Was sollte der Kliniker von der WHOKlassifikation der Lymphome wissen? Interdisziplinäres Zürcher Symposium 14. September 2006 Stephan Dirnhofer Institut für Pathologie Universität Basel Maligne Lymphome • Einführung WHO-Klassifikation • Klinische Bedeutung • Lymphomdiagnostik allgemein • Molekulare Lymphomdiagnostik Maligne Lymphome Nomenklatur und Klassifikation • Willis, 1948 „nowhere in pathology has a chaos of names so clouded clear concepts as in the subject of lymphoid tumors“ • Rappaport, 1975 „a histological classification should be clinically useful, scientifically accurate, reproducible, easily taught and readily learned“ Maligne Lymphome Nomenklatur und Klassifikation • Working Formulation, 1982 • Kiel Klassifikation, 1974 (updated 1992) • REAL-Classification, 1994 • WHO-Klassifikation, 2001 Maligne Lymphome WHO-Klassifikation (2001) • Prinzip: Ableitung der Lymphomsubtypen von den normalen Zellvorbildern • Kriterien: Klinik, Morphologie, Immunphänotyp, Genetik • NHL und HL • nodal und extranodal • Solide NHL und lymphatische Leukämien n = 25 n = 16 n=2 Blood, 1997 NHL: overall survival Blood, 1997 Maligne Lymphome Diagnostik • Klinik - maximal! • Pathologie - repräsentative Biopsie • Morphologie - obligat • Immunhistochemie - obligat • Genetik - optional Maligne Lymphome Klinische Information • • • • • • • • Lymphomanamnese?, wann?, Therapie? General. oder lokal. Lymphadenopathie Organomegalie? Hämatologie (Lymphozytose, Panzytopenie...) B-Symptome HIV-Status Immundefekte (Autoimmunkh, Tx, etc) Serologie (HTLV-1, EBV, Bartonella etc) Lymphom-Diagnostik: Voraussetzungen • repräsentative Biopsie (cave: Stanzbiopsie) • Transport/Kurzzeitlagerung • gute und rasche Gewebefixation • (Nativmaterial) • Hämatopathologe Molekulare Lymphom Diagnostik -Wie? PCR Sequenzierung FISH Southern Blot RT-PCR RISH Northern Blot IHC, Western Blot Lymphome: Molekulare Diagnostik (DNA) B-Lymphozyten T-Lymphozyten 90% 10% NHL Mantelzell-Lymphom Follikuläres Lymphom andere ... Klonale Proliferation Translokationen Molekulare Klonalitätsdiagnostik - PCR V-Gene D-Gene J-Gene 5‘ 3 3‘ D-J-Rearrangement V-D-Rearrangement V D J PCR-Primer IgH 69 V 30 D 6J TCR-g 14 V 5J Molekulare Klonalitätsgiagnostik - PCR PCR B-Cell 1 V D 85 bp J 1 : B-Cell 2 V D J 102 bp 1000 1 : B-Cell n V D JJ 132 bp 1 Molekulare Diagnostik - PCR: polyklonal 80-140bp 300-400bp Molekulare Diagnostik - PCR: klonal Lymphome mit assoziierten Translokationen: Diagnosis Follicular lymphoma Translocation t(14;18) t(3;v) MALT lymphoma t(11;18) t(14;18) Mantle cell lymphoma t(11;14) Diffue large B-cell lymphoma t(14;18) t(3;v) Burkitt lymphoma t(8;14) t(2;8) t(8;22) Anaplastic large cell lymphoma t(2;5) t(2;v) Genes Involved IGH and BCL2 BCL6 and num. partners AP12 and MALT1 IGH and MALT1 CCND1 and IGH IGH and BCL2 BCL6 and num. partners MYC and IGH MYC and IGkappa MYC and IGlamda ALK and NPM Alk and div. partners From: Cook, Diagn Mol Pathol 2004 FISH FISH: HER-2 Amplifikation im Mammakarzinom normal Translokationen - Single-Fusion FISH B (Antreiber) A (Onkogen) Normal 2O/2G Translokationen - Single-Fusion FISH B (Antreiber) B A A (Onkogen) Normal 2O/2G Translokation 1O/1G/1F Molekulargenetik: Indikationen • Definitive Lymphomdiagnose mittels Morphologie und Immunhistochemie unmöglich • Lymphknotenexstirpation: selten • Nadel-/Zangenbiopsie: gelegentlich-häufig • Knochenmarkbiopsie Staging : selten • Knochenmarkbiopsie ED : häufig • Lymphknoten-FNA: häufig • Ergusszytologie: häufig Algorhythmus Basel Vergrösserter Lymphknoten (LK) bzw. extranodaler Tumor LK-Exstirpation bei V.a. Lymphom/ persist. Lymphadenopathie (> 4 Wochen) Bakteriologie (optional) LK halbieren fixiert Unfixiert (FG-Abstrich) LK-Hälfte Morphologie V.a. Lymphom LK-Hälfte Molekularpathologie IHC IHC V.a.Tumor IHC Molekularpathologie Definitive Lymphom-Diagnose Metastase Reaktiv Dirnhofer und Went, 2007 Beispiele DD: Follikuläres-Lymphom vs FH ? Bcl-2 IHC Mann, 56a, Lk retroperitoneal IgH/bcl2 CD20 CD5 WHO-Klassifikation der Lymphome • Pathobiologisch sinnvoll, reproduzierbar, wissenschaftlich korrekt, klinisch relevant • Obligat: Klinik, Morphologie, Immunphänotyp • Optional: Rearrangement, Translokationen, Zytogenetik etc • Expertendiagnostik (Hämatopathologe) • Integrative Diagnostik! • Zukunft: molekulare Klassifikation (GEP) Lymphome: 30% primär extranodal • Haupttumor extranodal, +/- regionäre Lk • B-NHL • • • • • Marginalzonenlymphom (MALT-Lymphom) DLBCL Burkitt-Lymphom Mantelzell-Lymphom (Lymphomatoide Polypose) FL, CLL .......u.a. • T-NHL • Kutan, Nasal (NK/T), Intestinal (EATCL) ...u.a. • HL MALT-Lymphom, Magen: Lymphoepitheliale Läsionen Lymphomatoide Polypose; Kolonresektat Extranodales Mantelzellymphom Cyclin D1