社内資料ナブトピン注生物学的同等性試験抗アレルギー作用製造販売元東菱薬品工業株式会社販株式会社ビオメディクス売試験実施施設元東菱薬品工業株式会社青梅研究所試験期間：2012年3月12日～5月21日東菱薬品工業株式会社ナブトピン注3.6 単位の生物学的同等性試験を薬力学的試験により実施した。アレルギー作用の指標として標準製剤(3mL中ワクシニアウイルス接種家兎炎症皮膚抽出液を3.6単位含有)を対照薬として、PCA反応、抗補体活性化作用について試験を実施した。 ●PCA反応＜試験方法＞ ① ラット背部の2か所に生理食塩液で20倍に希釈した抗DNP-Aｓ・IgE抗血清を0.1mL皮内投与した。 ② 誘発投与30分前：検体（対照は生理食塩液）を腹腔、あるいは皮下投与 ③ 48時間後誘発投与：1.7mgのDNP-As含有0.25％エバンスブルー生理食塩液1mLを尾静脈注射 ④ 誘発投与30分後：ラットを放血により死亡させ、エバンブルー漏出部の皮を剥離し1mLの1mol/L KOHを加え、37℃、24時間保温により溶解する。 ⑤ 9mLアセトン、0.6mol/L H3PO4（13：5）を加え、遠心し上清を波長620nmにおける吸光度測定試験動物：約体重200～220gのWistar系雄性ラット＜試験結果＞皮下投与 PCA反応におけるエバンスブルー漏出量（色素濃度：μg/site）例数：10 対照群平均値±SD 17.2±1.1 37.5単位/kg群 75単位/kg群試験製剤標準製剤試験製剤標準製剤 14.9±1.3 14.3±1.9 12.1±1.4 12.3±0.9 対照との比較：P＜0.01（Dunnettの検定）腹腔内投与 PCA反応におけるエバンスブルー漏出量（色素濃度：μg/site）例数：10 対照群平均値±SD 18.7±0.8 37.5単位/kg群 75単位/kg群試験製剤標準製剤試験製剤標準製剤 15.7±1.2 15.6±0.9 13.2±0.7 13.7±1.0 皮下投与、腹腔内投与において平均体重群間でのバラツキはみられなかった。 PCA反応におけるエバンスブルー漏出量について対照群と試験群はWelch検定において、90％信頼区間は皮下投与では37.5単位投与群間はlog0.96～log1.14、75単位投与群間はlog0.89～log1.03、腹腔内投与では37.5単位投与群間はlog0.95～log1.06、75単位投与群はlog0.92～log1.01いずれにおいても生物学的に同等であることが確認された。 ●抗補体活性化作用（めん羊赤血球溶血作用）＜試験方法＞補体活性として50％溶血（CH50）1単位を示すモルモット血清に検体（試験製剤、標準製剤）0.6及び1.2単位/mLを各1mL、対照は生理食塩液1mLを加えた。20℃で30分間培養し、溶血素で感作した１mLのめん羊赤血球２×108/mLに添加し培養後遠心分離した上清を波長541nmにおける吸光度測定した。試験動物：体重約250～300gのHartley系雄性モルモット（馴化飼育7日以上）＜試験結果＞抗アレルギー作用（抗補体作用：めん羊血球溶血作用）対照群平均値±SD 0.6単位/mL群例数：10 1.2単位/mL群試験製剤標準製剤試験製剤標準製剤 0.2045 0.2378 0.2391 0.2661 0.2657 ±0.0139 ±0.0079 ±0.0090 ±0.0176 ±0.0088 対照群と試験群はWelch検定において、90％信頼区間は0.6単位投与群ではlog0.82～log1.15、 1.2単位添加群ではlog0.84～log1.13でいずれにおいても生物学的に同等であることが確認された。