LC/MS Application News No.58 リン脂質の分析 リン脂質は生体内に多く存在する物 質群で生体機能に対して重要な役割 を担っています。 従ってこれら物質の生体内中の存在 量は様々な疾患との関連が深く、リン脂 質の分析は診断や予防に広く用いられ ています。リン脂質には多くの物質群が 存在し、ホスファチジルコリン (PC) 、ホス Fig.3 SIM chromatogram of Phosphatidylcholines(1ng/ml) ファチジルエタノールアミン、ホスファチジ ルセリン、スフィンゴミエリン等がよく知ら Fig.1 TIC of Phosphatidylcholines(1μ/ml) れています。この中でPCはレシチンとも 呼ばれ、リン脂質中最も存在量の多い 化合物群です。PCは様々な脂肪酸エ ステルであり、従来の分析法としては、 GC,GC/MSやHPLC法等のクロマトグ ラフィー法による個別分析が使用されて います。GC,GC/MS法は各分子種の分 離には優れていますが、直接分析は不 可能です。また、HPLC法は感度、選 択性に欠けます。そこで今回はエレクト ロスプレー法を使用したLC/MSで4種 類のPCについて検討を行いました。 Fig.2 Mass spectra of Phosphatidylcholines(1μ/ml) その結果、Scanモードでは各1ppm 肪酸組成の確認が可能でした。これら 能でした。さらに市販の卵黄レシチンを スペクトルでは (M)や (M-H+Na)が主 イオンをモニターイオンとしたSIMモード 分析した結果、4種類のPCが検出され、 イオン種として観察され、分子量から脂 においては各1ppb濃度での検出が可 マススペクトルによる同定が可能でした。 濃度で検出が可能で、測定されたマス + Table + HPLC and MS conditions HPLC Instrument :HP1100 Column :Develosil UG-3 ODS(75mm,4.6mm,3μm) Mobile phase A :0.05%TFA Mobile phase B :IPA 50%A/B−100%B 0−30 min Flow rate :1 ml / min Oven temp. :40℃ Injection vol. :30μl MS Instrument Mass range Ionization Fragmentor Nebulizer Drying gas Mode :HP1100MSD :m/z 100 ∼ 1000 :APCI :140V 2 60 psi) :N( 2 12L/min, 350℃) :N( :Positive Fig.4 TIC and Mass spectra of Phosphatidylcholines in egg TI 16B2G1-058 1999.6 発行 本書の一部または全部を無断複製することは禁止されています。 〔記載内容は、お断りなく変更することがありますので、ご了承ください。 〕 製品名はデータ採取時の型名を記載しています。 (HPの分社にともない、1999年11月1日よりAgilent Technologies, Inc. のブランドに変更されています) LC/MS Application News No.58 リン脂質の分析 リン脂質は生体内に多く存在する物 質群で生体機能に対して重要な役割 を担っています。 従ってこれら物質の生体内中の存在 量は様々な疾患との関連が深く、リン脂 質の分析は診断や予防に広く用いられ ています。リン脂質には多くの物質群が 存在し、ホスファチジルコリン (PC) 、ホス Fig.3 SIM chromatogram of Phosphatidylcholines(1ng/ml) ファチジルエタノールアミン、ホスファチジ ルセリン、スフィンゴミエリン等がよく知ら Fig.1 TIC of Phosphatidylcholines(1μ/ml) れています。この中でPCはレシチンとも 呼ばれ、リン脂質中最も存在量の多い 化合物群です。PCは様々な脂肪酸エ ステルであり、従来の分析法としては、 GC,GC/MSやHPLC法等のクロマトグ ラフィー法による個別分析が使用されて います。GC,GC/MS法は各分子種の分 離には優れていますが、直接分析は不 可能です。また、HPLC法は感度、選 択性に欠けます。そこで今回はエレクト ロスプレー法を使用したLC/MSで4種 類のPCについて検討を行いました。 Fig.2 Mass spectra of Phosphatidylcholines(1μ/ml) その結果、Scanモードでは各1ppm 肪酸組成の確認が可能でした。これら 能でした。さらに市販の卵黄レシチンを スペクトルでは (M)や (M-H+Na)が主 イオンをモニターイオンとしたSIMモード 分析した結果、4種類のPCが検出され、 イオン種として観察され、分子量から脂 においては各1ppb濃度での検出が可 マススペクトルによる同定が可能でした。 濃度で検出が可能で、測定されたマス + Table + HPLC and MS conditions HPLC Instrument :HP1100 Column :Develosil UG-3 ODS(75mm,4.6mm,3μm) Mobile phase A :0.05%TFA Mobile phase B :IPA 50%A/B−100%B 0−30 min Flow rate :1 ml / min Oven temp. :40℃ Injection vol. :30μl MS Instrument Mass range Ionization Fragmentor Nebulizer Drying gas Mode :HP1100MSD :m/z 100 ∼ 1000 :APCI :140V 2 60 psi) :N( 2 12L/min, 350℃) :N( :Positive Fig.4 TIC and Mass spectra of Phosphatidylcholines in egg TI 16B2G1-058 1999.6 発行 本書の一部または全部を無断複製することは禁止されています。 〔記載内容は、お断りなく変更することがありますので、ご了承ください。 〕 製品名はデータ採取時の型名を記載しています。 (HPの分社にともない、1999年11月1日よりAgilent Technologies, Inc. のブランドに変更されています)
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