イチゴ炭疽病のヘソディム左：本圃の発病下：育苗圃の発病三重県農業研究所〒515-2316 三重県松阪市嬉野川北町530 TEL : 0598-42-6357 ―　155　― 対象診断手順 1 イチゴ炭疽病についてイチゴ炭疽病とは調査方法評価方法現在、病原菌の再分類が行われていますが、糸状菌の一種である Glomerella cingulata種複合体および Colletotrichum acutatum種複合体により引き起こされる病害です。炭疽病菌の分生子診断票病徴は、局部病斑と全身症状の萎凋に大別され、前者は、葉、ランナーなど地上部の各部位を侵し、ランナーや葉柄では、黒色、紡錘形の浅く陥没した病斑を生じます。後者は、はじめ、葉の１～２枚が垂れ、その後枯死します（写真参照）。クラウン部の切断面が赤褐色に変色しているのが特徴です。対策技術第一次伝染源は潜在感染株と罹病残渣を含む土壌と考えられ、多湿条件で病斑上に多量の分生子を形成し、雨水によって分生子が飛散し二次伝染します。そのため、育苗期に甚発生した場合、炭疽病により苗が全滅することもあります。留意点特に三重県の主要品種である「章姫」は炭疽病に罹病性であることから、防除対策として育苗期の雨よけ栽培や定期的な農薬散布が行われています。しかし、定植後に急激な萎凋症状を示す場合もあり、対策に苦慮しています。その他出典：日本植物病害大事典 ―　156　― 対策技術留意点対策技術の選定対策技術の選定診断票品種の病害抵抗性品種の病害抵抗性前作発病程度前作発病程度土壌中の病原菌密度土壌中の病原菌密度評価方法本圃の調査本圃の調査調査方法対策技術の選定対策技術の選定診断手順品種の病害抵抗性品種の病害抵抗性親株更新の有無親株更新の有無前作発病程度前作発病程度象育苗圃の調査育苗圃の調査 2 対診断の手順診断の手順その他 ―　157　― 対象診断手順 2 調査方法イチゴ栽培においては、育苗期間中に潜在感染した苗の本圃への持ち込みによる発病が見られます。そのため、「育苗圃」の調査と「本圃」の調査が必要です。表．育苗圃発病と本圃発病の相関係数（単回帰分析）調査年度 2カ年 2014年 2015年平均 0.79 0.31 0.55 調査圃場数：21圃場（2014年） 11圃場（2015年）評価方法診断票【品種の病害抵抗性】品種により炭疽病抵抗性程度の強弱が異なります。発栽培予定品種の病害抵抗性病度を把握することが重要です。右図は、三重県の主要2品種で調査しました。 100 90 80 70 かおり野 60 章姫 50 40 30 20 10 0 0 10個/mL 100個/mL 1000個/mL 10000個/mL 土壌中の炭疽病菌密度図．土壌中の炭疽病菌密度と発病の関係対策技術【親株更新の有無・前作発病程度】第一次伝染源は潜在感染株が考えられます。親株の更新が行われていない場合、前作の発病程度により、潜在感染している可能性が考えられます。留意点その他【土壌中の病原菌密度】試験的に作成した炭疽病菌汚染土壌において、PCR法での病原菌検出限界は、104cfu/mLでした。「章姫」は、炭疽病菌密度 10cfu/mLで発病したことを考慮すると、病原菌が検出されなくても、前作発病程度を参考に診断を行うことが必要です。 ―　158　― 調査方法炭疽病菌密度10 炭疽病菌密度104個/mLの土壌に個/mLの土壌に「かおり野」(左)と「章姫」(右)を「かおり野」(左)と「章姫」(右)を定植しました。定植しました。 9月16日 9月16日 (定植） (定植） 4 1.65×10 1.65×10 4 11月17日 11月17日 1月5日 1月5日 2月16日 2月16日 3 1.3×10 1.3×10 3 ++ ++ 0 0 -- 2 4.3×10 4.3×10 2 -- 0 0 - 1) PCR法 PCR法1) １）PCRは3回行い、「++」は2回検出、「-」は非検出１）PCRは3回行い、「++」は2回検出、「-」は非検出留意点平板希釈cfu/mL 平板希釈cfu/mL 10月16日 10月16日対策技術表．発病調査期間中の土壌中の炭疽病菌推移（2014年）表．発病調査期間中の土壌中の炭疽病菌推移（2014年）診断票圃場内の土壌を採取し、選択培地を用いた平板希釈法やPCR 圃場内の土壌を採取し、選択培地を用いた平板希釈法やPCR 法で調査します。法で調査します。試験的に発病させた土壌を１年間保存し、「章姫」を定植しま試験的に発病させた土壌を１年間保存し、「章姫」を定植しましたが、発病しませんでした。同様に萎黄病の試験で「かおりしたが、発病しませんでした。同様に萎黄病の試験で「かおり野」は、発病したことから、炭疽病菌は土壌での生存性が、萎野」は、発病したことから、炭疽病菌は土壌での生存性が、萎黄病菌に比べ劣ると考えられます。黄病菌に比べ劣ると考えられます。評価方法図．炭疽病発病の品種間差図．炭疽病発病の品種間差 4 土壌中の病原菌密度土壌中の病原菌密度診断手順試験的に作成した炭疽病菌汚試験的に作成した炭疽病菌汚染土壌において、「かおり染土壌において、「かおり 3 野」は菌密度10 cfu/mLで野」は菌密度103cfu/mLで発病し、「章姫」は発病し、「章姫」は 10cfu/mLで発病しました。 10cfu/mLで発病しました。象品種の病害抵抗性品種の病害抵抗性対 3 診断方法診断方法その他 ―　159　― 対象診断手順 3 【品種の病害抵抗性】調査方法栽培予定品種の病害抵抗性を把握する際に、利用できます。 ①炭疽病菌をPS培地にて25℃、137rpm、7日間振とう培養します。 ②園芸培土と山砂を１：１の体積比で混合した土壌に、土壌体積あたり、101～104cfu/mLになるように炭疽病菌を混和接種します。 ③調査したい品種を定植し、発病の有無により炭疽病に対する感受性を確認できます。評価方法【検定用の土壌採取】圃場の４隅と中心部の計５点以上から採取します。採取は、表層の土を１㎝程度取り払い、深さ10㎝程度の土壌を100g程度採取します。５点の土壌をまとめてビニル袋に入れ、2㎜の篩で篩掛けし、よく混ぜます。診断票【PCR法による病原菌検出】対策技術 ①50mLの遠沈管に供試土壌10mLを入れ、 Mathur培地を2mL添加し、28℃で7日間静置培養します。 ②改変塩化ベンジル法（Kageyama、2003）を用いてDNAを抽出後、 MagExtractor-plant genome kitにより、DNAを精製します。 ③鈴木ら（2008）のPCR条件を参考にし、PCRを行います。その後、1.5％アガロースでPCR産物の電気泳動（135V、20分）を行い、バンド（683bp）の有無で判断します。【選択培地を用いた病原菌検出】留意点 ①供試土壌10gと生理食塩水90mLを30分間、強振し10-1希釈液とします。 ②適宜10-2、10-3・・・希釈液を作成します。 ③これらの希釈液を100μLずつ、 Mathur培地に塗抹し25℃で２日間培養し、生育の有無を確認します。その他 ―　160　― 低高レベル1 レベル3 かおり野章姫他品種（病害抵抗性不明）（罹病性品種）親株の更新有前作発病程度総合評価無一部発病発病ポテンシャル１診断項目の合計レベルが３ポテンシャル３診断項目の合計レベルが５～６本圃の調査高レベル1 品種レベル2 レベル3 かおり野章姫他品種（病害抵抗性不明）前作発病程度無発病（罹病性品種）一部発病総合評価ポテンシャル１診断項目の合計レベルが３ポテンシャル２診断項目の合計レベルが４～５ポテンシャル３診断項目の合計レベルが６ ―　161　― その他 ※育苗期に発病が見られる場合、総合評価に関わらず本圃での発病の危険性があります。検出留意点土壌中からの病原菌検出非検出 ※前作が無発病の場合：レベル１前作発病したが、土壌中から病原菌が検出されなかった場合：レベル２前作が発病したが、土壌中から病原菌が検出された場合：レベル３発病対策技術診断項目発病危険度（発病ポテンシャル）低診断票ポテンシャル２診断項目の合計レベルが４評価方法無発病（親株の更新が無い場合） ※親株の更新がある場合：レベル１更新が無いが前作無発病の場合：レベル１更新が無いが前作発病の場合：レベル３一部更新調査方法品種レベル2 診断手順診断項目発病危険度（発病ポテンシャル）象育苗圃の調査対 4 評価方法対象診断手順 4 調査方法「２診断手順」に示したように、イチゴ栽培においては、育苗期間中に潜在感染した苗の本圃への持ち込みによる発病が見られます。そのため、育苗期に発病が見られる場合、総合評価に関わらず本圃での発病の危険性が高まります。発病ポテンシャルの考え方評価方法診断項目「品種」では、「かおり野」は抵抗性品種ですが、気象条件等により発病する品種であるため「レベル２」にしています。品種の病害抵抗性を調査するためには、「３調査方法」を参考にしてください。また、土壌中からの菌密度検出も、「３調査方法」を参考にしてください。診断票総合評価の考え方例（育苗圃）発病危険度（発病ポテンシャル）低対策技術診断項目高レベル1 レベル2 品種かおり野他品種他（病害抵抗性不明）親株の更新前作発病程度留意点（親株の更新が無い場合）レベル3 章姫（罹病性品種）有一部更新無無発病一部発病発病その他上記の場合、「品種」では「レベル２」、親株の更新は無いため「前作発病程度」で判断し「レベル１」のため、合計レベルは「レベル２」＋「レベル１」より「レベル３」と判断し、総合評価は「ポテンシャル１」になります。 ―　162　― 調査圃場親株定植予定日本圃定植予定日栽培作物・品種品種の病害抵抗性育苗方法育苗培土の種類親株の由来診断票土壌消毒剤の履歴農薬散布の履歴前作の発病状況評価方法生産者調査方法土壌採取日診断手順調査日象診断票 5 対診断票施肥量対策技術（炭疽病、萎黄病、他）コメント他留意点前作の発病状況を問診する際は、栽培品種や土壌消毒の種類も同時に聞き取ることが重要です。その他 ―　163　― 対象診断手順 5 調査方法イチゴ栽培生産者への問診を行う際に利用します。診断および対策を行うにあたって、栽培管理、農薬の散布履歴を知ることが大切です。診断票は炭疽病を対象にするだけでなく、萎黄病や他病害の診断や対策に役立てるため、炭疽病に対する診断項目以外の項目も設けています。評価方法また、健全なイチゴを栽培するためにはイチゴ栽培に適した施肥管理が重要となります。土壌分析を行うことで下記のような診断票が栽培の参考にできます。三重県では、「三重県土壌診断・堆肥流通支援システム」（http://www.taihi.pref.mie.lg.jp/U620000.aspx）によって、施肥計画の確認ができます。診断票例対策技術留意点その他 ―　164　― 本圃の対策本圃の対策初発後の農薬散布初発後の農薬散布本圃定植前、３日間程度の葉かきを避ける本圃定植前、３日間程度の葉かきを避けるポテンシャル３本圃定植前、３日間程度の葉かきを避けるポテンシャル３本圃定植前、３日間程度の葉かきを避ける定期的な地上部の農薬散布定期的な地上部の農薬散布留意点ポテンシャル１ポテンシャル１ポテンシャル２ポテンシャル２対策技術育苗期に発病が見られた場合は、本圃への感染苗の持ち込育苗期に発病が見られた場合は、本圃への感染苗の持ち込みが考えられます。地上部の農薬散布を検討してください。みが考えられます。地上部の農薬散布を検討してください。診断票本圃の土壌消毒に関しては、炭疽病だけでなく萎黄病の発本圃の土壌消毒に関しては、炭疽病だけでなく萎黄病の発病ポテンシャルを参考にする必要があるため、土壌消毒等の病ポテンシャルを参考にする必要があるため、土壌消毒等の対策技術については、萎黄病を参照してください。対策技術については、萎黄病を参照してください。評価方法雨よけ栽培の実施、10～14日間隔の農薬散布雨よけ栽培の実施、10～14日間隔の農薬散布雨よけ栽培の実施、7日間隔の農薬散布雨よけ栽培の実施、7日間隔の農薬散布雨よけ栽培の実施、7日間隔の農薬散布雨よけ栽培の実施、7日間隔の農薬散布育苗圃や子株用培土の土壌消毒または購入培土の利用育苗圃や子株用培土の土壌消毒または購入培土の利用調査方法ポテンシャル１ポテンシャル１ポテンシャル２ポテンシャル２ポテンシャル３ポテンシャル３診断手順育苗圃の対策育苗圃の対策象 6 対対策技術対策技術その他 ―　165　― 対象診断手順 6 農薬散布調査方法イチゴ炭疽病は、発病した株上に多量の分生子を形成し、雨水によって分生子が飛散し二次伝染します。そのため、土壌消毒だけでなく、地上部の防除も必要となります。 2010年～12年にかけて、炭疽病に対する農薬の防除効果を確認しました（田口ら，2012）。 100 100 80 80 枯死 60 株率 40 ％ 20 70 60 防除価 50 （）評価方法 90 40 30 20 0 診断票 10 8/28 0 マンゼブ水和剤プロピネブ水和剤 2010年キャプタン水和剤 2011年 9/4 7日間隔有機銅水和剤 2012年 9/11 9/18 10日間隔 9/25 10/2 14日間隔 10/9 無散布図．散布間隔別の枯死株数の推移図．殺菌剤の防除効果（防除価）調査年度：2012年品種：章姫散布体系：マンゼブ剤、プロピネブ剤、キャプタン剤のローテーション散布病原菌接種：炭疽病菌胞子懸濁液を 7日間隔で、噴霧接種しました調査年度：2010～12年品種：章姫無処理の発病度（調査年度）：59（2010年）、58（20１１年）、48（2012年）対策技術定植直前の葉かき処理土壌中に炭疽病菌が存在した場合、定植３日前までの葉かき処理はイチゴ炭疽病の発病を助長することを確認しました。そのため、発病ポテンシャルが高い圃場にイチゴを定植する際は、葉かき処理を行わずに定植することが望まれます。留意点 60 100 90 50 80 70 40 60 発病 50 度 40 発病度 30 その他 20 30 20 10 10 0 0 10/8 10/15 10/22 対照 10/29 葉かき 11/5 11/12 根傷み 11/19 11/26 12/3 12/10 12/17 葉かきおよび根傷み図．定植直前の葉かきや根傷みがイチゴ炭疽病の発病におよぼす影響 ―　166　― 10/2 10/9 定植1週間前 10/16 10/23 定植3日前 10/30 11/6 定植直前 11/13 11/20 無接種図．葉かき処理の定植前日数がイチゴ炭疽病におよぼす影響留意点三重県で主に栽培されている品種である「かおり野」と「章姫」について、調査を行いました。これらの品種は、炭疽病と萎姫」について、調査を行いました。これらの品種は、炭疽病と萎黄病についての病害抵抗性に特徴があり、診断や対策を行うにあ黄病についての病害抵抗性に特徴があり、診断や対策を行うにあたって、重要な項目となりました。たって、重要な項目となりました。全国的にも、両病害に対して抵抗性を示す品種は限られており、全国的にも、両病害に対して抵抗性を示す品種は限られており、品種ごとに問題化する病害を対象として診断する必要があります。品種ごとに問題化する病害を対象として診断する必要があります。対策技術３）品種３）品種三重県で主に栽培されている品種である「かおり野」と「章診断票イチゴ炭疽病については、現在、病原菌の再分類が行われてい Glomerella ます。今回、調査および試験の対象にした菌株は Glomerella ます。今回、調査および試験の対象にした菌株は cingulata種複合体です。三重県では、 Colletotrichum Colletotrichum cingulata 種複合体による被害は報告されていませんが、こちら acutatum種複合体です。三重県では、種複合体による被害は報告されていませんが、こちら acutatum の原因菌については総合評価を再検討する必要があります。の原因菌については総合評価を再検討する必要があります。評価方法２）炭疽病菌について２）炭疽病菌についてイチゴ炭疽病については、現在、病原菌の再分類が行われてい調査方法マニュアルに記載した内容は、2013年～2015年に三重県内で調査した内容をもとに作成しています。で調査した内容をもとに作成しています。栽培地域により、品種や栽培方法が異なります。そのため、診栽培地域により、品種や栽培方法が異なります。そのため、診断を行うにあたっては、地域の実情に応じて調整する必要があり断を行うにあたっては、地域の実情に応じて調整する必要があります。ます。診断手順１）マニュアル内容１）マニュアル内容マニュアルに記載した内容は、2013年～2015年に三重県内象 7 対留意点留意点その他 ―　167　― 対象診断手順 7 調査方法４）親株の潜在感染三重県では、親株の更新割合は低く、前年に育苗した苗を各生産者の圃場で保管し、春先に親株として定植しています。そのため、前作で発病が見られた圃場では、親株の中に潜在感染した苗が含まれ、伝染源となることがあります。評価方法５）前作発病程度診断票毎年の炭疽病の発病程度を知ることは、圃場での炭疽病発病のしやすさを測るうえで大切な情報になります。どの程度、いつ頃から発生したか、記録をつけるようにしてください。特に、炭疽病菌は土壌からの検出感度が低い病原菌です。そのため、前作発病程度を参考に診断を行うことが必要です。対策技術６）土壌中の病原菌密度留意点調査した圃場では、ほとんど検出されませんでした。また、発病苗の根系土壌からも一部で検出された程度です。そのため、検出された場合は、発病の危険性が高いと考えられます。今回は、イチゴ炭疽病・萎黄病・疫病感染苗検査マニュアル（千葉県他 2012）を参考にしています。７）育苗期の発病その他育苗期の感染が原因と思われる発病を本圃で確認しています。健全な苗を作るためには、土壌病害の観点だけでなく地上部病害の防除が必要となります。 ―　168　― 診断手順調査方法評価方法診断票対策技術留意点【参考文献】平山喜彦・鈴木【参考文献】健・伊東靖之・岡山健夫・西崎仁博・松谷幸子（2008）．病原菌特異的プライマーを用いたPCR による潜在感染株からのイチゴ炭疽平山喜彦・鈴木健・伊東靖之・岡山健夫・西崎仁博・松谷幸子（2008）．病菌の検出.日植病報 74:198 ．（講要）病原菌特異的プライマーを用いたPCR による潜在感染株からのイチゴ炭疽病菌の検出.日植病報 74:198 ．（講要）イチゴ炭疽病・萎黄病・疫病感染苗検査マニュアル（「イチゴ健全種苗生産のための病害検査プログラムの構築」研究プロジェクトチーム）．イチゴ炭疽病・萎黄病・疫病感染苗検査マニュアル（「イチゴ健全種苗生産のための病害検査プログラムの構築」研究プロジェクトチーム）． Kageyama, K., Komatsu,T., Suga, H.(2003). Refined PCR protocol for detection plant pathogens in soil. J. Gen. PlantPCR Pathol. Kageyama, K.,of Komatsu,T., Suga, H.(2003). Refined protocol 69:153-160. for detection of plant pathogens in soil. J. Gen. Plant Pathol. 69:153-160. 日本植物病害大事典（岸國平編集）．全国農村教育協会，東京，p493 日本植物病害大事典（岸國平編集）．全国農村教育協会，東京，p493 鈴木健・田中千華・伊東靖之・植松清次・平山喜彦・岡山健夫 (2008) ．イチゴ炭疽病菌に対する特異的プライマーの作成．日植病報 74:198. （講鈴木健・田中千華・伊東靖之・植松清次・平山喜彦・岡山健夫 (2008) ．要）イチゴ炭疽病菌に対する特異的プライマーの作成．日植病報 74:198. （講要）田口裕美・鈴木啓史・黒田克利（２０１２）．イチゴ炭疽病に対する各種殺菌剤の残効期間と防除体系．関西病虫研報 54：53-59 田口裕美・鈴木啓史・黒田克利（２０１２）．イチゴ炭疽病に対する各種殺菌剤の残効期間と防除体系．関西病虫研報 54：53-59 辻朋子・黒田克利・鈴木啓史・對馬誠也・吉田重信（2014）．イチゴ炭疽病菌および萎黄病菌の土壌菌密度と発病の関係．日植病報 81:86 辻朋子・黒田克利・鈴木啓史・對馬誠也・吉田重信（2014）．イチゴ（講要）炭疽病菌および萎黄病菌の土壌菌密度と発病の関係．日植病報 81:86 （講要）辻朋子・黒田克利・鈴木啓史・對馬誠也・吉田重信（201５）．定植時の葉かきと根傷みがイチゴ炭疽病の発病に及ぼす影響．日植病報辻朋子・黒田克利・鈴木啓史・對馬誠也・吉田重信（201５）．81:229 定植時（講要）の葉かきと根傷みがイチゴ炭疽病の発病に及ぼす影響．日植病報 81:229 （講要）象 8 対その他その他その他 ―　169　―