30Z-pm17 細胞分裂期における ATF-2 のリン酸化の誘導中山　祐治 1 ，福本　泰典 1 ， ◯長谷川　仁美 1 ，石橋　賢一 1 ，松井　優紀 1 ， 1 1 千葉大院薬・分子細胞生物学，2 高雄醫學大學）横山　和尚 2 ，山口　直人（【目的】Activating transcription factor-2 (ATF-2) は PKC、JNK、p38、ERK などの様々なキナーゼにより活性化される転写因子である。cAMP – response element binding protein ファミリーの一つで、二量体となり DNA に結合し転写活性を示すことで、増殖、分化、アポトーシスに関与することが知られている。ATF-2 のリン酸化部位は複数存在し、それぞれ違うシグナル経路でリン酸化される。細胞の間期における転写因子としての機能は解明されていることが多いが、分裂期での機能は知られていない為、今回、分裂期における ATF-2 のリン酸化に着目して研究を行なった。【方法・結果】免疫染色を行ない共焦点レーザー顕微鏡で観察したところ、ヒト子宮頸癌由来細胞である HeLa S3 細胞の分裂期において、ATF-2 のリン酸化が上昇していることがわかった。また、チミジンで細胞を S 期に同調し、薬剤を抜いてから 11 時間後に回収したものを分裂期の細胞として、非同調の細胞とで電気泳動度を比べると、分裂期の細胞でバンドシフトが起こった。さらに、顕微鏡下で ATF-2 のリン酸化レベルを詳しく調べてみると、分裂前期からリン酸化が上昇し分裂後期で下がるという事がわかった。CDK1 阻害剤 RO-3306 を処理すると、分裂期における ATF-2 のリン酸化が消失した。【考察】分裂期でのリン酸化の上昇と、 RO-3306 処理によるリン酸化の消失という、リン酸化の変化が起きている事から、 ATF-2 が CDK1 の下流に存在しリン酸化を受けている可能性があると考えている。今後、ATF-2 のリン酸化部位を特定し、分裂期での役割を解明していきたい。