北日本病虫研報 57：10－13（2006） Ann.Re pt .Pl antPr ot .Nor t hJ apan 岩手県における MBI D耐性イネいもち病菌の r epPCR法によるフィンガープリント解析とそれらのレース佐々木直子＊・荒井治喜＊＊・鈴木文彦＊＊ Re pPCR Fi nge r pr i nt i ngAnal ys i sofPyr i c ul ar i aor yz aeI s ol at e swi t hDe c r e as e dSe ns i t i vi t yt o De hydr at as eI nhi bi t or si nMe l ani nBi os ynt he s i s （MBI D）i nI wat ePr e f e c t ur eandt he i rPat hoge ni cRac e s NaokoSASAKI ，Mi c hi yos hiARAIandFumi hi koSUZUKI 2004年から2 005年にかけ岩手県で MBI D 耐性イネいもち病菌の発生が確認された．本耐性菌発生の遺伝的背景を解明するため，2004年と2005年に県内から分離したイネいもち病菌4 23菌株について，Pot 2r e pPCR 法によるフィンガープリント（FP）解析を実施した．その結果，これら菌株から5 2種類の FPが検出され，このうち耐性菌1 43菌株は９種類の FPに類別された．また，耐性菌39菌株のレースを検定したところ，これらは0 07. 0 および0 37. 1の２種のレースに判別された．FP解析，レースおよび分離地点の情報をもとに，県中南部に特定の遺伝子型の耐性菌（FP，I wa３；レース，037. 1）が優占して分布していることを明らかにした． Ke y wor ds :MBI D,pat hoge ni cr ac e s ,Pot 2r e pPCR,Pyr i c ul ar i aor yz ae 2001年，佐賀県において，カルプロパミド，ジクロシメット，フェノキサニルなどの MBI D 系統の薬剤（シ材料および方法１．供試菌株タロン脱水酵素型の薬剤，以下 MBI D）に耐性を示す 2004 年および2 005 年の県内の耐性菌発生調査（２，５）イネいもち病菌（以下耐性菌）の発生が確認された（７）．で一般栽培圃場から分離したイネいもち病菌株を本研究岩手県の MBI D の箱施用は，1998年から始まり，2001 に用いた．すなわち，2004年に北上市の８地点，11圃場年には岩手県病害虫防除所の調査で県内水稲栽培面積のの葉いもち病斑から分離した耐性菌８菌株を含む27 菌株，約25％で本剤が施用された．この様な状況下で，耐性菌 2005年に22市町村95地点，164圃場の葉いもち135病斑，の発生が懸念されたため2002年よりその発生調査を行っ穂いもち2 61病斑から分離した耐性菌1 35菌株を含む計てきた．その結果，2004年は12市町村42地点中，１市４ 396菌株を本研究に供試した．地点５圃場（２）で，2005年は22市町村95地点中，４市２．r epPCR法によるいもち病菌のフィンガープリン 15地点42圃場（５）で耐性菌の発生が確認された．ト解析鈴木らは（３），Pot 2r e pPCR 法を用いたイネいも r e pPCR 法は，Suz ukie tal . （４）の方法に準じてち病菌の個体群構造を解析し，九州各地で発生した耐性行った．プライマーはイネいもち病菌の転移因子 Pot 2 菌は地域ごとに異なる遺伝的背景を持ち，その起源は複の末端部反復配列内に設計したシングルプライマーを用数であると推定している．いた．本解析に供した鋳型 DNA は，供試菌株を9 mL そこで，本研究では，耐性菌の遺伝的背景や一般栽培の pot at ode xt r os ebr ot h（Di f c o社製）で2 5℃，４日圃場での耐性菌の伝搬ルートを明らかにするため，2004 間暗所静置培養した菌体を DNA 抽出キット（Ul t r a 年と2005年に岩手県で分離された耐性菌を含むイネいも Cl e anMi c r obi alDNA I s ol at i onKi t ，MO BI O 社製）ち病菌集団を対象に，Pot 2r e pPCR法によるフィンガーを用いて調製した．フィンガープリント解析は，検出さプリント（FP）解析を行い，それらのレースを同定しれたバンドの有無を比較することにより行った．なお，た．本解析では分子量が６kb以上のバンドは再現性が低いと判断し，解析には用いなかった．岩手県農業研究センター＊ I wat eAgr i c ul t ur alRe s e ar c hCe nt e r ，Nar i t a，Ki t akami ，I wat e ，0240003Japan 農業・食品産業技術総合研究機構＊＊九州沖縄農業研究センター ― 10―