【学会発表】演題名スフィンゴ脂質の食品機能性について発表者木下幹朗 1、間和彦 1,2、小野治三郎 2、菅原達也 3、小田有二４、櫛泰典 1、宮澤陽夫５、大西正男 1 （帯広畜大・生資科 1、日本製粉・中研 2、国立健康・栄養研 3、農研機構・北農研４、東北大院・農５）学会名日本農芸化学会２００３（口頭発表）発表日２００３年３月【発表内容】目的動物起源のスフィンゴ脂質は抗発癌作用や各種細胞へのアポトーシスを誘導することが知られて 1、2）いる。我々は植物スフィンゴ脂質の機能性について検討してきたが、今回は植物セレブロシドからスフィンゴイド塩基およびセラミドを調製し、植物スフィンゴ脂質の構造とアポトーシス誘導活性との関連についてヒト結腸がん細胞株を用いて検討した。方法各種の植物や真菌からセレブロシドを分離精製し、常法によってスフィンゴイド塩基画分を調製し、逆相 HPLC によって各種スフィンゴイド塩基の単一分子種を得た。アポトーシス誘導活性は、5 Ｘ104cell/cm2 の Caco-2 細胞を２４時間 10％牛胎児血清添加 DMEM 培地で培養した後、血清未添加の DMEM 培地に切り替え、これに 0〜50M のスフィンゴ脂質誘導物を添加した。アポトーシスに陥った細胞は、細胞核を 0.05% 4',6-diamidino-2-phenyliodole （DAPI）で染色して蛍光顕微鏡下で計測された。また、スフィンゴ脂質との連関が示唆されている、β—カテニンの動態はウェスタンブロット法で解析した。結果 20µＭのスフィンゴイド塩基分子種(d18:24t,8t、d18:24t,8c、および 9-Me d18:24t,8t)を添加すると、動物由来の trans-4-Sphingenine(d18:1４ｔ)や 4-Hydroxysphinganine(t18:0)と同様に 10％のアポトーシス細胞が認められ、特に、d18:24t,8c、および 9-Me d18:24t,8t が他の分子種と比較して高い傾向が認められ、スフィンゴイド塩基投与で、細胞内β—カテニン含量が減少した。また、分化させた Caco-2 細胞では、スフィンゴイド塩基でのアポトーシスはほとんど誘導されなかった（３％以下）。以上の結果より、１）スフィンゴイド塩基によるアポトーシスにはβ—カテニン（細胞増殖を亢進させる wnt-β—カテニン経路の初発タンパク）の減少が関与する。２）接触阻害により Caco—２細胞を分化させると、アポトーシスが減少することが明らかになった。