日本獣医解剖学会 A−05 A−06 八シブトガラスとフクロウにおける後肢のmック機構のネコの膝関節筋に関する形態学的研究比較 ○武藤顕一郎、大野秀樹、善岡一機、大脇将夫、谷口和蘂、 ○辻知香｝、本進栄一1、杉曲昭栄2、木曾康郎1 独口大・農学部・獣医解剖、2宇都筥大・農学部 Sotthlbandhu Pongsiw∂ 、鶴類の多くは、物を掴む際に欄んだ状態を維持するロック機構を持つ。ロック機構は後肢の趾の屈筋腱とその周囲組織から構成され、構成要素は、屈筋腱表縢の結節、腱鞘内壁ヒダ、屈筋腱に付属した弾牲線維靭帯および鞍1鞘のパッドの4つとされる。屈曲時、燃筋鍵．の結籔に腱鞘内壁ヒダが入り込む咬み禽い構造を形成し、屈筋腱が近位方肉へ引っ張られる力に対しての摩擁、力を生み出す。その結果、この機構は筋にかかる負担を小さくする。今圏、三薦肢足であるハシブトガラスと第4趾が町動し蕪富む肢側から対肢足に変位するフクロウを用い、ロック機構の差異を比較検討した。肉眼解剖では、両者ともロック機構を構成する4つの要素が、全ての蹴で鍛遠位の趾骨間関節から認められた。屈筋腱の結節および腱鞘内壁ヒダの分布については、フクロウは一趾骨分の範囲に収まるのに対して、ハシブトガラスは蹉全体の慢さの半分、あるいはほぼ金域を粛める広い範囲で観察された。腱鯖内壁ヒダについては、ハシブトガラスの方が長く明瞭であった。次に各趾の横断組織切片を作成し、組織を染め分けることで構成要素の位置関係を観察したところ、ハシブトガラスでは、屈筋腱の結節および弾性線維靭樽がより発達していた。また岡者ともに撫管が趾骨と屈筋鍵を取り囲むように発達していた．神経は、趾骨と鵬筋腱の境雰にある皮下組織に左右対称に位畷していた。以．ヒ爾潜の比較の結果より、ロック機構構成要素は、ハシブトガラスの方が発達していることが分かった．これよりハシブトガラスの方が、愚曲時により強いロック機構が作用していることが示唆された。今後は、澗潔のロック機構の神経支灘を検討する予定である。 A−07 間葉系幹細胞から骨へ分化する過程でのデ鶯リンの関与と役割 O保坂善真1、小海康夫3、竹花一成2、今川智敬1、上原正入l l鳥取大・農・獣医解剖、2酪農大・獣鷹・獣医解剖、 3札幌医大・医・分子機能解析北蟄大・獣曙解剖【際的】我々はこれまで、イヌの関節筋の形態について報告してきた。膝関鄭筋は、ウマ、反甥類、イヌに見られる大腿骨曹藤から膝関節包にかけて存在する小筋であるが、ネコに閲する報籍は少ないようである。この研究はネコの膝関節筋について肉眼的、組織学および楚登型電予顕微鏡（SEM）的など形態学蘭に研究したものである。【材料と方法】供試ネコは当硯究盛に10％ホルマリン液に闘定、保存されていた幼猫から老猫の12 頭で、肉眼解剖学的に各検体の大腿部特に大腿四頭筋を涯童深く剰がし、膝関節筋の観察を行った。紐織学的には定法に従ってパラフィン包埋し、薄切切片はヘマトキシリン、エオシン重染色などを施し，必要に応じて薄切後のパラフィン包埋標本を脱樹脂し、SEM標本として、光学顕微鏡像とSEM像の隅視野比較を行った。｛所晃と寿察】ネコの膝関節筋は小ベルト状の薄い筋で、中聞広筋の深禰で大腿骨背側の遠位約1／3から起始し、内側および外側に2分し逆V掌型を呈して、膝関節包の内側および外倒に終止していた。膝関節筋は加齢に俸い筋質が減少し、脂紡化する傾肉がみられた。膝関節筋に入る神経は大腿神経で、中間広筋への分枝から、膝関節筋の起始部で分かれ、さらに2分、内側、外側のそれぞれの筋に分布していた。組織学的に幼猫において膝関節筋は充実した筋維織が観察されたが、老齢猫では肉眼所見と一・致した脂肪化像が認められた。この筋の特徴として筋紡錘が腐頻度で観禦され、核鎖錘内筋細胞、核嚢錘内筋細胞も認められた。また筋実質の無い部位にはr筋外筋紡錘」も認められた。SEMに筋紡錘の錘内筋細胞に終わる神経、およびその神経線維が紡錘内に入る孔も観察された。 A−08 マウス骨格筋発生に関与するカスパーゼファミリーの活性化 ○池閉哲平1、俊々木蜜哉2、橋本善春孝、毘泰寛1 1北大・獣医・解剖、2北大・獣医・爽験動物幹細胞株KUSA−A1細胞に、デコリン発現を阻轡するsiRNAを【背景と目的】カスパーゼ（Casp）ファミリーはアポ1・一シスシグナル伝達経路を制御しているシステインブロテアーゼの一稗である。Caspカスケード濡性化によるアポトーシスは全身臓滞のリモデリングに関わる。近年、マウス胎予骨格筋組織において広箱囲のCaspカスケード漉惟化が報省され、その役割が濫目されている。本研究では、マウス胎子期におけるCaspファミリーの隣閥的変化を検索し、骨格筋の発盤とCaspファミリーとトランスフェクションした細胞（siDT）を作成した。siDTを骨分化誘導条件下で培養し、増殖、分化および石灰化の段階での C57BL／6マウス胎子より光顕試料、新鮮凍結組織およびtotal 細胞応答を解析した。 1結果と考察ユs沿丁の増殖性はコントロー RNAを採取し、各胎齢におけるCaspファミリーの発現を組織ルであるKUSA−A1よりも顕著に促進していた。KUSA−A1を学的および分子盆物学的乎法で解析した。 1結果と考劉Casp3、【背景1これまで我々は、ある程度分化の進行した細胞（線維芽細胞や筋芽細胞）でのデコリンの機能を明らかにしてきた。本研究ではこれら細胞の共髄の幹細胞である問葉系幹細胞の骨への分化成熟過程でのデコリンの閾与とその役割を開らかにすることを騒的とする。【材料と方法1マウス骨髄由来の間葉系骨分化誘導すると、種々の轡勢細胞分化マーカー（アルカリフォスアターゼ；ALPやRunx2）を発現し、分化誘導28E1照には細胞周囲に骨マトリックスを認め、von Kossa染色およびアリザリンレッドS染魚に強い陽性反応を確認した。一方siDTでの ALPおよびRUnx2の発現は弱く、骨マトリックスはほとんど検出されなかった。その一方で、オイルレッド0に陽性を示す脂肪細胞が多数撮現した。また、脂肪細胞特異マーカー一である PPARγのmRNA発現量はsiDTで有意に窩かった。slDTの骨分化培養液中にデコリンを添加して培養を行い、ALP活性の回復を試みたが、デコリン添加量に関係なくsi王）TのALP漸性は弱いままであり、培養を継続しても骨マトリックスの形成を認めなかった。以上のことより、デコリンはALPの発現調節を遺伝子レベルで行い、闇葉系幹細胞の骨芽細胞への分化誘導を制御していること、そして、デコリンが闘葉系幹細胞に曲来する骨穿細胞と脂肪細胞における細胞系譜の決定機構に璽要な役割を擦っている可能性が蕎いと考えられた。 F 公衛生の闘連性を検証した。 1柑料と方法】胎齢（E）／L5∼工7，5臓の Casp9およびCasp12に対する免疫染色により筋穿細胞が陽惟反応を示し、陽性反慮は筋管細胞へと分化するにつれて胎齢と共に増強した。一方、アポトーシスマーカーであるss工）NAに対する免疫染色では、筋穿細胞はほとんど陽性反応を示さなかった。また、各Caspの遺伝子発競は骨格筋組織においてLaser microdissection／RT−PCR法で確認された．さらに舌組織の各 Casp遣伝子発現をRT−PCR法で、頚部組織のmRNAシグナルを in situ hybridizatioa法で定蹴化したところ、いずれもE15．5で簸も鶴値を示した。同様の傾肉は筋分化特異的遺伝子である Myo−Dと一致したが、アポトーシスシグナル伝達経跳中の遺伝子であるFasL、Bax、Rock1とは一致しなかった。上述の所見は、Caspファミリーがアポトー一シスに颪接関与するのではなく、筋穿細胞の分化に深く関与している可能性を示す。生理