一般研究用 in vitro 実験用 PhosSTOP ブリスターパック入りホスファターゼインヒビターカクテル Cat. No. 04 906 845 001 (10 錠) Cat. No. 04 906 837 001 (20 錠) Cat. No. 07 324 723 001 ( 2 錠, トライアルパック) Ver.3/2012.12 保存温度 15~25℃ 製品説明 PhosSTOP はあらかじめブレンドされたホスファターゼイ ンヒビターカクテルの水溶性タブレットです. 多種類のホスファターゼ(酸ホスファターゼ、アルカリホ スファターゼ、セリン/スレオニン(PP1, PP2A, PP2B)) 、チロ シン(PTP)プロテインホスファターゼを阻害し、脱リン酸化を 防止しますので、リン酸化タンパク質の精製や検出に適して います. 広範囲の生物種(哺乳類、昆虫、植物など)の細胞や組織 に使用できます.組織化学用の緩衝ホルマリン固定液(ホル マリン含有バッファー)中でも使用できます. PhosSTOP と cOmplete プロテアーゼインヒビターは併用して 使用することができますので、タンパク質の分解と脱リン酸 化を同時に防ぐことができます. 本製品はまた、cOmplete His-tag Purification Resin または Column を使った His-Tag タンパク質精製に使用することがで きます. アプリケーション 単離されたホスファターゼ活性に対する阻害: 様々なタイプのホスファターゼに対する阻害能を、遊離リン 酸を検出するマラカイトグリーンアッセイを用いて測定しま した. 各アッセイは 1x 濃度で行いました(10 ml 当り 1 錠). ホスファターゼ アルカリホスファターゼ ホスファターゼ 阻害活性(%) 15 分 活性(U/10 ml) インキュベーション後 140 U 98.4% 2U 93.7% 640 U 99.7% ウサギ PP1 200 U 98.6% ヒト PP2A 500 U 94.4% ヒト PTP 500 U 96.7% (仔牛小腸) 酸性ホスファターゼ (ジャガイモ由来) 酸性ホスファターゼ (ヒト) 細胞抽出液中のホスファターゼ活性に対する阻害: 各アッセイで異なるリン酸化ペプチドを使用し、遊離リン酸 をマラカイトグリーンアッセイで検出しました.表中は阻害 効率(%)を示しています.各アッセイは 1x 濃度で行いまし た(10 ml 当り 1 錠). ライセート AP SP PP1 PP2A1 PTP1 A4313 100% 98.9% 96.2% 80.2% 67.1%1 注意事項 本製品は毒物を含みませんが人体に有害です.誤食や誤飲 に注意してください. タブレットは注意してパックから押し出してください.指 や爪で開封しますとタブレットが割れることがあります. ワーキング溶液の作成 10ml の溶液(溶解バッファーなど)に PhosSTOP 1 錠を溶解 してください. 同じ 10ml 中に 2 錠使用することもできます. COS3 トウモロコシ 2 タバコ 2 昆虫細胞 3 ストック溶液の作成 PhoSTOP1 錠を 1ml に溶解してください(10x 溶液).この 10x ストック溶液は、+2℃-+8℃で約 1 ヶ月、-15℃- -25℃で 6 か 月は保存できます. 100% 100% 100% 69.0% 95.8% 97.8% 52.3%1 72.2% 68.1%1 89.9% 93.0% 100% 70.2% 86.8% 96.8% 94.6% 100% 10.9%1 96.0% 50.2%1 1 細胞ライセート中の他の酵素による干渉が発生 2 P-PER Plant Protein Extraction Kit(Pierce)使用 3 cOmplete Lysis-M Kit 使用 ロシュ・ダイアグノスティックス株式会社 〒105-0014 東京都港区芝2丁目6番1号 TEL.:03-5443-5287 FAX.:03-5443-6654 E-Mail:[email protected] http://www.roche-diagnostics.jp 1
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