フコース特異的レクチンによる N 型糖鎖の分離 ~各種レクチン HPLC カラムを使って フコース特異的レクチンは複数ありますが、レクチンごとに結合する糖鎖は異なります。 今回、レクチン 7 種をそれぞれ固定化したカラムで、市販の PA 標識 N 型糖鎖の分析をおこな いました。 ● PhoSL (スギタケレクチン) ★ PhoSL(スギタケレクチン) 側鎖の数にかかわらず、コアフコース(α1-6 フコース)が付加した糖鎖のみに結合します カラム 溶離液 PhoSL-HPLC Column (4. 6mm×150mm ) 10mM Ammonium acetate pH6.4 溶出時間(分) ● rAAL (ヒイロチャワンタケレクチン) rAAL(リコンビナントヒイロチャワンタケレクチン) コアフコースおよびα1-3 フコースが付加し た糖鎖に結合します ★ カラム 溶離液 rAAL-HPLC Column (4. 6mm×150mm ) 20mM L-Fucose / 10mM Ammonium acetate pH6.4 溶出時間(分) ● TxLC-Ⅰ (チューリップレクチン) TxLC-Ⅰ(チューリップレクチン) 2 本鎖、3 本鎖の糖鎖に結合しますが、 コアフコースの有無で結合性に違いが見ら れます ★ カラム 溶離液 溶出時間(分) TxLcⅠ-HPLC Column (4. 6mm×150mm ) 10mM Ammonium acetate pH6.4 ★は各レクチン HPLC カラムに結合しない糖鎖の溶出位置を示す Man Gal GlcNAc Fuc ● AOL (麹菌レクチン) ★ AOL(麹菌レクチン) コアフコースおよびα1-3 フコースが付加 した糖鎖に結合します カラム 溶離液 AOL-HPLC Column (4. 6mm×150mm ) 20mM L-Fucose / 10mM Ammonium acetate pH6.4 溶出時間(分) ● LCA (レンズマメレクチン) ★ LCA(レンズマメレクチン) 2 本鎖のコアフコースが付加した糖鎖のみ 結合します カラム LCA-HPLC Column (4. 6mm×150mm ) 溶離液 0.1M Methyl-α-D-Glucoside / 10mM Ammonium acetate pH6.4 溶出時間(分) ● PSA (エンドウマメレクチン) ★ PSA(エンドウマメレクチン) 2 本鎖のコアフコースが付加した糖鎖のみ 結合します カラム PSA-HPLC Column (4. 6mm×150mm ) 溶離液 0.1M Methyl-α-D-Glucoside / 10mM Ammonium acetate pH6.4 溶出時間(分) ● Lotus (ロータスレクチン) ★ Lotus(ロータス) α1-3 フコースが付加した糖鎖のみ 結合します カラム 溶離液 Lotus-HPLC Column (4. 6mm×150mm ) 10mM Ammonium acetate pH6.4 ★は各レクチン HPLC カラムに結合しない糖鎖の溶出位置を示す Man Gal GlcNAc Fuc 溶出時間(分) フコース特異的レクチンでも、フコースの結合位置や側鎖数の違いで結合性が異なることがわ かります。このような糖鎖結合の多様性は、レクチンの特長の一つです。
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