逆相イオンペアクロマトグラフィー

逆相イオンペアクロマトグラフィー
B4
酒本 奈津美
逆相イオンペアクロマトグラフィー(RP-IPC)
イオンペア試薬を移動相に添加し、イオンペア(中性物質)
を形成させ、ODSカラムに保持させる分析方法
極性が小さくなる
保持が強くなる
チアミン(ビタミンB1)
分子内に4級窒素をもつ強塩基物質
移動相中では正電荷を帯びる
塩基性物質に対するイオンペア試薬(移動相が酸性側 pH2~3)
アルキルスルホン酸イオン
酸性物質に対するイオンペア試薬(移動相が中性側 pH6.5~7.5)
テトラアルキルアンモニウムイオン
保持機構
①イオンペアモデル
対象成分がイオンペア試薬とイオンペアを形成して固定相に取り
込まれる
②イオン交換モデル
対象成分が固定相に疎水吸着したイオンペア試薬と相互作用し
て保持される
③イオン相互作用モデル
静電気力ばかりでなく、固定相や移動相への親和性などの力に
影響される動的平衡を考えたモデル
試料の保持
移動相の有機溶媒含量、緩衝液濃度、pH
イオンペア試薬の種類、濃度により影響
イオンペア試薬のアルキル鎖が長い
保持は増大
イオンペア試薬の濃度がある一定までは高い
イオンペア試薬濃度が一定濃度に達すると保持の減少(foldover)
が観測される
イオン濃度と有機溶媒(アセトニトリル)濃度の適用範囲
赤:ヘキサンスルホン酸
(C6)
青:オクタンスルホン酸
(C8)
黄:デカンスルホン酸
(C10)
緑:過塩素酸
注意点
●イオンペア試薬を流し始めてからカラムが安定するまで
には時間がかかるので十分安定するのを待つ
●カラムよりイオンペア試薬を洗い流す時、水だけで流さな
い(特に塩基性イオンペア試薬を用いている場合)
疎水性部位をもつテトラアルキルアンモニウムは充填剤に
吸着したままで、シリカを劣化させてしまう
酸性緩衝液/有機溶媒=1/1~1/2の混合液で洗い流すとよ
い
イオン交換クロマトグラフィー
CH3
Si
O
Si
C18H37
CH3
O
Si
OH
O
CH3
Si
O
CH3
O
Si
Si
OH
C18H37