クロマトグラフィー 1 分離の必要性と分離法多様な性質（サイズ、荷電、疎水性親水性（極性））分析時の妨害を避けるためにも、極力「分離」分離法：相変化を利用沈殿（液相から固相に移動）蒸発（蒸留）（液相から気相に移動）溶媒抽出：2種の混じり合わない溶媒（通常水と有機溶媒）を使い、各溶媒中での溶解度が物質によって異なる現象を利用。水に溶けやすいもの：イオン、極性分子。溶けにくいもの：非イオン性の非極性分子。水オクタノール分配係数クロマトグラフィー水オクタノール分配係数 log Pow Co Pow  Cw CO=1-オクタノール(比重0.82)中の物質濃度(mol/L) CW=水中の物質濃度(mol/L) ・水・オクタノール・物質混合遠心分離オクタノール各相の濃度測定水 2 クロマトグラフィー固相抽出液相→固相固相：粉末状シリカ、ポリマー粉末 3 溶離液で溶離クロマトグラフィークロマトグラフィー（固相抽出の一例）語源 Chroma：ギリシャ語で色 Graphein：ギリシャ語で描く Chromosome：染色体クロマトグラフィーの創始者 Tswett http://www.imtakt.com/jp/Others/Tswett/ 使用する反応：ファンデルワールス力、静電的相互作用、水素結合、吸着、イオン交換、サイズ排除入浴剤のカラムクロマトグラフィー 4 5 クロマトグラフィークロマトグラフィーの物質分離メカニズム川 5分後 8分後 12分後川底の石への結合力 B 混合液 A 5分 8分 12分時間カラム 6 クロマトグラフィーサンプ v2 移動相 v1 ル注入固定相：カラム内に固定された固相。サンプル中の混合成分を分離する。移動相：液相または気相。サンプルを固定相の間をぬって移動させる役割を担う。親和性：固相への結合しやすさ stat 分配比：固定相中の濃度 /移動相中の濃度。分配係数 D mob 検出器 C K  C クロマトグラム検出器出力クロマトグラム：クロマトグラフィーで得られるデータを示したもの。横軸時間、検出シグナル。保持時間面積=量ピーク時間クロマトグラフィー液体クロマトグラフィーの検出器クロマトグラフィーはあくまでも分離を行うもの吸光度検出器「吸光光度法」にて説明済み。カラム通過後のサンプルを含む移動相に光を当て、吸光度を測定。電気化学検出器（電気伝導度）伝導率（電気の通り易さ。電気抵抗の逆数）を測定。純水は極めて電気を通しにくい絶縁体である。イオンなどが溶けることによって電気が流れるようになる。電気化学検出器（電圧、電流）「酸化還元反応」にて説明済み。カラム通過後のサンプルを含む移動相に電極を浸し、酸化還元反応により発生した電圧や電流を測定。示差屈折率検出器サンプルを含む液と、並行して流されたサンプルを含まない液（対照）との、屈折率の差を測定質量分析後述 7 クロマトグラフィーガスクロマトグラフィーの検出器熱伝導度検出器（thermal 内蔵されたタングステンフィラメントに電流を流し、測定 conductivity detector：TCD）対象物質が流れてくることで変化するフィラメントの電気抵抗（これに伴い変化する電圧）を測定。測定可能物質：無機物質（H2、N2、O2、CO、CO2、N2O）フレーム（水素炎）イオン化検出器（flame ionization detector：FID）有機化合物を燃焼するとイオン性の燃焼物を生成することを利用し、このイオンを電極で補足。発生する電流を測定。測定可能物質：有機物質。アミノ酸、ガソリン成分、揮発性有機化合物（VOC）、プラスチック成分、など多数。電子捕獲型検出器（electron 放射性同位元素ニッケル-63からβ線が出ており、測定 capture detector：ECD）対象物質をイオン化する。これにより電子が発生する。発生する電流を測定。測定可能物質：ハロゲン、カルボニル、ニトロ基を持つ物質（有機塩素化合物、トリハロメタン、殺虫剤、PCB） 8