フコース特異的レクチンによる O 型糖鎖の分離 ~各種レクチン HPLC カラムを使って フコース特異的レクチンは複数ありますが、レクチンごとに結合する糖鎖は異なります。 今回、レクチン4種をそれぞれ固定化したカラムで、市販の PA 標識 O 型糖鎖の分析をおこな いました。 ● rAAL (ヒイロチャワンタケレクチン) ★ rAAL(リコンビナントヒイロチャワンタケレクチン) α1-2、α1-3、α1-4 フコースが付加した 糖鎖に結合しました カラム 溶離液 rAAL-HPLC Column (4. 6mm×150mm ) 20mM L-Fucose / 10mM Ammonium acetate pH6.4 溶出時間(分) ● AOL (麹菌レクチン) ★ AOL(麹菌レクチン) α1-2、α1-4、α1-3フコースが付加した 糖鎖に結合しました カラム 溶離液 AOL-HPLC Column (4. 6mm×150mm ) 20mM L-Fucose / 10mM Ammonium acetate pH6.4 溶出時間(分) ● UEA-Ⅰ (ハリエニシダレクチン) ★ UEA-Ⅰ(ハリエニシダレクチン) α1-2、α1-4フコースが付加した糖鎖に 結合しました カラム 溶離液 0 5 溶出時間(分) 10 UEAⅠ-HPLC Column (4. 6mm×150mm ) 20mM L-Fucose / 10mM Ammonium acetate pH6.4 15 ★は各レクチン HPLC カラムに結合しない糖鎖の溶出位置を示す Glc Gal GlcNAc Fuc ● Lotus (ロータスレクチン) ★ Lotus(ロータスレクチン) α1-2、α1-3フコースが付加した糖鎖に 結合しました カラム 溶離液 溶出時間(分) Lotus-HPLC Column (4. 6mm×150mm ) 10mM Ammonium acetate pH6.4 ★は各レクチン HPLC カラムに結合しない糖鎖の溶出位置を示す Glc Gal GlcNAc Fuc N 型と同じく O 型糖鎖においてもフコース結合様式の違いで、各レクチンとの結合性が異なり ました。 フコース特異的レクチンでも、N 型糖鎖、O 型糖鎖のいずれか、または両方のフコースに結合性 を示し、レクチン HPLC カラム分析からレクチンの糖鎖結合の多様性が見られました。
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