フコース特異的レクチンによる O 型糖鎖の分離

フコース特異的レクチンによる O 型糖鎖の分離
~各種レクチン HPLC カラムを使って
フコース特異的レクチンは複数ありますが、レクチンごとに結合する糖鎖は異なります。
今回、レクチン4種をそれぞれ固定化したカラムで、市販の PA 標識 O 型糖鎖の分析をおこな
いました。
● rAAL (ヒイロチャワンタケレクチン)
★
rAAL(リコンビナントヒイロチャワンタケレクチン)
α1-2、α1-3、α1-4 フコースが付加した
糖鎖に結合しました
カラム
溶離液
rAAL-HPLC Column (4. 6mm×150mm )
20mM L-Fucose / 10mM Ammonium acetate pH6.4
溶出時間(分)
● AOL (麹菌レクチン)
★
AOL(麹菌レクチン)
α1-2、α1-4、α1-3フコースが付加した
糖鎖に結合しました
カラム
溶離液
AOL-HPLC Column (4. 6mm×150mm )
20mM L-Fucose / 10mM Ammonium acetate pH6.4
溶出時間(分)
● UEA-Ⅰ (ハリエニシダレクチン)
★
UEA-Ⅰ(ハリエニシダレクチン)
α1-2、α1-4フコースが付加した糖鎖に
結合しました
カラム
溶離液
0
5
溶出時間(分)
10
UEAⅠ-HPLC Column (4. 6mm×150mm )
20mM L-Fucose / 10mM Ammonium acetate pH6.4
15
★は各レクチン HPLC カラムに結合しない糖鎖の溶出位置を示す
Glc
Gal
GlcNAc
Fuc
● Lotus (ロータスレクチン)
★
Lotus(ロータスレクチン)
α1-2、α1-3フコースが付加した糖鎖に
結合しました
カラム
溶離液
溶出時間(分)
Lotus-HPLC Column (4. 6mm×150mm )
10mM Ammonium acetate pH6.4
★は各レクチン HPLC カラムに結合しない糖鎖の溶出位置を示す
Glc
Gal
GlcNAc
Fuc
N 型と同じく O 型糖鎖においてもフコース結合様式の違いで、各レクチンとの結合性が異なり
ました。
フコース特異的レクチンでも、N 型糖鎖、O 型糖鎖のいずれか、または両方のフコースに結合性
を示し、レクチン HPLC カラム分析からレクチンの糖鎖結合の多様性が見られました。