Fonds voor Landbouw en Visserij Validatie van het voorgestelde autocontrolesysteem van enthoutparken voor de fruitboomkwekerij voorstel 1. Projectnaam Validatie van het voorgestelde autocontrole-systeem van enthoutparken voor de fruitboomkwekerij. Acronym:’AUTENT’ 2. Inhoud van het project De fruitboomkwekerijen in Vlaanderen behoren tot de grotere spelers op de Europese markt. Met een productie van ongeveer 4 miljoen fruitbomen per jaar voorzien ze de in de hernieuwing of aanplant van 1000-1500 ha boomgaard. Hoewel er maar een 6-tal professionele fruitboomkwekerijen bestaan, exporteren ze naar diverse landen over de belangrijkste fruitproductiegebieden in Europa en realiseren ze een omzet van 16-20 miljoen euro en stellen ze ongeveer 400 mensen tewerk in het hoogseizoen Omwille van een nieuw, doch nog niet gepubliceerd Europees keuringsreglement, ter uitvoering van de richtlijn 2008/90/EC, is het noodzakelijk om de stambomen en de moederplanten die het vermeerderingsmateriaal zoals het aanwezig is in een enthoutpark, op een regelmatige basis te controleren voor de aanwezigheid van ziekten. Voor de controle op ziekten en plagen is door het intersectorieel overlegorgaan PBB (Pépinieres Belges – Belgische Boomkwekerijen vzw) recent een autocontrole systeem voorgesteld waarbij via een gedetailleerd staalnameprotocol de aanwezigheid van de belangrijkste virussen en fytoplasma’s (zie Tabel 1) wordt onderzocht. Tabel 1: Virusziekten en fytoplasma’s die worden gecontroleerd tijdens de autocontrole van de fruitboomenthoutparken. Appel Peer Kers Pruim Virussen ACLSV, ASGV, ASPV, ApMV ACLSV, ASGV, ASPV, ApMV PNRSV, PDV, LChV PNRSV, PDV, PPV Fytoplasma’s AP PD - ACLSV: Apple Chlorotic Leaf Spot Virus ASGV: Apple Stem Grooving Virus ASPV: Apple Stem Pitting Virus ApMV: Apple Mosaic Virus PNRSV: Prunus Necrotic Ringspot Virus PDV: Prune Dwarf Virus LChV: Little Cherry Virus PPV: Plum Pox Virus (Sharka) AP: Apple Proliferation (Candidatus Phytoplasma mali) PD: Pear Decline (Candidatus Phytoplasma pyri) De economische haalbaarheid van het voorgestelde autocontrolesysteem hangt echter af van de mogelijkheid tot het werken met mengstalen, waarbij de totale kost van de analyse kan worden beperkt. De literatuur over de mogelijkheid en beperkingen van het gebruiken van mengstalen is schaars. Dutrecq et al. (2004) toonden aan dat de Voorstel Nieuw Project FLV 1 aanwezigheid van Apple Stem Pitting Virus (ASPV) in één geïnfecteerde appeltwijg nog detecteerbaar is wanneer deze twijg samen geëxtraheerd wordt met 79 niet-geïnfecteerde twijgen. In dezelfde publicatie wordt referentie gemaakt naar het succesvol detecteren van één geïnfecteerd staal van Prunus Necrotic Ringspot Virus dat samen geëxtraheerd werd met 149 stalen niet-geïnfecteerde Prunus twijgen. De detectie van verschillende virussen kan eventueel dan zelfs gebeuren met multiplex DNA scans. Ook de grootte van het staal genomen op een geïnfecteerde boom is relevant. Hoeveel bladeren moeten worden genomen om voldoende zekerheid te bieden dat een individuele boom geïnfecteerd is? Met andere woorden: kan een aanwezige infectie van virussen of fytoplasma’s gevonden worden in elk blad of is de detectiekans afhankelijk van het aantal bladeren dat per boom wordt gesampled? Onderzoek van Kummert et al. (2004) gaf aan dat er 8 bladeren per boom nodig zijn om met 99.9% betrouwbaarheid ASPV of ACLSV te kunnen detecteren. We houden deze staalgrootte aan in elke proefopzet onder dit project want deze staalgrootte is ook voorgesteld in het voorstel voor autocontrole van de vruchtboomenthoutparken. Tenslotte willen we bijkomend informatie genereren over de noodzakelijke perimeter rond een geïnfecteerde boom waarin bomen in het enthoutpark moeten opgeruimd worden. Met dit project willen we antwoord geven op de volgende vragen: - Kan een door virussen of fytoplasma’s aangetaste boom gedetecteerd worden bij een mengstaal van bladeren van meerdere bomen waarbij slechts één boom geïnfecteerd is? - Wat is de maximale aantal stalen dat kan gepooled worden in het mengstaal ? - Is de staalname van 8 bladeren per boom nog steeds voldoende wanneer er mengstalen gebruikt worden? - Hoe groot is de perimeter waarin alle bomen rond een geïnfecteerde boom moeten vernietigd worden bij een positieve diagnose? We wensen dit te doen voor één virus van appel of peer, één fytoplasma van appel of peer 3. Sector waarop het voorstel van toepassing is Boomkwekerijen – subsector fruitbomen 4. Organisatie belast met de uitvoering a. pcfruit vzw adres: Fruittuinweg 1, 3800 Sint-Truiden telefoon: 011 69 70 85 e-mail: [email protected] b. ILVO, Plant-Gewasbescherming Adres: Burgemeester van Gansberghelaan 96, 9820 Merelbeke telefoon: 09 272 24 74 e-mail: [email protected] 5. Tijdsduur : 16 maanden (september 2013 – december 2014) Voorstel Nieuw Project FLV 2 Het is belangrijk in twee seizoenen de mogelijkheid te hebben fytoplasma’s te detecteren en omdat de symptomen meestal pas echt tot expressie komen in september/oktober vragen we deze periode mee op te nemen in 2014. 6. Budget KOST PCR - analyses (ILVO) (aanwezigheid van fytoplasma’s en virussen) Personeelskost pcfruit (monitoring, proefopzet, opvolging, rapportering) Werkingskost pcfruit (verplaatsingskost, pre-analyse virussen of fytoplasma’s) TOTAAL EURO 4.000 9.000 2.000 15.000 7. Praktisch stappenplan Stap 1: Verzamelen en identificeren van virus geïnfecteerd materiaal in productieboomgaarden Pcfruit gaat op zoek naar aangetaste bomen in boomgaarden (virus, fytoplasma), waarop volgende testen worden gedaan. Voor ‘Stap 2’ zullen alle boomgaarden in aanmerking komen, voor ‘Stap 3’ beperken we ons tot boomgaarden van maximum 15 jaar, omdat dit de leeftijd is waarop bomen in een enthoutpark vervangen worden. Eventueel wordt een pré-analyse om zekerheid te hebben over de virusstatus. De analyses in stap 2 of 3 gebeuren door het ILVO. Het onderzoek gebeurt dus niet met stalen die verzameld worden in een enthoutpark, maar met stalen die verzameld worden in boomgaarden voor fruitproductie. Stap 2: Bepalen van de dilutiefactor van een geïnfecteerd staal in een mengstaal dat mogelijk is zonder het risico op vals negatieve stalen te verhogen. Er zal zowel voor appel als voor peer een mengstaal verzameld worden van bladeren waarbij een aangetast blad zal gemengd worden met gezonde bladeren in diverse verhoudingen : 1/1, 1/10, 1/33 en 1/100. Na extractie zal met behulp van RT-PCR bepaald worden of het geïnfecteerde blad nog met voldoende betrouwbaarheid kan bepaald worden. De virussen die voor aantasting zorgen worden gekozen uit Tabel 1, naargelang ze kunnen worden gevonden in boomgaarden. Stap 3: Bepalen van de perimeter waarin na het vinden van een positieve analyse bomen in het enthoutpark moeten worden vernietigd. Wanneer er een geïnfecteerde boom wordt aangetroffen in een boomgaard van maximaal 15 jaar oud, zal een bijkomend staal genomen worden op: - de 1ste buurboom (of max. 1.5 m van de geïnfecteerde boom), - de 3de buurboom (of max. 5 m van de geïnfecteerde boom) en - de 6de buurboom (of max. 10 m van de geïnfecteerde boom). Na analyse van dit staal (zuiver, geen mengstaal) moet dan blijken in welke mate naburige bomen van een geïnfecteerde boom ook geïnfecteerd zijn met hetzelfde virus of fytoplasma. Voorstel Nieuw Project FLV 3 Stap 4: Beperkte sampling in het enthoutpark (met financiering door boomkwekerijen) 8. Referenties Dutrecq, O., Lepoivre, P., Roussel, S., Kummert, J. and Jijakli, M.H. (2004) Statistically reliable sampling and diagnosis of plant pathogens using a simplified “universal” protocol for sample preparation and analysis by (RT)-PCR http://hdl.handle.net/2268/11658 Kummert, J., Malice, M., Marbot, S., Lepoivre, P., Steyer, S. and Oger, R. (2004) Sampling protocols and risk of error significance in molecular detection tests for fruit trees certification. Acta Horticulturae 657:541-546 Het voorstel dient als digitaal exemplaar ingediend te worden bij de voorzitter van de Raad van het Fonds voor Landbouw en Visserij: [email protected] met cc aan [email protected] Voorstel Nieuw Project FLV 4
© Copyright 2024 ExpyDoc