日本列島本州におけるコイワザクラ節（sect.Reinii)内2種4変種の系統的位置づけ倉田研究室4年 1151095 杉原早紀階層的分類科サクラソウ科属サクラソウ属節コイワザクラ節チチブイワザクラ (P. reinii var. rhodotricha) 種イワザクラコイワザクラ変種クモイコザクラミョウギコザクラチチブイワザクラ本研究では節以下を扱うコイワザクラ節（sect. Reinii）・日本固有節・4種5変種が各山地に隔離分布している（岩槻，1993 ） Narrow exserted capsule ＝＝ Ground resting bud コイワザクラ (P. reinii) 地上にできる越冬芽細くとがった蒴果 1つの独立した節（Richards, 2003）葉緑体DNAを用いたコイワザクラ節の系統関係 Mast et al. (2001) Cortusoides節コイワザクラ節枝上の数値はBootstrap値を示す．葉緑体DNAを用いたコイワザクラ節の系統関係コイワザクラ節は・単系統を形成した．・Cortusoides節と姉妹群を形成した． Cortusoides節しかし P. septemloba 95 引用元：http://www.farreachesfarm.com/Primulaseptemloba-p/p3172.htm コイワザクラ節いずれの研究でも扱われたコイワザクラ節は数種のみ. Mast et al (2001), Richards (2003) Mast et al (2006), Yan et al (2010). 枝上の数値はBootstrap値を示す．コイワザクラ (P. reinii）コイワザクラ節（sect. Reinii）の蒴果形態の変異コイワザクラチチブイワザクラクモイコザクラシナノコザクラスケールバーは5mm．しかし蒴果形態は必ずしも細くとがっていない．コイワザクラ節植物を多数用いた分子系統解析を行う必要がある．本州におけるコイワザクラ節2種4変種の葉形態毛無し毛有りコイワザクラチチブイワザクライワザクラ P. reinii P. reinii var. rhodtricha P. tosaensis ミョウギコザクラ P. reinii var. kitadakensis P. reinii var. myogiensis イワザクラ系統コイワザクラ系統クモイコザクラ E シナノコザクラ P. ｔosaensis var. brachycarpa スケールバーは1cm．本州におけるコイワザクラ節2種4変種の花粉形態（尾嶋，2014）コイワザクラチチブイワザクライワザクラ P. reinii P. reinii var. rhodtricha P. tosaensis C クモイコザクラミョウギコザクラ P. reinii var. kitadakensis P. reinii var. myogiensis D イワザクラ系統コイワザクラ系統 B A E シナノコザクラ P. ｔ osaensis var. brachycarpa F スケールバーは10μm．本州におけるコイワザクラ節2種4変種の花粉形態（尾嶋，2014）チチブイワザクライワザクラ P. reinii P. reinii var. rhodtricha P. tosaensis E B より客観性のあるDNAによってコイワザクラ節内のシナノコザクラクモイコザクラミョウギコザクラ分類を再検討する必要がある． P. ｔ osaensis var. brachycarpa P. reinii var. kitadakensis C イワザクラ系統コイワザクラ系統 A コイワザクラ P. reinii var. myogiensis D F スケールバーは10μm．目的本州におけるコイワザクラ節2種4変種の 1．系統的位置づけを明らかにする． 2．節内の系統関係を明らかにする．サンプルの採取地 E ■ ● ▲ C ● F ● ■ B ● ▲ 0 採取地神奈川県駒ケ岳 A コイワザクラ ● B チチブイワザクラ埼玉県武甲山 ● C クモイコザクラ山梨県天女山 ● D ミョウギコザクラ群馬県妙義山 ● イワザクラ系統 ▲ A ● コイワザクラ系統 ▲ D ● 種名 E イワザクラ ■ F シナノコザクラ ■ 岐阜県山県市長野県三ツ石山方法 1．DNAを抽出改良ガラス濾紙法(高倉, 2011) 2．DNA増幅 PCR法（trnLF領域, ITS領域） 3．塩基配列解析ダイレクトシーケンス法 (3100 Genetic Analyzer, Bioedit) 4．厳密合意樹作成最節約法（PAUP4.0 beta10）マッシャー画像 1．本州におけるコイワザクラ節2種4変種の系統的位置づけ節亜属本州におけるコイワザクラ節 2種4変種は・単系統群にまとまった 72 P. cortusoides 64 77 Cortusoides P. septemloba P. malvacea Malvacea ・先行研究で姉妹群を形成した Cortusoides節とは姉妹群を形成しなかったチチブイワザクラ 92 82 91 コイワザクラクモイコザクラミョウギコザクラ 100 コイワザクラ・Malvacea節植物のP. malvacea と姉妹群を形成したイワザクラシナノコザクラ 100 100 各枝上の数値はBootstrap値を示す（50％以上）. 1．本州におけるコイワザクラ節2種4変種の系統的位置づけ本州におけるコイワザクラ節2種4変種は・単系統群を形成した共通の祖先を持つことが明らかになった・Cortusoides節植物ではなくMalvacea節植物のP. malvaceaと姉妹群を形成したこれまで先行研究で言われていたCortusoides節ではなくMalvacea節とより近縁であることが示唆された P. Septemloba （Cortusoides節） P. malvacea （Malbacea節）引用元：http://www.farreachesfarm. com/Primula-septemloba-p/p3172.htm 引用元：http://encyclopaedia.alpinegar densociety.net/plants/Primula/malvacea コイワザクラ (コイワザクラ節) 2．本州におけるコイワザクラ節2種4変種の節内の系統関係節亜属本州におけるコイワザクラ節2種4変種・チチブイワザクラコイワザクラクモイコザクラミョウギコザクラが単系統群を形成した 72 64 77 チチブイワザクラ 92 82 91 100 ・イワザクラコイワザクラ系統シナノコザクラクモイコザクラコイワザクラミョウギコザクラが単系統群を形成したコイワザクライワザクラシナノコザクライワザクラ系統 100 100 各枝上の数値はBootstrap値を示す（50％以上）. 2．本州におけるコイワザクラ節2種4変種の節内の系統関係本州におけるコイワザクラ節内2種4変種・コイワザクラ，チチブイワザクラ，クモイコザクラ，ミョウギコザクラ，とイワザクラ，シナノコザクラがそれぞれ単系統群を形成した既存の葉形態による分類と同じ結果を示した。 2．本州におけるコイワザクラ節2種4変種の節内の系統関係祖先集団の移入氷期高地に退避最終氷期後イワザクラシナノコザクラクモイコザクラコイワザクラチチブイワザクラミョウギコザクラ現在地理的隔離によって種分化したことが示唆された。謝辞・京都大学大学院瀬戸口浩彰教授・京都大学大学院教務補佐梅津幸恵様・応用地質株式会社稲川崇史様・松井雅之様・岐阜県山県市いわ桜小学校の皆様・岐阜県自然保護委員江崎淳様・群馬県自然環境課・長野県環境部自然保護課・長野県中部森林環境局南信森林管理署・山梨県中北林務環境事務所件有林課・山梨県森林環境部みどり自然課本州におけるコイワザクラ節の分布コイワザクラチチブイワザクラクモイコザクラミョウギコザクライワザクラシナノコザクラ図：本州におけるコイワザクラ節の分布(佐竹ら,2011; 石井ら,2007)．標本庫における同種の葉コイワザクラ(Primula reinii) イワザクラ（Primula tosaensis）図：標本庫における同種の葉（牧野標本庫）．葉形態の変異イワザクラコイワザクラ（本州）（神奈川県箱根）シナノコザクラサクラソウモドキ（山梨県釜無）（採取地不明）図：葉形態の変異（吉野，2002より改図）．