日生殖医会誌 53巻4号 158（282） 58 流産後の胎盤絨毛におけるゲノムインプリンティングの異常と男性不妊因子との関連性について ○佐藤晶子1，大津英子1，有馬隆博2，宇津宮隆史1 セントルカ産婦人科1，東北大学大学院医学系研究科2 【目的】近年，生殖補助医療（ART）によって授かった子供でBeckwith−Weidemann症候群やAngelman症候群などのインプリント病の発症が増加していると報告されている．インプリント遺伝子の発現調節に働くDNAメチル化は，配偶子形成過程で獲得されるため，ARTの配偶子操作についてその安全性が危惧されている．一方で，不妊患者自身の配偶子異常も存在する．本研究では，不妊治療により妊娠し，その初期の流産時に得られた胎盤絨毛のインプリント遺伝子のDNAメチル化の解析を行い，培養液，不妊因子等との関係をみた．さらに，ARTに用いられた精子との関連性について解析することを目的とした．なお，本研究は倫理委員会の承認を得ておこなった．【方法】不妊治療（排卵誘発を含む）後の流産検体78検体と，自然妊娠の流産（コントロール）検体38検体のDNAを用いてインプリント遺伝子のDNAメチル化について解析した．精子型；H19，GTL2，卵子型；SNRPN，ZAC，LIT1，PEG1，PEG3，XISTについてBisulphite−PCR法を用いて定量化した．【結果】1）不妊治療後の流産検体のうち21．7％（17／78）はメチル化の異常を認めた．2）IVF／ICSI群と非IVF／ICSI群に有意差はみられなかった．3）使用した培養液，不妊因子との関係も見られなかった．4）流産検体のメチル化の異常をみとめた17例のうち7例は精子の低メチル化と関連性を示し，乏精子症で多い傾向がみられた．【考察】不妊治療後の流産検体でのインプリント異常は，精子DNA由来であることが確認された．今後さらに増加するであろうART 不妊治療の安全性や危険性に関して，インプリントの異常の再評価が必要であると考えられた． 59 弓状子宮は不育症の原因になりうるか？ ○稲川智子，阿部崇，峯克也，桑原慶充，里見操緒，富山僚子，明楽重夫，竹下俊行日本医科大学産婦人科学教室【はじめに】ミューラー管の発生異常に起因する子宮形態異常が不育症の原因となることは古くから知られている．中隔子宮では流産率が高いとされているが，他の奇形に関してはエビデンスが少ない．最も程度の軽い弓状子宮に関しては，不育症との関連はないとする報告が多い．今回われわれは，不育症外来に登録されたクライエントのうち，子宮卵管造影で弓状子宮と診断された症例の不育症への関与について検討を加えた．【対象と方法】2000年1月から2008年4月までに当科不育症外来（2回以上の反復する流産歴を有する）を受診しスクリーニング検査を行った症例のうち，子宮卵管造影で子宮内腔の所見が正確に把握出来た261例を対象とした．中隔子宮と弓状子宮との鑑別は，牧野らのX／M比を用いた基準によった．不育症原因究明のためのスクリーニングは，日産婦生殖内分泌委員会（2004）の推奨する項目にしたがって検査を行った． 1結果】1）261例中，子宮奇形は44例（169％）であった．内訳は弓状子宮28例，中隔子宮10例，単角子宮4例，双角子宮2例であった．2）子宮卵管造影所見を正常群，弓状子宮群，その他の子宮奇形群に分けると，既往流産回数はそれぞれ285± α91回，2．93±0．86回，3．13±1．09回であり，各群間に有意差はなかった．3）子宮卵管造影以外の異常所見検出頻度は，弓状子宮群89．3％（25／28）に対してその他の子宮奇形群563％（9／16）であり，弓状子宮群では複数の原因が関与している率が有意に高かった（P＝0．012），4）弓状子宮以外には甲状腺機能異常を伴うことが多かった．【結論】弓状子宮は不育症症例に多く見られたが，単独で不育症の原因になることは少なく，他の異常所見を伴って不育症の病態形成に寄与していると推察された． 60 二卵性一絨毛膜双胎における血液キメラの遺伝子解析〇三浦清徳1，肥後貴史2，三浦生子’，増崎英明1 長崎大学医学部産婦人科1，同心会古賀総合病院産婦人科2 ＜症例＞29才の初産婦で，クロミッドおよびHCGを用いた不妊治療により妊娠が成立した．妊娠初期に双胎妊娠であることを確認され，超音波検査による膜性診断は一絨毛膜二羊膜と診断された．しかし，双胎間の性別が異なっていたため，二卵性一絨毛膜双胎を疑われた、分娩後，やはり両児の性は異なっており，一児は女児で他児は男児であり，胎盤の病理検査で一絨毛膜二羊膜であったことから，当科へ卵性診断を目的に紹介された．両親の説明と同意を得て，両親の血液5ml，双胎児それぞれの膀帯血5m1，膀帯，および口腔粘膜の擦過細胞を採取してDNAを抽出した．倫理委員会の承認のもと12種類のABI多型マーカーを用いてDNA多型解析を行い，5種類のマーカー（D19S420，D19S414，D20S171，D20S196およびD20S889）において両親の遺伝子型がヘテロ接合かつ異なっていたためこれらをinfomativeマーカーとした．D19S420 を用いた母親の遺伝子型は100bpと108bp，父親のそれは108bpと110bpであった．口腔粘膜細胞および謄帯から抽出されたDNAにおける一児の遺伝子型はいずれも100bpと108bp，他方の児のそれはいずれも108bpと110bpであり，双胎児は両親からそれぞれ異なる遺伝子型を受け継いでいた．D19S414およびD29196を用いた遺伝子型解析でも同様の結果が確認され，本例は二卵性一絨毛膜双胎と診断された．一方，D19S420における一児の膀帯血および他児の末梢血からいずれも3 種類のアレル（100bp，108bpおよび110bp）が検出され，膀帯血を介して血液細胞に限局したキメラが存在していた．＜考察＞遺伝子型解析で不妊治療に伴う二卵性一絨毛膜双胎と診断された．二卵性一絨毛膜双胎におけるキメラの発生機序として双胎問の血管吻合を介した他児の幹細胞の生着が考えられた．双胎におけるキメラの診断には，口腔粘膜細胞や膀帯などの細胞と造血幹細胞に由来する血液細胞を用いた卵性診断が重要であると考えられた．