愛知教育大学研究報告, 硬骨 46 (自然科学編), pp. 31 魚類の 42, March, 1997 受精(I) 岩松鷹司 (生命科学領域) Fertilization in Teleostean Takashi Fishes IWAMATSU (Department of Biology) コイCypri、lUS、フンジュルスFundulus、サケ0丿zar一 I 序言 hynchm、メダカOryziasおよびタナゴRkodettsなどで、数種の卵生のものに限られている。魚類の受精受精,それは2つの異形の細胞の合体によって1つの新しい細胞を形成する過程である。その過程は異が体系的に研究され始めたのは､半世紀ほど前からで、なった組織で形成されたそれら両細胞の出会いで始ま決して古くはない。そのことは多くの総り,細胞相互作用および細胞周期の基本現象がそれに説14･21･22･29･82･100,136にみることができる。続く。受精に必須である要素がどのようなもので,そ II 受精の準備れらが卵にいつどのようにして揃うか。それは,濾胞受精のために卵に準備されるものは分化のときに始ま内で卵母細胞の形成から成熟までの排卵前の過程に揃り、受精後もその役割を担う。うはずである。発生を保証する卵黄のような成分の蓄積,多精受精防止及び発生中の胚を保護するための卵膜の形成,侵入した精子核が卵核と出会うための卵門の位置の決定,そして減数分裂の完了にしても,受精・発生のための活動である。すなわち構造・機能上の両面から見て,受精の活動は卵の分化・成長・成熟の段階からすでに始まっていると言っても過言ではない。 1960年代に入って,われわれは,この観点から,卵母細胞の形成,成長,成熟,そしてその受精能の獲得の研究を通して,受精の研究を展開させてきた。近年,細胞の分裂サイクル機構の解明に焦点が絞られ,遺伝子産物の機能に関する研究が活発になってきた。そのため,現時点においてこれまでの研究成果全体を見渡し,どのような問題がどの段階まで解明されたか,どのような問題がまだ未解決の状態にあるかを明確にするように迫られている。ここでは,特に硬骨魚の卵の受精に関して,これまで解明された点を紹介すると共図1 メダカの精子の形態にその重要点について記述する。受精の研頭部に丸い核(N)をもち,中片部(MP)には主としてミトコンドリア(M) 究材料にされてきた主な硬骨魚はゼブラを含む.鞭毛(F)は,基部には基底小体(中心粒,C)をもち,周りにフイッシュBmれC扇面into,ニシンClubea, は波動膜(*)をもつ. 31- 岩 1 松鷹司をなしている。したがって,多くは球状をなす頭部の魚類精子の大きさと運動速度大きさは魚類全般に小さい(表1)。図1に見られるように,主として頭部には核と中心粒,中片部にはミトコンドリア,尾部は波動膜をもつか,もたない鞭毛からなっている。核に隣接した鞭毛基部にある基底小体 (中心粒)は,卵内侵入後,両受精前核の合体および卵割に重要な役割を果たす。細胞膜外面には卵を認識するための糖が分布しているらしく,レクチンによる精子間の凝集が見られる。 (2) 卵卵の大きさは魚種によって異なるが,直径が10㎜を超える大きいものはなく(表2),その形は卵形を示すものはそれ程多くはない(図2)。 a.卵膜卵母細胞は分化して間もなく,濾胞細胞に取り囲まれる。やがて濾胞細胞と相互作用をもつ無数の微小突起を生じ,分裂の休止状態に入る。そしてゴナドトロピン(GTH)の刺激で発達した濾胞の頼粒膜細胞から分泌されるエストロゲンが一定のレベルに達すると, 肝臓細胞はそのホルモンの刺激を受けて卵黄(vitellogenin, MW. (ZI3)(メダカ28 420kDa; pi. 3.8-4.0)26,27および卵膜 ; ニジマス36)のタンパク質など卵形成に必要なタンパク質を活発に合成するようになる。卵母細胞は,一定の発達段階から,肝臓で合成されて血液によって運ばれたそれらのタンパク質を用いて,卵膜や卵黄を形成し始める。走査型電子顕微鏡で 1 配偶子の形態観察できる卵膜表面は,形態はもとより分子レベルで雌雄両配偶子は互いに受精するのに適合した極性をも受精時には精子の行動に影響を及ぼすと考えられるもつ形態へと進化を遂げてきたと考えられる。雄性配偶子である精子は雌性配偶子である卵の位置にまで移動運動し,卵内に侵入するのに適した形態をしており,卵は新細胞として活動し,個体へと発生するのに必要な構成成分を備えた形態をしている。 (1)精子原生殖細胞から精原細胞に分化したのち生じた精母細胞は,2回の減数分裂を完了して精細胞になる。そして,鞭毛が生じると共に精子に変態する。精細胞は,中心粒から生じた鞭毛の位置の反対側の頭部先端には,ほ乳類の精子とは違って,先体をもたない。すなわち,精子は変態中,細胞質を失い,頭部は核膜に包図2 硬骨魚の代表的な卵形(Ginsburg, まれた凝縮クロマチンが主体 -32- 1972より改図) 硬骨魚類の受精(I) 研究がある。しかし,卵膜成分の供給が卵母細胞ある表2 いは濾胞細胞のいづれであるかについても現時点では数種の魚類の卵門の形態判明していない3･22･67.なお,魚類の卵膜に関する総説はDumont d and Brummett (1985)16及びYamagami ｢｡(1992)123にみることができる。魚類において,成熟未受精卵の卵膜を構成しているタンパク質は,主として2 3種類の糖タンパク質で, 分子量が類似している(表3)。これらの分子量の大きさは,マウス(ZP1,200kDa; ZP2, 83kDa)76,ウシ(ZPl, 78kDa: 21kDa)83,ヒト(ZPl, 92-80kDa;ZP2, 62-54kDa)6,さらには二枚貝 (220kDa; り69,ZP3もメダカのZI3と33%同じである78.先体をもち,卵膜を溶かして貫通するほ乳類精子は,卵膜と一ヵ所で結合して先体酵素によって卵膜の糖タンパク質を溶かして卵表に接する。一方,硬骨魚類は卵膜に精子の通過を許す卵門をもち,精子先体をもたない。しかし,卵膜表面に達した精子をその小さい卵門に導く構造や物質が卵膜表面や卵門に存在することが期待される。これまで,卵膜外表に粘性多糖64,糖タンパク質(メダカ44),さらには特定の形態(図3)をもつ卵が知られている。メダカ未受精卵では,卵膜の外表及び卵門・卵門管内に卵膜糖タンパク質ZI1-2及びZI3 がまばらに存在し,精子を卵表に引き留め,卵門内に効果的に導いている。上記のように,メダカのZI3は精子との結合力がある点でも,マウスの精子と結合力のあるZP3とは酷似している。以上のように,卵膜は卵母細胞の時期には微小突起を発達させて分裂を抑制することによって成長させるのに役立ち,受精時には構成タンパク質の変化によるあり,十分なことはまだ明らかではない。メダカの卵膜の形成に関して, Tsukahara (1971) "S Tesoriero (1980)115およびHartとDonovan(1983)3oの形態的 - 33- Zp3, 66-58kDa; ZP3, 180kDa)9とは決して大きく異なるものでヒラメの雌特有のタンパク質と約28%が同じであ ZP3, 64kDa; U㎡o はない。むしろ,マウスのZP2にみられるようにシロが,その分子レベルでの研究はまだ始まったばかりで 120kDa; ZP2, eloneatulus 岩図3 松鷹司特殊な卵膜の表面構造をもつ卵の写真(R. A-C:Luciocゆhaltts A,D: bar, 500μm; si).の卵, Riehl博士のご好意による) D-E:S蛍石soma B: bar, 10μm; C: bar, 100μm; - 34- aureumの卵, E: bar, 50μm. 硬骨魚類の受精(I) 卵門に精子を導く効果を無くしたり,硬化・収縮してした微小突起の間を埋めるようにして卵膜の最外層卵門の閉鎖による単精機構に役立ち,正常な発生を保 (ZO)が形成される。その内側に卵膜内層(ZI)が生証している。じ始めた後に,類粒膜細胞から分化した卵門細胞は卵 b.卵門表に向けて微小管とトノフィラメントの芯をもつ太い卵母細胞から個体に発生が可能である卵細胞に分細胞突起を押し込むように蛇行しながら伸ばす(図化・発達することは,どの生物にとっても種族保持に 6)。卵門細胞の太い細胞突起は,卵膜形成開始から卵何より大切なできごとである。成熟卵を見ると,卵核表に接着していて,その周りを卵膜成分が満たしていは動物極にある卵門のそばにあり,侵入した精子核とくのではなく,卵膜内層が形成され始めて後に,卵膜合体するのに都合のよい位置に存在する。特に卵黄のに差し込む形で卵表に接着する。そのため,卵門の周多い魚卵においてその極性が明確である。最近メダヵりの卵膜外層と内層が内側に引きつっている。卵門は卵において,卵の極性が濾胞細胞と卵母細胞との相互卵膜が厚く形成されるにつれて,そのキノコ型の卵門作用によって決定されることを示した。すなわち,卵細胞の握れた突起を鋳型として,卵膜が完成すると同母細胞において卵黄核の出現・発達と共に,そこから時にでき上がる8o。同様なことがワカサギ出される情報に応じて穎粒膜細胞が卵黄核に面した卵 (Hypomesvis)やニシン(Clupea)でも報告されてい表に密集するようになる。それらの濾胞細胞は卵膜形る87･114。卵門細胞の突起は卵母細胞の成熟時に起きる成と時を同じくして,卵核と卵黄核とを結ぶ軸(将来微小管とトノフィラメントの退化・消失で萎縮し,卵の卵軸)を中心に一定方向に移動(回転)運動を始め表から離れて卵膜から脱却する55･81。こうして,排卵時る呪卵黄核の位置が植物極になり,その反対側か動物に卵門が開口する。卵膜は,外敵から卵を護る必要の極になって,その動物極に穎粒膜細胞から分化した卵ない卵胎生魚では薄い。卵生魚でもカレイ科の魚卵の門細胞が位置するようになる(図4)。こうして卵軸はように漂泳性のものの卵膜は薄く,水底性の卵では厚卵黄が形成される以前に決定される。しかし,動物極い1o9。卵膜がそうであるように,卵門の形態も魚種にで卵門細胞が,穎粒膜細胞からどのように誘導され, よって異なっており(表2),Riehl(1980)95は卵門を分化するのかについては全く不明である。卵門をもつ魚卵のような偏黄部において,どのように卵核が部門の傍の動物極側に位置するようになるかについても答えはまだ出されていない。卵門を数十個もつ軟骨魚類8,22と違って,多くの硬骨魚類は動物極に一個の卵門をもつ(図3,図5)7･15･3o･54･6o･64･lo9。卵膜の一部である卵門は濾胞の頼粒膜細胞から分化した卵門細胞の関与によって,卵膜に形成される17,18.55,80,87,88,99.109,110,114, 122･134･135。メダカの若い卵母細胞において,卵表に発達図4 メダカ卵の卵形成過程と動植物極の決定の模式図 AF:付着糸,AP:動物極,CA:表層胞,CH:卵膜, MC:卵門細胞,MP:部門,N:核,VP:植物極,Y:卵黄, 図5 YN:卵黄核,YV:卵黄小胞.卵母細胞を貫く中心の線は動植物メダカの卵門上図.動物極付近の卵膜外表(矢印:卵門). 極軸を示す. bar, 100μm. 下図.卵門の外観. - 35- bar, 10μm. 岩松鷹司 vestibule (卵門の入り口の窪み)の著しいタイプIに入るものにNaemacheilus barhatulus, Pwngitius"^, Leuciscus cepkalMs" Gobio sohio'^'^, pfioxintis. I)hOχ細鵬 Tinea dchlasoma tinea. meeki, lasoma Cich- nierofascia恒常, Chaenocゆhalus aceratus. Nototheがα neelecta. Nototheni串nudifrons, タイプIIに入るものに Cyprinus cαゆio, carassitis, Carassiws Salmo Salvelimis salar. alpiniis,タイプ IⅡの入るものに trutta, SMlmo Salmo 血山, Sahno laciistris, A:濾胞細胞から分化して間もない卵門細胞.B:形成中の卵膜に太い細胞突起を押し込んで sairdneri. fontinaUs, egontts メダカの卵門細胞の発達と卵門のでき方を示す模式図 t7 Salmo Salvilimis 図6 h fera, Cor- Coreeonus vnacraphthalmus. Cor一 egonus wartm￡誹毀i, Esox ludus, Champsocゆhalus いる卵門細胞.C:完成に近い卵膜にみられる卵門と卵門細胞. その形態でいくつかのタイプに分けて,魚類の分類の gunnari,Notothe外辺rossiれ3ssi,そしてタイプIVに入基準にも活用され得ることを示唆している:深い卵門るものにNototheniops の窪み(卵門前庭)と短い卵門管をもつタイプI,浅 μmの卵門管(表2)は,幅0.7 larseni^*がある。直径1 4μmの球状の頭部をい卵門の窪みと卵膜の厚さに対応した卵門管をもつタもち,振幅の小さいべん毛運動で前進する精子にとっイプⅡ,卵門の窪みはなく,卵門管上部が漏斗状に広て大きからず,小さからずである(図8)。その大きさがっているタイプIll, 4 (卵門管の鋳型になる細胞突起の太さ)は単数の精子 2段の卵門の窪みをもち短い卵が進入して卵表と接するのに最も重要であるが,どの門管をもつタイプIV(図7)96.卵門前庭micropylar ように決定されるかについては不明である。以上述べてきた卵門は,1個の精子を卵と合体させるのに重要であるばかりではなく, 精子が卵内に侵入する位置を限定する上に重要な構造であり,卵核の位置する動物極に形成される。種によって異なる形態をもつ卵門がどのように形成されるかについても,まだ詳しく研究されていな図7 しl。硬骨魚の卵門の型 Riehl (1977,1980)より改図. -36- 硬骨魚類の受精(I) c。細胞膜卵表層に集積している｡卵母細胞が成熟するときには, 細胞外部と境界をなしている細胞膜は,卵母細胞で核膜及び多孔薄板は消失し,ミトコンドリアはその部は容積の増大(成長)に伴って,著しく増加する。細分から細胞質全体に分散し,小胞体も膨れて細胞質に胞膜にはリセプター,酵素やリガンドのはか,能動輸一様に分布する。この表層の変化と時を同じくして表送系の種々のチャンネルが内在し,それに内接する細層胞は,分泌が可能なように細胞膜に接する(図10)。胞質には細胞骨格タンパク質を含む様々な構造タンパ卵黄塊をもつ卵ではそれを取り囲む表層の厚さはゼク質が存在する。卵母細胞の成長時には,増加する微゛ラフィッシュでは5 20μmで,卵門直下の細胞質小突起,分泌や飲み込みの動態とともに膜内タンパク。他の部分より厚い傾向がある34･53.成長期を終えた質の変化がみられる。魚では,この変化に関する報告減数分裂直前のメダカ卵母細胞では,卵門に近い部分は多くないが,卵母細胞の成熟時における細胞膜のイに大きな卵核胞が存在する。核膜の消失によっても核オン調節に関して,海産無せきつい動物,両生類やは内にあまり細胞質成分が入り込まないため,その卵表乳類で研究されている77. 層部に表層胞や油滴のような大きい細胞質成分は存在 d.卵表層しない。卵形成中,卵母細胞の原形質膜には無数の微小突起また,サイトカラシン(10 が存在する。卵母細胞は分裂に関与する微小管成分 50μm/m1)を用いた実験的研究によって表層にマイクロフィラメント(アク (チューブリン)が卵表における微小突起の形成に使チン)が存在することを示すゼブラフィッシュでの観われている。特に,成長の著しい卵母細胞において細察121や電顕による観察(ゼブラフィッシュ121 長い糸状の微小突起が非常に発達している(図9)。成かおる。長に伴って増加したリボソーム・粗面小胞体・ミトコ蛍光色素ローダミン･フアロイデイン(RhPh)によるンドリアや成熟時に現れる多孔薄板annulate laは他の細胞成分表層胞cortical 卵黄穎粒や多小胞体multivesicular lamel- vesicles body ; サケ53) 染色での観察は,F-アクチンが細胞膜に接した薄層を (aIve011), などと共になして分布し, microplicae内に濃縮されている121。因みに,ドジョウやゼブラフィッシュの未受精卵抽出液のSDS-PAGEにみられるアクチンは43kDaの単一バンドである4o。表層胞: 排卵されたばかりの卵において,大きな表層胞は卵門に接した細胞質と大きな卵核の存在した部城には存在しない。受精時に精子の侵入点から伝播される表層胞の分泌波については後述する。ここでは,表層胞の形成過程について要約する。 Yamamoto(1961)136によれば,表層胞に関してはソールウェーの魚類学者Sarsの1876年の記載が最も古い。卵形成中の出現をFundulus卵母細胞において Guthrie(1925, 1928)'"･25が初めて観察しており,それ以降Spek(1933)108を始めとし,沢山の研究者が報告している。また,多くの海産無せきつい動物,両生類, 図8 メダカの卵門内への精子の進入図 MB:卵門前底部,MC:卵門管, 図9 ZI : 卵膜内層(卵膜構成長期におけるメダカ卵母細胞の細胞表面 bar, 10μm(岩松・鬼武,未発表) 成糖タンパク質,分子量),ZO:卵膜外層. -37- 岩松鷹司るらしいことを示している9･1o･2o･124-128。この多糖含有ほ乳類などの動物の卵にも見られるこの構造体は,魚類においてはその形態や大きさもその成分もまちまちの液胞は決まって卵黄形成の前に現れる(Gobius である(表4)が,受精時に分泌される点では共通して p昭αれellus, Smaris いる。表層胞と呼んでいる卵表層の胞状構造は,魚類 iTia A. bmeri■, ｢cedo, Crenilabrtts hゆ'setm^'';FunduliAS pavo, Ather- heteroclittes'^ ', パイクパーチ116,117 ; 大西洋ニシン128 イギョ9,10 ; ラ ; マス130 ; メダが32)。これに対して,コイやタイリクスナモグリ56,シロマス類6o,それに多くのサヶ類92では,油滴が最初に現れる。パーチ73,メダカ1やドジョウ9oの魚種では,液胞が初期には卵核胞に接しているし,コイやタイリクスナモグリ56, Crenilabr心pai;o",大西洋ニシン124,129では, 細胞質の様々のところ図10 メダカの表層胞の膜と細胞膜との接着 CA:表層胞,SB:球状成分. x4,000 に現れ,表面に移動す (岩松・太田,未発表). る。しかし, 一般に早期研究者によって大きい泡状alveolusの形 pasanellus, 態,近年になって性状とか,頼粒もしくはそれよりや加や大きいという意味でvesicles小胞と表現されていチ,ブリーム,コイ,テンチ4･5,カレイ125-127サハリる。 Ginsburg(1972)22によってまとめられているようントゲウオ135ニホンメダカ132Channa に,卵形成中の呼び名も含めてvesicles ed yolk^*, vacuolar gouttes yolk9･1o, carbohydrate Rinden yolk^^ alcedo, く初期から卵表層に存在する。 vakuolen'', 表層胞の大きさと数は卵母細胞の成長につれて増加 vacuolelike するが,魚種によって差が認められる。タイリクスナと記載されている。混乱を無くす意味で,卵黄小胞をモグリ,コイ,Smarts alveolus またはcortical vesicle に統一した方がよいと考える。少なくとも,卵黄形成に先立って出現するこの胞状構造は表層胞と同じ103,104で,卵黄成分と異なっており,卵黄小胞と呼ぶのには相応しくない。魚類における表層胞の前駆体は￡iopsetta agとClupea harengus obs- pallasiの卵母細胞で細胞学的に詳しく研究されている124-128.この研究によれば,その前駆体の形成にゴルジ体物質に対応した好銀性構造argentophil bodies の関与によるという。また,その形成に小胞体やゴルジ体がかかわっていることが多くの観察から報告されている2･1o3･119ツノガレイやニシンの若い卵母細胞において,核周縁の細胞質に小さい穎粒が現れる。この頼粒の形成にゴルジ体が関与していることが成長中のキンギョ卵母細胞で観察されている131。キンギョの卵母細胞における多糖類に富んだ液胞は中性赤で染まり, Paratの液胞と一致す - 38- bのi/eri, maruleus^'^ bodies9o,そして単にvacuoles22･35･68･74･75･1o8･116･117など表層胞cortical Atherina やベニザケ92など多くの魚類では,液胞は卵形成のご of unsaturat- claires56･", Amaris Gobius alcedo及びC粍戒臨by心p匹θ A. 硬骨魚類の受精(I) これは,卵母細胞が一定の大きさになると,液胞の数は増加しなくなり,増加する卵母細胞表面に再分布するために,表層胞の分布層の厚さが減少する結果を示している。チョウザメ卵の表層粒は,球状もしくは卵球状で, 一定の形態をしていない。チョウザメ卵ではその内部構造はそのままでは観察できないが,その直径は大きいものでは3 4μm,小さいものでは0.2 0.5μmである22.塩基性色素メチレンブルー,トルイジンブルー,ピロニン,そしてアニリンブルーやマラカイトグリーンのような酸性色素で染まる11-13。硬骨魚の表層胞も球状もしくは卵球状である。ニホンメダカでは表層胞は球状成分とコロイド状の成分から成っている(図10)42･133。 100 200 300 400 Diameter 図11 500 600 700 800μ of oocytes 色素で染まる1 ドジョウの卵母細胞成長に伴う表層胞の層の厚さ(a)と容積(b)の変化(Osanai, Fundulusの卵母細胞の表層胞成分でも中性赤,メチレンブルーや他の生体染色数個の球状成分を含んでいる25. ローチやフレームなどのコイ科魚類の表層胞は複合体 1956) をもっている5.大きさが5.4 21.2μmの表層胞にはでは急激な成長期に卵細胞質全体に広が･ぶているが, 直径3 他種のGo 種によって表層胞は特色ある構造をもっている。キン bins pasanellmとAtherinaでは表層に2 3層以上にならない56･57. Osanai(1956)'°によれば, 6.8μmの球状体が1 12個含まれている。魚ギョ卵では,表層胞はいくつか散在する球状体を含むドジョウの卵母細胞における液胞層の厚さは最初急増塊を含んでいる。コイでも表層胞は小さい成分を多くし,その後変わらないか,僅かな増加を示す(図11)。含んでいる。多くの魚種(シロザケ,ベニザケ,カレ -39- 岩松イ,ローチ,フレーム,テンチ,コイ,イワナ,メダ鷹司以上,表層胞は,その膜が受精時に細胞内膜融合にカ)では,表層胞はトルイジンブルー,チオニン,ポよって細胞膜に新しい特性をもたらすものであり,内リクロームメチレンブルーでメタクロマシアを示す。容も種々の酵素・レクチンなどの未知の機能物質を含パーチ卵では,表層胞の多糖類の大部分がヒアルロンみ,外分泌されると病的多精妨止に役立つもので,正酸であると報告されている72･73。切片をヒアルロニ常な受精・発生に備えられている1ol。ダーゼ処理をすると染色性は低下しないことから,シロザケやベニザケの酸性多糖類とは異なっているようである65･66。また,コイ科の表層胞は中性及び酸性の多糖類を含んでおり,硫酸多糖類を含んでいないらしい5。その他, PAS陽性である1･2･5･34･48･SS,66,70,105,115･119･134。 0htSuka(1958)89は,メダカ卵の表層胞成分を酸加水分解して,多糖類がマンノースやメチルペントース型の糖とともにガラクトースを含んでいることを報告している。 Inoue とIwasakiによって, 1978年38にニジマスの未受精卵から分子量200kDaのポリシアロ糖タンパク質(H-PSGP)が発見されて以来, Inoue (1986)", Selman et Inoueと Kitajima et al.(1986,1989)5o･52, d,(1986)103は,それが表層胞に由来するものであることを示し, hyosophorinと名付けた。よく研究されているその糖タンパク質45-47,49,50,79,106,107 は,θ-グリコシル結合で単一のポリペプチドと結合した5種類のオリゴシアルグリカンを含んでいる(図 12)。 13の糖タンパク質で,約25のtandem repeat から成っている37･5o。シアル酸の豊富な糖タンパク質はサケ科魚類を除いた PlacoがosMs, Cyprinus, Tribolodoが9,Parahichthys"°2及びOryzias^'において。 [Asp-Ala-Ala-Ser-Asn-Gln-Thr-va1-Ser]ｴ,の糖タンパク質で,このペプチド単位のAsnにFuc, -Man3-Ga115-GlcNAcgNeuAc6が結合した7 kDa の糖タンパク質からなっている。表層胞の他の成分にhyosophorinを分解する酵素 (プロテアーゼ51),酸性フォスファターゼ31,63やレクチンの存在が報告されている。しかし,コリンエステラーゼ63,トリメタフォスファターゼやアリルスルファターゼ31を含んでいない。淡水魚卵のレクチンの反応に関しては, d Prokop d ｢｡(1978)59,voss d (1983,1984)85･'^ Ozaki 察されている。 Nosek d ｢。(1967)'^ Krajhanzl 屁(1978)12o,Nosek d d ｢｡ α/｡(1983)91によって観｢｡(1983,1984)85･86とNosek (1984)84はレクチンが表層胞と関係があることを示している。表層胞は多糖を含んでいるから,当然レクチンがこれらの構造のグリコシル基化したものと結合反応するのに役立っていると考えられる。このほか,卵表層には他の細胞成分の存在が報告されている。コイ,キンギョの表層胞にCA穎粒(直径 0.2 2μm)が存在し61-63そしてメダカ卵にはa一類粒(0.1 0.3μ ｢37)の存在が報告されている。しかし, CA穎粒についてはその機能面の証明がなく,そして a一顧粒については電子顕微鏡での確認ができておらず,なお不明な点が残されている。 -40- 硬骨魚類の受精(I) - 41- 岩松 - 鷹 42- 司