム陽性菌に対し有効ーを呈する。E. coliO157は、大腸菌O157検出キット「UNI」やドライスポットE. coliO157（DR120）で確認する。検査方法は参考文献を必ず参照すること。な抗生物質である。Haemophilus influenzae、Neisseria 属及本培地とノボビオシンサプリメント（SR181）はびProteus 属のある種を含めた一部のグラム陰性菌もまたノ USDA/FSIS 4）と AIFST 1）により獣肉や食鳥肉製品中の E. ボビオシンに対し感受性を示すが、大部分の腸内細菌は耐性 coliO157：H7やE. coliO157：NMを検出する選択増菌培地である。ノボビオシンは主として細菌の発育を抑制するが、に推奨されている。高濃度ではより感受性の高い菌に対し殺菌的に作用する事もある。ノボビオシンは主にDNA合成を阻害する（RNA合成も阻害するが、その程度はより低い）。DNAにおけるその作用は、特にジャイラーゼβサブユニットに ATP が結合する E 品質管理のを選択的及び競合的に阻止することに関係する。ジャイラ陽性コントロールーゼはループ状の2重らせんDNAから負の超らせんを導入す Escherichia coli O157 NCTC12900（非病原性）る酵素であり、低濃度のノボビオシンにより阻害される。しかし、ノボビオシン耐性E. coliは薬剤により影響されないジャイラーゼを有する。ノボビオシンはまた蛋白や細胞壁合成も阻害する。 m-ECブイヨン（胆汁酸塩が減量されている）は、食品及び環境試料（特に亜致死損傷を受けた冷凍食品中の菌）から 2 ─ 122 m-EC ブイヨン陰性コントロール Staphylococcus aureus ATCC25923 E 注意使用期限を過ぎたものや劣化が見られるものは使用しないこと。 E 参考文献 1. Desmarchelier, P. M. and Grau, F. H. (1997) Escherichia coli. In: Foodborne Microorganisms of Public Health 2 Significance. 5th Edition. pp.231-264.A. D. Hocking (Ed.). CULTURE MEDIA AIFST (NSW Branch) Food Microbiology Group, Australia. 2. Szabo, R. A., Todd, E. C. D. and Jean, A. (1986) J. Food Prot. 49: 768-772 3. Okrend, A. J. G., Rose, B. E. and Bennett, B. (1990) J. Food Prot. 53: 249-252 4. UDSA/FSIS Microbiology Laboratory Guidebook 3rd Ed. (1998) Chapter 5. Detection, Isolation and Identification of Escherichia coli O157:H7 and O157:NM (NonMotile) from Meat and poultry Products. m-EC ブイヨン 2 ─ 123