コアフコース特異的レクチンによる 糖鎖の分離 ~スギタケレクチン(PhoSL)HPLCカラムを使って ◇実験 PhoSL(フォースル)はキノコ(Pholiota squarrosa, スギタケ)から精製された コアフコース(core α1-6-fucosylated N-glycans)に特異的なレクチンです。 今回、PhoSLを固定化したカラムで、コアフコースを含むN型糖鎖の分析をおこないました。 ◇結果 コアフコースを 含まない糖鎖 コアフコースを含む糖鎖 カラム PhoSL-HPLC Column 溶離液 流速 カラム温度 検出 試料 注入量 10mM Ammonium acetate pH6.4 0.5mL/min 25℃ Fluorescence (Ex.320nm Em.400nm) PA(ピリジルアミノ)化糖鎖 5μL (5pmol) (150 mm×4.6 mm I.D.) Time(min.) コアフコースを含む糖鎖のみ、溶出時間に遅れが見られました。 糖タンパク質性医薬品の糖鎖は、医薬品の生理活性、安定性、体内動態及び溶解性などに大き く関与することが知られています。 そのため、均一な糖鎖が得られれば、糖タンパク質性医薬品の機能が制御できると言えます。 レクチンアフィニティークロマトグラフィーは、レクチンが特異的に糖鎖に結合する性質を利 用したクロマトグラフィーで、糖鎖構造のわずかな違いを見分けて分離します。 高速液体クロマトグラフィー(HPLC)用のレクチンHPLCカラムは、これまで糖鎖分析が主な 用途でしたが、拡散が少なく分離が良いため、糖鎖精製にも有効です。 レクチンの種類や固定化量、および溶離液などの条件を変えることで分離が変化し、また、複 数のカラムを組み合わせることで、より詳細な分析や分離が可能になります。
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