筑波技術大学紀要 National University Corporation Tsukuba University of Technology 微小な刺激に対する筋・軟部組織の反応の光学的計測筑波技術大学保健科学部保健学科鍼灸学専攻鮎澤聡，笹岡知子キーワード：秩序，複屈折，筋 1. 4. 背景筋組織の観察鍼灸治療においてはいわゆる経穴に施術して治療を良好な固定が得られなかったため，観察はミジンコ行うが，どうして鍼のような微弱な刺激で治療効果ががプレパラート上の水滴の中で横になり時折回転する現れるのか，さらには経穴・経絡とは何か，いまだ明ような状態で，ステージ手動で動かすことで追跡し，らかになっていない。これまで研究代表者は，「経絡肉眼とビデオカメラで観察を行った。偏光顕微鏡（Zeiss とは生体の秩序生成と関係するコヒーレントな振動系 Axioimager POL）に温度制御ステージ（MAT500S）をであり，筋・筋膜や軟部組織，およびその周囲に配向装着し，プレパラート上の水滴内においたミジンコにしている水が関与する」という作業仮説のもとに研究低温負荷（3℃）を行い，動きによるノイズが比較的少を進めてきた 1）。また，実験生物を用いてこのコヒーレント性を複屈折という光学的指標を用いてライブでないと思われた触角筋（antenna muscle）を中心に輝度変化や形態変化を経時的に観察した。光学的に観察する方法を検討してきた。複屈折とは結低温負荷を行うと動きが緩慢になることを予測して晶や液晶にみられる特徴であり，組織の秩序性の指標いたが，顕著な動作の低下は得られなかった。筋組織となる。本研究期間においては，まず複屈折の変化をについても，低温負荷後に即時的な変化は肉眼では観経時的に観察する方法を検討し，次に生物に刺激・負察されなかった。しかし，長時間観察し徐々に弱って荷を与えた場合の複屈折の変化に関する検討を試みた。くると，肉眼による観察では触角筋の輝度に「むら」 2. が生じてくるように見えたが，定量的な評価はできず，実験生物の養育環境の整備試料の小生物としては透過観察で筋組織を観察するまた透見している甲殻の変化の可能性を否定できなかことができるミジンコ（大ミジンコ Daphnia magna）った。また，もし複屈折に変化を生じていたとしても，を採用した。まず実験資料を安定に使用することがで本研究で目的としている微小な刺激による反応ではなきるように濾過フィルターなどの飼育設備を整えた。く，低酸素などによる組織変性に伴う形態複屈折の変岡崎統合バイオサイエンスセンター・基礎生物学研究化ではないかと考えている。所よりDaphnia magnaを入手し，繁殖させることに成功 5. した。 3. 今後の課題ミジンコは筋組織が明瞭に透見される点においては試料の固定方法の検討優れたモデルと考えているが，本研究においては，動ミジンコは胸脚を持続的に動かしており，画像解析きの問題で精密な観測が困難であった。微小な刺激になどを用いた複屈折の観察に十分な固定方法を検討す対する複屈折の変化は筋の組織構造による形態複屈折る必要があった。通常はパラフィンなどを用いることと比して非常に小さいことが予測される。他の実験生が多いが，パラフィンそのものが複屈折をするため，物も視野に入れて，ライブ観察というメリットを生か複屈折の観察においては不適であった。スライドガラしつつ複屈折を定量的に観測できる系を今後さらに検スを加工し，前後左右や上下に圧迫固定する，溶解し討していきたい。たアガロースを用いて固定するなどの方法を試行錯誤したが，圧迫による組織の変位が観察に影響するなど引用文献の問題があった。また，光強度の計測においては胸脚 [1] 鮎澤聡．偏光顕微鏡を用いた生体の秩序性の光学の動きがかなり大きなノイズとなるなど，現状では満的観察．人体科学．2013;22（1）:32-35. 足のいく方法は得られていない。 ― 74 ―