カタログコード：メンブラン乳糖グルクロニド寒天（MLGA） MEMBRANE LACTOSE GLUCURONIDE AGAR（MLGA） OXOID コード：CM1031 2 E 方法 CULTURE MEDIA E 組成（培地1Lあたり）検査方法の全てはThe Environment Agency - Methods for ペプトン …………………………………… 40.0 g Examination of Waters and Associated Material -' The 酵母エキス ………………………………… 6.0 g Microbiology of Drinking Water 2002, Part4, Method B: The 乳糖 ………………………………………… 30.0 g enumeration of coliforms and E. coli by single membrane fil- フェノールレッド ………………………… 0.2 g ラウリル硫酸ナトリウム ………………… 1.0 g ピルビン酸ナトリウム …………………… 0.5 g X-グルクロニド(BCIG) …………………… 0.2 g 寒天 ………………………………………… 10.0 g pH 7.4±0.2 tration technique.'に記載されている。検査する水検体をメンブランフィルター（直径47mm、セルロース素材でポアサイズ 0.45μ m)でろ過する。ろ過する検体の量及び希釈率は、フィルター上に 20∼ 80個程度のコロニーが形成されるよう調整する。浄化された水検体では検体 100mLをろ過する。汚染度の高い水検体は、少量の検体もしくは希釈を行ってろ過する。培地との間に気泡ができないよう本培地上にメンブランフィルターを置く。30℃で4時間培養後、37℃で14時間培養する。早ければ培養開始後12 E 調製方法時間でコロニーの形成が見られるが18時間まで培養する。本品88gを1Lの精製水に懸濁する。良く攪拌し、121℃で黄色と緑色のコロニーを全て算定する。黄色のコロニーは 15分間、高圧蒸気滅菌を行う。約50℃に冷却し、滅菌シャ推定大腸菌群であり緑色のコロニーはE. coliである。両方のーレに分注する。数を足した結果を大腸菌群数と見なす。本培地上の緑色のコロニーはE. coliと推定される。確認用の試験は特に必要ないが必要に応じて、上記参考文献に記載された方法に従って行う。 E 用途・特徴大腸菌・大腸菌群検査は飲料水の日常検査において最も重要である。この検査は糞便汚染を最も良く示唆する検査として、水質のモニタリング、水処理や消毒効果の評価にも用い 1）られている。細菌は本培地に置かれたフィルター上に発育する。培地に E 品質管理陽性コントロール Escherichia coli ATCC25922 はグラム陽性菌の発育を抑制するためラウリル硫酸ナトリウ Enterobacter aerogenes ATCC13048 ムが添加されている。 Pseudomonas aeruginosa ATCC27853 大腸菌群とE. coliは、培地上でおこる2つの生化学反応により容易に鑑別できる。乳糖の発酵は、酸の産生によりフェノールレッドで確認できる。酵素基質である 5-ブロモ- 4-ク陰性コントロール Bacillus subtilis ATCC6633 ロロ-3-インドリル-β-D-グルクロニド（BCIG）はグルクロニダーゼにより分解され、細菌の細胞内で青色の色素を形成する。大腸菌群は乳糖を発酵するため,黄色のコロニーを形成し、E. coliは乳糖発酵および5-ブロモ-4-クロロ-3-インド E 参考文献リル-β-D-グルクロニド（BCIG）も分解するため緑色のコ 1. The Environment Agency - Methods for Examination of ロニーを形成する1）。 Waters and Associated Material - The Microbiology of Drinking Water 2002. メンブラン乳糖グルクロニド寒天（MLGA） 2 ─ 219