5 豚病会報 No.51 2007 食肉処理場と農場において摘発されている豚サルモネラ症 高 橋 泰 幸(群馬県中部家畜保健衛生所) )による豚サルモネラ に、農場で下痢やチアノーゼ、呼吸器症状等の臨床症 症は主に肥育前期の豚に敗血症を引き起こし、死亡率 状を示し、病性鑑定の結果、肝臓の巣状壊死や化膿性 が高いため発生農場における経済的損失は大きい。一 肺炎等が認められ、肺、肝臓を中心に全ての主要臓器 方、近年、農場から普通畜として出荷された豚が、食 から分離された、1 3農場、18症例由来の1 8株を用いた。 肉処理場(と畜場)のと畜検査により豚サルモネラ症 病性鑑定を実施した2 7頭中16頭で、 と診断される事例が増加している。2 0 06年の当家保管 サーコウイルス( ( 型( 内における、と畜場および病性鑑定による豚サルモネ ラ症の発生件数は3 8戸、1 2 4頭と、前年比で約6倍に達 ) 、 Ⅱ)および ( 盪 方法 れた 薬剤感受性試験はアンピシリン( 抗体検査を、と畜場で 分離農場)と病性鑑定豚から (病性鑑定 法による が分離された農場(と畜場 が分離された農場 分離農場)を対象に実施し、併せて管内 リン( シン( ) 、セファゾ ) 、ストレプトマイシン( ファジメトキシン( )、スル ) 、トリメトプリム( ) 、 )、エンロフロキサシン( ) ナリジクス酸( する。 の9薬剤について、 法に準拠した寒天平板希 釈法により、最小発育阻止濃度( 材料と方法 )、カナマイ )、オキシテトラサイクリン( の浸潤状況についてもまとめたので、その概要を報告 プラスミドプロファイル( 1.分離株の性状比較 ) との混合感染症が疑われた(表1) 。 している。今回、と畜場および病性鑑定豚から分離さ 株の性状を比較した。また、 ウイルス、豚 )を測定した。 )は関崎の変法により プラスミドを抽出し、0. 8%アガロースゲルを用いて 盧 供試株 10 0 で電気泳動を行い、その保有状況を観察した。 遺伝子型別としてパルスフィールド電気泳動法 と畜場由来株は、2 0 0 4年7月から2 0 0 5年8月までに 1 4農場、18頭の肺、肝臓、脾臓および腸間膜リンパ節 ( )を実施した。制限酵素 を切断し、その切断パターン( から分離された25株を用いた。これらは、農場から普 通畜として出荷され、と畜場の生体検査で異常が認め た。 られなかった個体で、内臓検査で肝臓の出血壊死、肝 2.抗体検査 盧 と畜場 臓、脾臓および腸間膜リンパ節の腫脹等が認められた。 分離農場と病性鑑定 Ⅰにより )を比較し 分離農場の 抗体検査 発生農場由来株は、2 0 0 0年10月から2 0 0 4年1 0月まで 表1 材料(分離株の性状比較) Ⅰと と畜場で が分離された 農場と、 病性鑑定で が分離された4農場を対象に、2 0 0 3年以降に採材した、 ណ᧚ᤨᦼ 䈫⇓႐ ⊒↢ㄘ႐ 㪉㪇㪇㪋㪅㪎䌾㪉㪇㪇㪌㪅㪏 㪉㪇㪇㪇㪅㪈㪇䌾㪉㪇㪇㪋㪅㪈㪇 㪈㪏㩿㪈㪋㪀 㪈㪏㩿㪈㪊㪀 ଏ⹜ᩣᢙ 㪉㪌 㪈㪏 㪪㪚ಽ㔌ᣣ㦂 ⥃ᐥ∝⁁ 㪈㪏㪇䌾 ∝ᢙ䋨ㄘ႐ᢙ䋩 ౝ⤳ᚲ ઁ䈱∛ේ 䈭䈚 ⢄⤳䈱ⴊუᱫ ⢄⤳䇮⣛⤳䇮⣺㑆⤑ 䊥䊮䊌▵䈱⣲⣘ ਇ 㪋㪇䌾㪈㪉㪇 ਅ∯䇮䉼䉝䊉䊷䉷 ๆེ∝⁁ ⢄⤳䈱Ꮍ⁁უᱫ ൻ⤥ᕈ⢖Ἳ 㪧㪩㪩㪪㪭䇮㪧㪚㪭䇮 㪘㫇㫇㸈䇮㪪㫋㫉㪅㫊㫌㫀㫊 農場13 3検体、4農場2 03検体の血清を用いて抗体検 査を実施した。抗体検査は全菌体加熱抽出抗原を用い た 法により実施し、 値0. 4以上を 抗体陽 性豚とした。 盪 管内の浸潤状況確認のための抗体検査 2 00 1年度から20 06年度にかけて採材した管内農場 12 5戸8, 6 11検体の血清について 検査を実施した。 法により抗体 6 Proc Jpn Pig Vet Soc No.51 2007 成績 い た 株 は、と 畜 場 由 来 株 で は14農 場 の う ち 1 農 場 1.分離株の性状比較 (13 0 (12 0、1 00、5. 3 分離株は全て硫化水素非産生性の生物型 保有、10 0、72 保有、1 20 保有) であった(図1) 。 だった。 蘯 盧 薬剤感受性試験 と 畜 場、発 生 農 場 由 来 の 全 て の 株 で に耐性、 保有)と、農場由来株では1 3農場のうち3農場 、 、 制限酵素に 、 Ⅰを用いた パターンは、全体 で6パターンに分かれ、と畜場由来株で3パターン、 に感受性を示し、同一農場 農場由来株で4パターンあった。 由来株では同じ感受性成績を示した(表2) 。 盪 Ⅰでは、全体で 5パターン、と畜場由来株、農場由来株はそれぞれ3 は全ての分離株が、50 パターンに分かれた。しかし、二種類の制限酵素を用 の血清型特異病原性プ いて確認された違いは、バンド1、ないし2本であり、 ラスミドを保有していた。プラスミドを複数保有して 表2 分離 SC の MIC 分布(μg/ml) ㄘ႐↱᧪ᩣ㩿㫅㪔㪈㪏㪀 㪕㪇㪅㪈㪉㪌 㪇㪅㪈㪉㪌 㪇㪅㪉㪌 㪘㪙㪧㪚 㪚㪜㪱 㪪㪤 㪢㪤 㪦㪫㪚 㪪㪛㪤㪯 㪫㪤㪧 㪈㪌 㪈 㪥㪘 㪜㪩㪝㪯 㪈㪎 䈫⇓႐↱᧪ᩣ㩿㫅㪔㪉㪌㪀 㪕㪇㪅㪈㪉㪌 㪇㪅㪈㪉㪌 㪇㪅㪉㪌 㪘㪙㪧㪚 㪈 㪚㪜㪱 㪪㪤 㪢㪤 㪦㪫㪚 㪪㪛㪤㪯 㪫㪤㪧 㪉㪉 㪥㪘 㪜㪩㪝㪯 㪉㪊 䌓䌃 㪇㪅㪌 㪈㪉 㪈 㪌 㪉 㪋 㪈㪎 㪈 㪏 㪈㪍 㪊㪉 㪍㪋 㪈㪉㪏 㪉㪌㪍 㪌㪈㪉 㪕㪌㪈㪉 㪈 㪈㪏 㪈㪌 㪊 㪈㪏 㪈㪏 㪉 㪈㪎 㪈 㪋 㪏 㪈 㪇㪅㪌 㪉㪇 㪈 㪊 㪊 㪉 㪉㪉 㪉㪉 㪊 㪈㪍 㪊㪉 㪍㪋 㪈㪉㪏 㪉㪌㪍 㪌㪈㪉 㪕㪌㪈㪉 㪈 㪌 㪉㪇 㪉㪌 㪉㪌 㪈 㪉 䈫⇓႐↱᧪ᩣ 㪉㪈 㪊 㪉 㪈 ㄘ႐↱᧪ᩣ 䌓䌔 㪐㪇䌫䌢 㪌㪇䌫䌢 㪍㪅㪏䌫䌢 㪈㪊㪇 㪈㪉㪇 㪈㪇㪇 㪌㪇 㪌㪅㪊 図1 プラスミドプロファイル 㪈㪇㪇 㪈㪉㪇 㪎㪉 㪌㪇 7 豚病会報 No.51 2007 䈫⇓႐↱᧪ᩣ ㄘ႐↱᧪ᩣ 䈫⇓႐↱᧪ᩣ 䌘䌢䌡㸇 ㄘ႐↱᧪ᩣ 䌂䌬䌮㸇 図2 PFGE それ以外は全て同じであった。 (図2) 。 の豚で5 0%( 2.抗体検査 鑑定 盧 と畜場 分離農場と病性鑑定 農場では − 値の分布を示した。 表3に20 01年度から2 0 06年度にかけて実施した抗体 検査成績を示した。検査戸数で見た陽性率は2 00 2年か が確認された2 0 0 5年1 0月採材分では、 1 80日齢 㪦㪛୯ 㪈㪅㪍 㪉㪇㪇㪌 㪈㪅㪋 㪉㪇㪇㪋 㪉㪇㪇㪊 㪈㪅㪉 㪈㪅㪇 㪇㪅㪏 㪇㪅㪍 㪇㪅㪋 㪇㪅㪉 㪇㪅㪇 㪇 㪋㪇 㪏㪇 ᣣ㦂 㪈㪉㪇 㪈㪍㪇 㪉㪇㪇 図3 A 農場 ELISA 成績(20 03∼2 00 5) 㪦㪛୯ 㪈㪅㪍 㪉㪇㪇㪌 㪈㪅㪋 㪉㪇㪇㪋 㪉㪇㪇㪊 㪈㪅㪉 㪈㪅㪇 㪇㪅㪏 㪇㪅㪍 㪇㪅㪋 㪇㪅㪉 㪇㪅㪇 㪇 㪋㪇 ) 、残りの3 盪 管内の浸潤状況確認のための抗体検査 農場では2 00 4年 採材分までは抗体陽性豚が認められなかったが、と畜 場で 発生後の採材で1 0 0%( が分離された40∼12 0日齢を中心に29∼ 10 0%の抗体陽性率を示した。 図3、4に20 0 3年度から2 0 0 5年度に実施した5農場 の 分離4農場のうち、と畜場採材のみ実施した 1農場では 分離農場の 抗体検査 )の抗体陽性率を示した。一方、病性 㪏㪇 㪈㪉㪇 㪈㪍㪇 ᣣ㦂 図4 病性鑑定 SC 分離4農場 ELISA 成績(20 0 3∼200 5) 㪉㪇㪇 8 Proc Jpn Pig Vet Soc No.51 2007 に有効であることが確認された。 表3 抗体検査成績(2001∼2006) 㧙▤ౝⴡ↢ᬌᩏࠃࠅ㧙 は豚を主な宿主とすると考えられている血清型 であるが、台湾においては1 9 90年代初頭から、 ᐕ ᐲ ᬌᩏᚭᢙ 㓁ᕈᚭᢙ 㓁ᕈ₸(%) に よるヒトのサルモネラ症が報告されており、現在では 2001 52 8 15.4 2002 62 19 30.6 2003 69 19 27.5 サルモネラ症の治療に多用されるセファロスポリン系 2004 53 11 20.8 やフルオロキノロン系薬剤に耐性を示す株が増加して 2005 71 19 26.8 おり、臨床上、問題となっている。今回の薬剤感受性 2006 75 18 24.0 ヒトのサルモネラ症から分離される血清型として2番 目に多くなっている。また、近年のヒト由来株では、 試験成績では、と畜場由来株で 2株あり、 に耐性を示す株が に対しても他の株より高い 値 ら20から3 0%の間で推移していた。検査頭数で見た陽 を示していたため、フルオロキノロン系薬剤耐性株の 性率は20 0 1年度3. 0%、20 0 2年度7. 5%、20 0 3年度5. 7 出現に注意が必要である。 %、2004年 度4. 0%、20 0 5年 度3. 4%、20 0 6年 度3. 7% と畜場では生体検査や内臓検査等、と畜検査員の肉 眼による検査で異常が確認された場合に精密検査が行 であった。 検査を実施した実戸数1 2 5戸中6 0戸が抗体陽性で われる。そのため、サルモネラ属菌に感染しているが、 あった。この60戸の内、病性鑑定を実施し豚サルモネ 肉眼所見で異常が認められない家畜のと体が食肉とし ラ症と診断された農場は7戸、と畜検査において豚サ て流通する可能性がある。今後は農場において、 ルモネラ症と診断された農場は1 7戸、病性鑑定・と畜 を含め、家畜を宿主とすると考えられているサルモネ 検査両方において豚サルモネラ症と診断された農場は ラ属菌に対しても、公衆衛生分野への影響を考慮に入 5戸で、合計29戸で発生が確認された。また、抗体陰 れた対策を行う事が重要である。 性農場においても4戸が、と畜検査で豚サルモネラ症 今回、 ける と診断された。 法を用いた抗体検査により、農場にお の浸潤状況と感染時期の把握が可能である事 が確認された。しかし、家保が実施する農場の衛生検 考察 査において、肥育豚の抗体検査は通常60、90、120日 今回、普通畜としてと畜場に出荷された豚から分離 された と、下痢やチアノーゼ等を呈し、病性鑑定 齢を対象とし、疾病の発生が少ない1 5 0日齢以上の肥 育豚は対象に含まれない事が多いため、農場における の性状および農場に 15 0日齢以上の衛生状況は余り把握されていない。今 おける抗体保有状況を比較した。と畜検査および病性 後は家畜衛生および公衆衛生の両分野から、豚サルモ 鑑定時の内臓病理所見、分離株間の薬剤感受性試験、 ネラ症への対策が必要となるため、と畜検査でサルモ を実施した豚から分離された 、 の成績では、同一農場由来株を含め、大き ネラが分離された農場では15 0日齢以上も対象にした な違いは認められなかった。抗体検査成績において、 衛生検査を実施することにより、出荷日齢までの衛生 農場では出荷直前の18 0日齢のみ抗体陽性豚が認め 状況を把握した上で、農場に対する衛生指導を行う事 られ、4農場では の分離日齢を中心に抗体陽性豚 が多く認められたことから、臨床症状の発現に の 感染時期の違いが影響を及ぼす可能性が考えられた。 感染時期に違いが起こる原因については、今後検討し ていく必要があるが、 農場は抗体検査成績において、 病性鑑定 分離農場と比較してオーエスキー病や Ⅱを始めとする他の疾病への感染率が低いことか ら、肥育前期における農場の衛生状況の違いが一因と 推測された。また、20 0 1年度から実施している抗体検 査成績において、抗体陽性農場では豚サルモネラ症の 発生頻度が高いことから、抗体検査は汚染状況の把握 が重要である。 最後に菌株を分与していただいた、群馬県食肉衛生 検査所の方々に深謝します。
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