Master de Sciences et Technologies Mention Biologie Intégrative et Physiologie Responsable : Madame Isabelle LIMON Année 2014-2015 M2 SPECIALITE PHYSIOLOGIE, METABOLISME ET PHYSIOPATHOLOGIES HUMAINES Formulaire à compléter pour accueillir dans son équipe un étudiant en M2 Equipe d’accueil du Master (Affiliation administrative – CNRS, INSERM…. Et numéro de l’unité Centre de Recherche Saint Antoine UMR_S938 INSERM UPM…... Responsable du laboratoire : Pr B Fève………………………………………….. Responsable de l’équipe d’accueil : Pr B Fève……………………………………………………………… Nom de l’encadrant : …Drs Véronique Béréziat et Claire Lagathu….. HDR oui non Adresse du laboratoire : CdR Saint Antoine UMR_S 938 Equipe B Fève Faculté de Médecine Pierre et Marie Curie Site Saint Antoine 7ème étage 27 rue Chaligny 75012 PARIS Encadrant Véronique Béréziat / Claire Lagathu Tél : 0140 01 14 84/ 01 40 01 13 21 Fax : 01 40 01 13 32 Email :…[email protected] / [email protected] Titre du sujet : Implication des protéines du VIH et des traitements antirétroviraux dans la fibrose et le vieillissement du tissu adipeux : approches in vitro et in vivo. Descriptif du sujet proposé: L’infection par le VIH est devenue une infection chronique complexe. Malgré une amélioration considérable des traitements, les patients doivent faire face à un nombre croissant de complications et en particulier des co-morbidités associées au vieillissement. Leur survenue précoce pourrait résulter d’un vieillissement accéléré induit à la fois par l’infection par le VIH mais aussi par certains traitements antirétroviraux. En effet, lors de l’infection VIH on observe une réactivation des infections virales latentes. La réplication virale, même à bas grade, entraîne la libération de protéines virales comme Tat, Nef, gp120, capables d’agir sur les cellules de proximité et de participer à l’activation immune. Sur le long terme, cet état va conduire peu à peu à un épuisement des ressources immunes avec diminution des capacités réplicatives et diminution de la réponse anti-VIH. Le système immunitaire sénescent produit plus de cytokines proinflammatoires comme l’IL-6, le TNFα ou l’IL-1β, participant à l’état inflammatoire à bas grade et au processus d’inflammaging. Chez les patients bien contrôlés, cette réplication et la libération de protéines virales délétères pourrait concerner en particulier les réservoirs macrophagiques qui sont présents dans différents tissus lésés au cours du vieillissement, dont le tissu adipeux (TA), conduisant à l’apparition de syndromes lipodystrophiques impliqués dans les atteintes cardiométaboliques de ces patients. Alors que les formes avec lipoatrophie sévère en particulier des membres ont régressé, les formes avec lipohypertrophie de la partie supérieure du corps sont fréquentes et non expliquées. Des données récentes obtenues au laboratoire montrent des altérations de la matrice extracellulaire du TA chez ces patients, associées à un profil inflammatoire avec un rôle différentiel de l’infection par le VIH et le traitement antirétroviral dans ces atteintes (données non publiées). Par ailleurs, nous avons montré au laboratoire que les protéines du VIH Tat et Nef induisaient une sénescence de cellules souches mésenchymateuses, par l’activation de la voie NFkB ou l’inhibition de Secrétariat du Master Mention Biologie Intégrative et Physiologie 9, Quai Saint Bernard - Bâtiment B, 3ème étage, porte 314 Case courrier 118 – 75252 Paris cedex 05 Tel : 01.44.27.23.88 - Fax : 01.44.27.23 82 Master de Sciences et Technologies Mention Biologie Intégrative et Physiologie Responsable : Madame Isabelle LIMON l’autophagie (Manuscrit soumis). Par ailleurs, la protéine Tat pourrait participer à l’activation de la voie profibrosante du TGFbeta. Ces différents mécanismes pourraient contribuer aux défaut de répartition du TA et aux remaniements de la matrice extracellulaire (MEC) observés ces patients. Dans ce projet, nous souhaitons donc explorer l’implication respective du VIH et/ou des antitrétroviraux dans les atteintes du TA. Une attention particulière sera portée sur les acteurs moléculaires impliqués dans l’hypertrophie/hyperplasie adipocytaire et les interrelations vieillissement/fibrose/inflammation. Etude In Vitro : Des études in vitro nous permettront de compléter et confirmer le rôle des différents acteurs de la fibrose, de la sénescence, et de leurs conséquences métaboliques et cardiovasculaires. Des cultures de préadipocytes humains en culture primaire ou des cellules souches du tissu adipeux (cellules hMADS) seront incubées en présence des molécules antirétrovirales et/ou des protéines virales du VIH afin d’évaluer leur impact sur la MEC, la prolifération et la sénescence des précurseurs adipocytaires et sur l’adipogénèse. La fibrose faisant intervenir plusieurs type cellulaire (préadipocytes, adipocytes, cellules endothéliale, macrophages, fibroblastes…), des co-cultures seront réalisées, associées à une culture 3D des adipocytes (Collaboration Danièle Lacasa) afin d’étudier les modifications des éléments de la matrice extracellulaire. Etude Ex Vivo : Parallelement, nous disposons de TA visceral et sous-cutané de patients infectés par le VIH et sous traitement antirétroviral. Nous analyserons par immunohistochimie et q-PCR les marqueurs de la MEC, de la sénescence et de l’inflammation afin d’évaluer la fibrose. Nous aurons alors une idée de 1) l’impact des antirétroviraux et du VIH sur la mise en place de la fibrose et de la sénescence 2) les différences entre les différents dépôts afin d’envisager des pistes de recherche sur la lipohypertrophie. Donnez 3 publications de l’équipe d’accueil des 4 dernières années. - Hernandez-Vallejo SJ, Beaupere C, Larghero J, Capeau J, Lagathu C. HIV protease inhibitors induce senescence and alter osteoblastic potential of human bone marrow mesenchymal stem cells: beneficial effect of pravastatin. Aging Cell. 2013, 12:955-965. - Béréziat V, Cervera P, Le Dour C, Verpont MC, Dumont S, Vantyghem MC, Capeau J, Vigouroux C. LMNA mutations induce a non-inflammatory fibrosis and a brown fat-like dystrophy of enlarged cervical adipose tissue. Am J Pathol. 2011, 179:2443-2453. - Gandotra S, Le Dour C, Bottomley W, Cervera P, Giral P, Reznik Y, Charpentier G, Auclair M, Delépine M, Barroso I, Semple RK, Lathrop M, Lascols O, Capeau J, O'Rahilly S, Magré J, Savage DB, Vigouroux C. Perilipin deficiency and autosomal dominant partial lipodystrophy. N Engl J Med. 2011, 364:740-748. A REMPLIR OBLIGATOIREMENT Etudiant(s) encadré(s) dans l’équipe d’accueil pour l’année 2012 – 2013 M1 M2 Université d’origine de ou (des) l’étudiant(s) Précisez si l’étudiant(e) fera une thèse Autres non P6 oui Thésard Secrétariat du Master Mention Biologie Intégrative et Physiologie 9, Quai Saint Bernard - Bâtiment B, 3ème étage, porte 314 Case courrier 118 – 75252 Paris cedex 05 Tel : 01.44.27.23.88 - Fax : 01.44.27.23 82