認知症・肝疾患を対象とした血液バイオマーカーによる新たな検査筑波大学医学部医療医学系准教授内田和彦 1 疾患の早期発見のための画期的な検査 Innovative Diagnostics バイオマーカー探索とアッセイ開発・臨床研究－治療主体から早期診断・予防へのパラダイムシフト－－治療主体から早期診断・予防へのパラダイムシフト－ご飯は？マーカー定量試薬気付かない間に肝硬変になってませんか？いま食べたでしょ？身近な方の症状に悩んでいませんか？ Ⅰ. 脂肪性肝疾患の新規バイオマーカーのアッセイ法の開発 Ⅱ．認知症早期発見のためのアッセイ法の開発 2 Ⅰ. 脂肪性肝疾患の新規バイオマーカーのアッセイ法の開発 3 Ⅰ-１肝硬変・肝がんに進行する脂肪肝(NAFLD) 肝硬変・肝がんに進行する脂肪肝(NAFLD) が増えています酸化ストレスサイトカイン過食・運動不足インスリン抵抗性脂肪肝慢性肝炎肝硬変肝細胞がん NAFLD: Non-alcoholic fatty liver disease NASH: Non-alcoholic steatohepatitis 出典 http://gastro.nts.jhu.edu/about.cfm 4 Ⅰ-2 従来技術とその問題点一般的な血液生化学検査、画像診断ではNAFLD、NASHの診断は難しく、NASHの確定診断は肝生検肝生検で肝生検行っている。肝生検は直接肝臓組織を観察できるので検査法としては最も確実であるが、侵襲を伴うため患者への負担が大きい。出典 http://gastro.nts.jhu.edu/about.cfm NAFLD, NASHの診断に有用な特異的な血液の診断に有用な特異的な血液バイオマーカーの開発が急務 5 Ⅰ-3 新規バイオマーカーの特徴と既存マーカーとの比較 • 新たに血液バイオマーカーp35タンパク質タンパク質を見出した。 • イムノアッセイ(サンドイッチELISA法)を開発し、健常、 NAFLD合計250例を用いた臨床有効性試験で、AUC ROC 0.97, 感度94%, 特異度98%の診断精度が得られた。 • 既存マーカーであるAST/ALTが正常値を示すNAFLDと診断された患者についても、バイオマーカーp35は疾患と識別する。 • p35はNAFLDの早期発見に非常に有用であると考えられる。 6 Ⅰ-4 バイオマーカーp35 バイオマーカーp35による疾患の識別 p35による疾患の識別正常(Normal)と疾患でp35は有意に血中濃度が異なる。 AST基準値基準値 p35基準値基準値 ALT基準値基準値 p35基準値基準値 Early NAFLD vs. normal NAFLD_vs_Normal 100 正常(Normal)と初期のNAFLDで、 ROC 0.97, 感度94%, 特異度98%, の診断精度 Sensitivity 80 60 NAFLDサンプルにおけるサンプルにおけるALT/ASTととp35の比較の比較サンプルにおける 40 Cut off ROC Sensitivity Specificity 20 4.7 fmol/mL 0.97 94% 98% 0 0 20 40 60 100-Specificity 80 AST/ALTが正常範囲でもp35は疾患と識別する(薄赤の範囲) 100 7 Ⅰ-5 想定される用途 • スクリーニング検査に用いることによる NAFLDの早期発見 • NAFLDの治療効果を可視化するマーカー • 未病状態からの健康・予防支援のための検査・フォローアップを含めたサービス 8 Ⅰ-6 実用化に向けた課題 • サンドイッチELISAのためのモノクローナル抗体とハイブリドーマは開発済。 • p35標準タンパク質のリコンビナントタンパク質の安定供給化 • NAFLD治療サンプルを用いた治療効果の臨床試験を行う。 • 薬事承認のための臨床試験を行う。 9 Ⅰ-7 企業への期待 • ELISAキット製造技術を持つ企業への委託製造 • 体外診断薬メーカとの薬事申請の協業とライセンスアウト • 検査試薬の販売と受託検査の協業 10 Ⅰ-8 本技術に関する知的財産権特許の名称特許番号新規肝がんバイオマーカーおよび該バイオマーカーを用いた肝がん検出方法特許第4801930号出願人㈱MCBI、㈱島津製作所発明者内田和彦、片桐卓也、佐藤優美、藤本宏隆特許の名称特許番号新規非アルコール性脂肪性肝疾患バイオマーカーおよび該バイオマーカーを用いた非アルコール性脂肪性肝疾患の検出方法特許第5322556号出願人㈱MCBI 発明者目野浩二、鈴木秀昭 11 Ⅱ．認知症早期発見のためのアッセイ法の開発 12 Ⅱ-１認知症の人って何人くらいいるの？認知症高齢者は全国で462万人万人全国で認知症予備軍は全国で400 全国で400万人 400万人 ※ 認知症有病率は15% 認知症有病率は ※有症率：65歳以上の高齢者人口に占める認知症高齢者の割合朝田隆ら「都市部における認知症有病率と認知症の生活機能障害への対応」平成25年厚生労働省報告書 13 Ⅱ-2 認知症になると日常生活に大きな影響がでてきます “認知症の前段階”で発⾒することが⼤切です！認知症を前段階で発⾒できると何がいいの？早期発⾒のメリット１早く⾒つければ進⾏を抑えることができる早期発⾒のメリット２早期の認知症だとしても症状の種類によっては治すことができる 14 Ⅱ-3 認知症検査のその問題点問診は手間と時間がかかる画像診断検査（MRI,PET）は、検査料が高い (自己負担で数万～十数万) 専門医が不足している認知症を前段階で発見できる血液スクリーニングマーカーが必要 15 Ⅱ-4 16 Ⅱ-5 ３つの血清タンパク質の組み合わせ３つの血清タンパク質の組み合わせで合わせで MCIと健と健常と健常を識別冷え取り健康ジャーナル５６号より転載 17 Ⅱ-6 新規マルチマーカーによるアルツ新規マルチマーカーによるアルツハイマー病（AD）とハイマー病（）と MCIの検査バイオマーカーの特徴の検査バイオマーカーの特徴【AD vs. 認知機能健常者】認知機能健常者】【MCI vs. 認知機能健常者】認知機能健常者】 ADをを92%の感度で検出の感度で検出 MCIをを90%の感度で検出の感度で検出 NDCの被験者を正しくNDCと判定した確率は約70%と若干低いが、総合的な判定率は83% NDCの被験者を正しくNDCと判定した確率は約50%と低いが、総合的な判定率は 75% MMSEを追加する事でNDCの被験者を正しくNDCと判定する確率は96%に上がり、総合的な判定率は98% MMSEを追加する事でNDCの被験者を正しくNDCと判定する確率は81%に上がり、総合的な判定率は85% 18 Ⅱ-7 想定される用途 • スクリーニング検査に用いることによる軽度認知障害(MCI)の早期発見 • 認知症前臨床段階からの予防支援のための検査・フォローアップを含めたサービス 19 Ⅱ-7 企業への期待認知症は、前段階で発見することが重前段階で発見することが重要！しかし! 早期発見のための検査を受けただけでは不十分！認知症を予防するための予防プログラ予防プログラム予防プログラム・予防サービス等予防サービス等の予防支援が必要の予防支援 20 Ⅱ-8 本技術に関する知的財産権特許の名称認知機能障害疾患のバイオマーカー及び当該バイオマーカーを用いる認知機能障害疾患の検出方法国際出願番号 PCT/JP2013/067785 出願人㈱MCBI、国立大学法人筑波大学発明者内田和彦、目野浩二、鈴木秀昭、西村吉典 21 お問い合わせ先問い合わせ先筑波大学国際産学連携本部教授（産学連携）産学連携部産学連携企画課技術移転マネージャー山本信行ＴＥＬＦＡＸ e-mail 029－859 － 1493 029－859 － 1693 yamamoto.nobuyuki.ge＠tsukuba.ac.jp 22