宮崎大学学術情報リポジトリ Title 肝臓酵素分解物の新規生理活性機能の検索 Author(s) 六車, 三治男; 西, 俊郎; 奥野, 真代; 山下, 真由子; 河原, 聡 Citation 平成14年度食肉に関する助成研究調査成果報告書, 21: 248-255 URL http://hdl.handle.net/10458/3748 Date of Issue 2003-12 Right Description この研究は「伊藤記念財団」の助成を受けて行われました。 2 4 8 平成1 4 年度食肉に関する助成研究調査成果報告書 Ⅵ) 1 . 21 2 0 0 3 . 1 2 財団法人伊藤記念財団肝臓酵素分解物の新規生理活性機能の検索 Sear c hofNove lBi ol ogi c al l yAc t i veComponent si nLi ve rHydr ol ys at e s 六単三治男･西俊郎･奥野真代･山下真由子･河原聡 ( 宮崎大学農学部) Mi chi oMugur uma,Tos hi oNi s hi ,Ma y( )Okuno. MayukoYamas hi t aandSa t os hiKa waha r a ( Facul t yofAgr i cul t ur e.Mi yazakiL T ni ver s i t y) Li verhydr ol yz edpowder( Li ver Hi ) c ont a i nst hevar i ousf unc t i ona lmat er i a l s .whi ch hasbi or egul at i on,Ther e f or e,i ti sc ons i de r edt hatt hef unct i ona lmat er i a l sar ee xi s t edi n t hel i ヽ T er Hi .Thepur pos eoft hi ss t t l dywa st os ear c ht he i rf unct i onalmat er i a l s , es pec i a l l y angi ot ens i nI I C OnVer t i ngenz yme( ACE) i nhi bi t or ype pt i desandant i oxi da ntac t i vi t y. Fi r s to fa l l .i nhi bi t or ya ct i it v i es aga i ns tACE o fl i ver Hia nd t he i r enz ymat i c hydr ol ys a t es wer ei nves t i gat ed.Li ver Hiwas di ges t ed by peps l n.t r ypS i n and αc hymot r yps i n.Af t erdi ges t i on.hydr ol ys at ess howedACE i nhi bi t or yac t i it v i es .andt he t r ypt i chydr ol ys at e ss howedt hes t r onges ta ct i vi t y.Thel i ver Hiet hanolext r ac twa s appl i edt or eヽ , er s e phas ehi ghper f or manc el i qui dchr omat ogr apl l yt OS epa r at ea na c t i ve pept i de. I nt hec as eo fA1 8f r ac t i on, t hemol arc onc ent r at i onofl i ver Hipept i desr equi r e d t oi nhi bi t5 00 00ft hea ct i vi t yi nc r eas edmar kedl y( 0. 26 8F L gml ) .Se c ondar y.t hee f f e c t so f l i ve r Hiandt hei renz yma t i chydr ol ys at esonant i oxi danta c t i vi t i eswe r es t udi ed.The DPPH r adi c als c avengi ngmet hodandt hehydr oxylr adi c ls a c a vengi ngmet hodwer e L l S edf ordet ec t i ng.Thel i ver Hihads t r ongant i oxi dantac t i vi t y.Themol a rc oncent r at i on o fl i ver Hipept i desr e qui r edt oi nhi bi t5 0q bo ft hea ct i vi t yo fDPPH r adi c a ls c avengi ng andhydr oxylr adi c a ls c a veng ingwer e1 5 7F L g′ mla nd1 35F l g, ' ml , r e s pe ct i ve l y. Thes er es ul t ss ugges t edt hatt hepor ci nel i ver Hiwasabl et os how ACE i nhi bi t or y ac t i vi t yandant i oxi danta ct i vi t y.andt hatmi ghtbeaus e f uls our c eo fphys i ol ogl C a l l y f unct i ona lf ac t or s . 1 . 日的ることから,積極的に補充することで治療効果が期待できることが報告されて以来, 多くの臨床研肝臓はさまざまな有効成分の宝庫であり. 古く究がなされている12.｡また,酵素分解物は低分子から人々はこれを食することで種々の疾患の治癒ペプチドを主成分とするために,消化性および吸や回復に役立ててきた: ,肝臓を酵素により分解し収性に優れ,消化能力の衰えた老人や病人, タンて得らj tる肝臓加水分解物には各種アミノ酸, メパク質の摂取を必要とする乳幼児からスポーツ選クレオシド, ヌクレオチド,低分子のペプチド, 手の食生活にまで貢献することが期待され,すでビタミン, ミネラル等が豊富に含まれており,機に伊藤ハム( 柵より豚肝臓酵素分解物 (レバー Hi ) 能障害を起こした肝臓ではこれらの成分が減少すとして製品化されている ` j o この製品には.肝代 2 4 9 肝臓酵素分解物の新規生碑活性機能の検索謝改善作用,肝再生促進作用, 肝解毒機能改善作 0 . 5 5 4 mgを加えて反応を停止した｡ついで,酢酸用,抗ウイルス作用. アルコール性肝障害治療効エチル1 . 5 mは加えてACEの作用により遊離した馬尿酸を振とう抽出し,3 , 0 0 0 r pmで 1 0分間遠心分この豚肝臓酵素分解物にはその他,肝臓酵素分離を行った後,酢酸エチル層 1 mgを分取して蒸発解物中に血圧調節に関与しているACE( アンギオ乾固 ( 1 0 0o C,1 0分間)した｡乾固した馬尿酸は1 M テンシン Ⅰ変換酵素 ) 阻害作用,肥満抑制作用, 塩化ナトリウム溶液 1 mg で溶解し,波長2 2 8 n mにコレステロール低下作用等が存在する可能性も示おける吸光度を測定した｡唆されており, それらを含む新しい生理活性機能阻害率は,試料の吸光度をS. 試料の代わりにの研究が求められている｡近年 , いろいろな材料超純水を加えて同様に反応させたときの値をC, からの ACE阻害ペプチドに関する研究が行われあらかじめ反応停止液を加えて反応させたときのている値をBとして次式により求めた｡卜川 l ｡また,われわれも動物骨成分 11 ' や豚 12 肉由来のACE阻害ペプチドの同定1 … を行ってきた｡阻害率 ( 0 0) -i ( CIS) /( C-B) ixl O O 阻害活性 ( I C, ‖ ) は､_ L式により求められる阻害そこで今回は,肝臓加水分解物中に存在が期待率が5 0 %を示すときの阻害物質濃度で示した｡対されるACE阻害作用を示すペプチドの同定と抗照実験として,既知のACE阻害物質であるカルノ酸化作用についても検索を行ったので,得られたシンの ACE阻害活性を測定した｡ 2 . 3 エタノールによるレバー Hi の分画結果を報告する｡エタノールによるレバー Hi の分画はレバー Hi 2. 実験材用および方法を9 0 0 / oエタノールに溶解させ ,遠心分離 ( 1 0 , 0 0 0× 2 . 1 実験材料 gl O分間) した｡遠心分離後, 上二清と沈殿物に分伊藤ハム株式会社製レバー Hi を使用した｡なけ,遠心エバポレーターでエタノールを除去し, お,このレバー Hi は,豚肝臓を酵素分解し,特異それぞれレバー Hi 上清な臭気を除去した水溶性のペプチド粉末である｡ Hi 沈殿 ( Li ve rHi p . p. t . ) に分画した｡ 2 . 2 アンギオテンシン変換酵素 ( ACE)阻害活性の測定 ( Li ve i Hi s , U . p . )とレバー 2 . 4 高速液体クロマトグラフィーによる分析高速液体クロマトグラフィー ( HPLC)による Cu s h ma nらの方法 1 5 】に準じて,和光純薬工業株分析は ,TS Kg e lG2 0 0 0 SW､カラム ( 7 . 8 mmⅠ . D. × 式会社製ウサギ肺由来 ACEとナカライテスク社 3 0 c m)を島津製LC1 0 AD型のHPLC装置に接続し製合成基質HHL ( Hi ppu r y1 LHi s t i d yl LLe u c i n e ) て行ったo溶出液は2 0 mMT )ン酸緩衝液を用いて測定した｡を用いた｡すなわち,試料 6 F L I に,6 0 mU/ mlACE溶液2 0 F L l および7 . 6 mM HHL5 0 F L l を添加し,3 7 ℃ で3 0分間反応させた｡ ACEは, ホウ酸緩衝液 ( pH8 . 3 ) ( pH7 . 0) 2 . 5 レバー Hi の消化耐性試験レバー Hi を生体内の消化酵素で分解し, ACE 阻害活性を測定した｡すなわち,レバー Hi と各種で潜解し,HHLは,塩化ナトリウム ( 和光純薬工消化酵素 ( ペプシン, トリプシンおよび α -キモト業製,特級 ),0 . 2 5 Mホウ酸緩衝液を,それぞれ最リプシンをタンパク質 :酵素比で 1 00:1となるよ終濃度0 . 6 0 8 M,0. 1 Mになるように超純水を用いうに添加し,ペプシンとトリプシンは3 7 ℃ で 6時て調製した溶液で溶解した｡その後 ,0. 1 N塩酸間, α -キモトリプシンは2 5 ℃で 6時間反応させ 2 5 0 平成 1 4 年度食肉に関する助成研究調査成果報告書 V o 1 . 21 2 03 . 1 2 財団法人伊藤記念財団た､｣反応後 . 加熱により酵素失活を行い,遠心分代わりに超純水を加えて同様に反応舵 ( 1 0. 000×gl O分間 ) し, 日青の ACE阻害活性 ′ させた時の値をCとして次式より求めた〔 ` 払)-( CI S) / Cx1 00 消去率 ( を測定した｡ 2. 6 ACE阻害活性化囲予の精製阻害活性 ( I C, ∩) は､仁式により求められる阻吾上清の最もACE阻害活性が高かったレバー Hi 00 / Oを示すときの阻害物質濃度で示した｡対率が5 ACE阻害活性化因子を逆相HPLCにて精製した｡照実験として,既知の抗酸化物質である還元型グ HPLC装置はGLs ci encel ner t s i lODS1 2( 6. Omm ルタチオンの消去活性を測定した｡ 1 1 0AD I . Dx1 5 0mm) カラムを接続した島津製 LC型を用いた二 2.7 DPPI iラジカル消去活性の測定 3 . 結果および考察国内の主要な疾患のうち,高血圧は比較的 i : . 要 1 -に抗酸化消去活性の測定はDPPH分光測定法 1 な疾患である .高血圧症は,脳･心臓など各種臓 1 . 1 di pl l eny1 2準じて行った｡すなわち ,DPPH ( 器障害や欠陥性疾患の危険因子であり. 高齢化社 ).MES緩衝液 ( pH6. 0㌦エタノー pi cr yl hydr azyl 会の進展とともに早急な予防対策を講じる必要が 0分ルの混合溶液に試料を加えて ,室温 , 暗所で 4 ある｡近年 , 食品中に存在し,血圧上昇に関与す oSpec1 600分光光度間反応させ ,反応後,島津 Bi るACEを阻害して,高血圧防止に役立てようとす計により波長517nmにおける吸光度を測定した｡､Ll ' O る研究が ,数多く報告されている ' DPPHラジカル消去率は,試料の吸光度をS,試料も肝臓の酵素分解物中にACEを阻害して血圧上の代わりに超純水を加えて同様に反応させたとき昇を抑制するペプチドの検索を行うために以下の｡の値をCとして次式より求めたL 実験を試みた｡ DPPHラジカル消去率 ( % )- , : 本研究で 3.1 高速液体クロマトグラフィーによる分析日C-S) ' Cixl OO 構成酵素処理により低分子量化したレバー Hi ラジカル消去活性 ( I CJ は､上式により求めら成分を, さらに低分子量成分を主に含む画分と比町早手 ' : が5 00 / Oを示すときの阻書物質濃度で示れる｢較的高分子量成分を含む画分に分画するためにエしたこ対照実験として .既知の抗酸化物質である上清タノール沈殿を行った｡分画後のレバー Hi 還元型グルタチオンの消去活性を測定した｡沈殿の分予貰分布をゲルろ過 HPLCにとレバー Hi 2 . 8 安息香酸ヒドロキシル化法 Fi g.1)｡いずれの試料も低分子域より分析した ( 安息香酸ヒドロキシル化法はChungらの方法 I T ' に準じて行った｡すなわち, 1 00mM リン酸緩衝に主要など- クが存在していたO レバー Hi日青よりも低分子城のピークが増加は元のレバー Hi pH7. 4)を 1 . 0mg ,試料を0. 4m/ ,1 0mM FeSO｣液 ( ･ H1 0と1 0mM EDTA4Naの混合溶液を0. 2ml およ . 2mgを混合･撹拝したのび安息香酸ナトリウムを0 0mM 過酸化水素水を0. 2m抽]えて ,37℃ ,2 ちに1 時間反応させた｡反応後 . 直ちに島津 RF1 500蛍光分光光度計により. Emi s s i on407nm,Exci t a ㌔ t i on305nmを測定した _ 元のレバー Hi よりもわずかであるが高分子成分に富むことが明らかになった｡ 3. 2 レバー Hi およびそのエタノール分画物の ACE阻害活性およびそのエタノール分画物の ACE レバー Hi 阻害活性を測定したところ, 阻害率はいずれの試 S ,試料のラジカル消去率は, 試料の吸光度を料もタンパク質濃度依存的に上昇した｡この結果 251 肝臓酵素分解物の新規生理活性機能の検索︼Hrhu 1 1 ー l n JJu 叫爪 20 30 40 50 Re t e n t i o nTi me( mi n) 0 1 0 _l l U 1 0 情吊仙川川川卜 -1 ∴･1 0 20 30 40 50 Re t e n t i o nTi me( mi n) 0 1 0 20 30 40 50 Re t e nt i o nTi me( mi n) Fi g. 1 HPLCpr of i l esofl i ver f i iと l ndt hei rf r act i ( ) mat es . A;Li ver Hi ,B;Li ver His . u. p‥C;Li ヽ･ er Hip. p. L HPLCc ( ) ndi t i ( ) n;Col umn:TSK gelG2000SW､ 1( 7. 8mm Ⅰ . D. ×30cm) El uent:20mM phos phat ebuf f er( pH7. 0) Fl ow r at e:0. 2mg ′n l i n Det ect i ol l:OD at21 5nm Mol ecul arwei ghtmar ker;( 1) Apr ot i ni n( 6. 500Da) , ( 2) Ri vof lavi n( 376Da) から得られたI Cぅ｡値をF i g . 2に示した｡レバー Hi は低分子城に存在する叶能性が示唆された｡ 3 . 3 自体の I C5 0 値は0. 24mg/mlとなり,既知の ACE阻レバーHi 山来ACE阻害ペプチド群のi F ] ' 化耐性害物質であるカルノシンの I C 3 . 億よりも高い値をレバー Hi を体内の消化酵素であるペプシン, ト示した｡次に, エタノールでの分画の結果, レバーHi 上清のI C5 0 値は0 . 1 0, レバー Hi 沈殿はリプシンおよび α-キモトリプシンで消化し, そ 0. 34mg/mJ であった｡このこととゲルろ過 H PLC の消化物の ACE阻害活性を測定したの結果から, レバー Hi 由来の ACE阻害ペプチドの結果 , 未分解のレバー Hi のI C､ = 値が0 . 2 4mg′ ′ ml Li ver ･ Hi Li ver Hi 90% sup. Li ver Hi90% ppt . Car nosi n 0. 0 0. 2 0. 4 0. 6 0. 8 ( Fi g. 3トそ 1. 0 1 C5 0( mg/ ml ) Fi g. 2 ACEi nhi bi t or yact i vi t i esofL i verHiandt hei rf r act i onat es . I C , ‖: c oncent r at i onofpr ot ei nr educedt oi nhi bi t5O9 , 00ft heACEact i vi t y 252 平成1 4年度食肉に関する助成研究調査成果報告書 Vo1 . 21 2 03. 1 2 財団法人伊藤記念財団 Li veトHi Pepsl n Tr ypsl n aChymot r ypsl n 0. 00 0. 05 0. 1 0 0. 1 5 0. 20 0. 25 1 C5 0( 〟g/ ml ) Fi g. 3 ▲ 1CEi nhi bi t or さ ,act i vi t i eso fl i verHiandt he i rhydr ol ys at es . I C, . ,;c onc ent r at i ono fpr ot e i nr educ edt oi nhi bi t5 0 0 / oo ft heACEa ct i vi t y. であるのに対し,ペプシン消化物が0. 1 9, トリプいたC それらのI C訓値は前者が0 . 268F L g/ml ,後者シン消化物が0. l l , α-キモトリプシン消化物がが5. 87/ J g/ / mJ であった ( Fi g.4 B,Fi g.4 C)｡今後 0. 1 6mg/mJ であり,すべての消化物で活性が上昇さらに高い阻害活性を示すペプチドを単離し,そ由来のACE阻した｡以上の結果より, レバー Hi れらの構造を明らかにする必要がある｡害ペプチド群は生体内での酵素に耐性を有し. し 3.5 抗酸化機能の測定かもそれら消化物のACE阻害活性はレバー Hi 自活性酸素やフリーラジカルは,生体内では種々体よりも高くなったことから,体内での消化酵素の生体分子を攻撃し,生体膜の損傷や遺伝子の障による消化で新たなACE阻害ペプチドが生成す害を生じる｡これらは各種疾患,発ガン,老化のる可能性が示唆された｡また,生体内酵素による要因とされており,生体に吸収されて抗酸化スト消化耐性はこれらのペプチドが消化管部位まで分レスに働く効果的な抗酸化剤の開発が望まれてい解されずに移行する可能性を示唆している｡る｡トコフェロールやポリフェノールが代表的な 3.4 レバー Hi 由来ACE阻害ペプチドの精製抗酸化剤であるが, タンパク質を加水分解するこ由来ACE阻害ペプチドの精製を目的レバー Hi とにより不飽和脂肪酸の自動酸化を抑制するペプに.エタノール分画で最もACE阻害活性が強かっチドが生成することが認められている｡そこで, たエタノール9 0 %上清画分を逆相 HPLCにより分本研究でも肝臓の酵素分解ペプチドの抗酸化活性 Fi g.4 A) ｡その結果,いくつかの画分で画した ( の有無について検討した｡ ACE阻害活性を有する画分が存在し,その中で非食品の抗酸化機能を評価する方法としては種々常に強い活性を有している画分は溶出時間23分から25分に溶出していた画分Aと26分から27分に溶ある｡また評価法によっては結果が一致しない場出している画分Bであった｡そのI C訂直は前者が合もあり,可能ならば原理の異なる 2つ以上の方 28. 7/ J g/mJ ,後者が22. 6/ J g/ / mJ であった｡次にこれ法で評価することが望ましい｡本研究では, らの画分を同カラムにてリクロマトした結果,画 DPPH分光測定法 161 と安息香酸ヒドロキシル化分Aで溶出時間27-28分の画分と画分Bの溶出時法 17'による分析を行った｡間28-29分の画分に強いACE阻害活性を有して (1) DPPHラジカル消去活性 253 肝臓酵素分解物の新規生理活性機能の検索 t L [ u SMMl t !33t Jt!q 10 SV q 0 10 2 0 Re tent i onT im e( m i n) 3 0 4 0 C D U 1 J 0 l ･ ∈ 3 0 on Ti me ( mi n ) 3 CH I - U 7 I l 0 ヒ二 ±-1 2 0 R e t e n t i 八 %) N 3 1 ･ 87 J J - 4 0 ′ ′ ′ ′ J 2 0 3 0 Re t e n t i o nTi me( mi n ) I C5 . : 5 g / m L ′ ′ ∧ ′ ､ - ･ -/ ･4･･･､ー u t t l S N M一t ! 3 3ttt!qJ[OSqV t ut t S M Nt t ! 3 3 t t t ! qJ[Oq SV 1 0 B1 9 ⊥ 4 0 Fi g. 4 Rever s e phas eHPLCpr of i l eso ft heac t i vef r act i on. A ;Chr omat ogr am ofa ct i vef r ac t i ona f t erGLs c i enc el ner t s i l ODS2c ol umn. HPLCc ondi t i on;Col umn:I ner t s i lODS2( 6. 0mm Ⅰ . D, ×1 5 0mm) Sol vents ys t em :00 / ot o3 0% CHぅ CN ( 5-35mi n)i n0. 1 q oTFA Fl ow r at e二1mg ′ ′ mi n Det ect i on:ODat22 5nm BI ,Rechr omat ogr aphyofa ct i vef r act i onA HPLCc ondi t i on:Col umn:I ner t s i lODS2( 6. 0mm Ⅰ . D. ×1 5 0mm) Sol vents ys t em :7 0 , ot o1 1 0 / oCH与 CN ( 1 5-35mi n)i n0. 1 % TFA ′mi n Fl ow r at e:1mg Det ect i on:ODat225nm C;Rec hr omat ogr aphyofa ct i vef r ac t i onB HPLCc ondi t i on;Col umn:I ner t s i lODS2( 6. 0mm Ⅰ . D. ×1 5 0mm) 1 0 / oTFA Sol vents ys t em :7% t o1 30 , oCH与 CN ( 1 5-45mi n)i n0, Fl ow r at e:1mg / ′ mi n Det e ct i on:ODat2 25nm 抗酸化機能としてDPPHラジカル消去活性を測自体租精製品であることから,その抗酸レバー Hi 定した結果,濃度依存的に阻害活性が上昇し, レを生化機能は高いと考えられる｡このレバー Hi バー Hi のI C5 ｡値は1 5 7 F L g/ ml を示した ( Fi g.5 ･ A) ｡体内の消化酵素で分解した結果,ペプシン消化物既知の抗酸化物質である還元型グルタチオンののI C5 0 値は2 2 7 , トリプシン消化物は259, α-キモ I C5 ° 値は1 5 F L g/ ml であり,それよりも低いものの, トリプシン消化物は1 7 0 〃g/ mJ であり,いずれの 254 平成 1 4年度食肉に関する助成研究調査成果報告書 Vo l . 21 2 03. 1 2 財団法人伊藤記念財団 Li ver ･ Hi Pepsl n Tr ypsm αChymot r ypsl n 0 50 1 00 1 50 20 0 25 0 300 250 300 1 C5 0( 〟g/ ml ) uv er Hi Pepsl n Tr ypsm αChymot r ypsl n 0 50 1 0 0 1 5 0 200 l C5 0( 〟g/ ml ) Fi g. 5 ▲ lnt i oxd; l t l ＼でaCt i ＼ ' i t さ ,O fl i ＼ ' er Hiandt hei rhydr ol ys at e s . 1:▲ 1ct i ヽ i t yi nDPPHr adi c als e I i Vengl ngS ys t em 1L . t i t , i t ヽ -i n恒dr ox) , 1r a di c L , l ls ca vengi ngS ys t em r 3:▲ 消化物もレバー Hi 自体よりも活性が若干低下し 235i l g, mlであり,DPPH消去活性を測定したときたこと同様に活性が低下した｡しかし, これらの消化 (2) 安息香酸ヒドロキシル化法によるラジカ物の活性は還元型グルタチオンよりも高かった｡以上の結果より,レバー Hi は比較的高い抗酸化ル消去活性安息香酸ヒドロキシル化法を用いて,試料の機能を有することが明らかになった｡それらの全 OHラジカル消去能を測定した｡DPPHラジカル活性は生体内の酵素処理により若干低卜するもの消去能と同様に濃度依存的に阻害活性が上昇し, の依然として比較的高い抗酸化機能を保持してお I CJ直が 135FLg′mlであった (Fig.5B) ニその結果 . り,生体で機能する可能性が示唆された｡既知の抗酸化物質である還元型グルタチオンの I C, . 個は358pg, , ml となり.レバー Hi と比較すると 4. 要約その活性はレバー Hi の方が高くなっていること今回,生理活性機能として肝臓加水分解物中にをが明らかになった｡また,消化酵素でレバー Hi 存在が期待される血圧上昇を抑制するACE阻害 ‖ 値は253, ト消化した結果 ,ペプシン消化物のIC､活性と多くの疾病に関与しているラジカルに対す 40, α-キモトリプシンはリプシン消化物は 1 る消去活性を測定した｡ 2 5 5 肝臓酵素分解物の新規/ I : . f 町田′ 壬 : _ 機能の検索その結果 , レバー Hi の ACE阻書活性は他の ACE阻害ペプチドの親指製品よりも比較的高い活性を有していることが明らかになった一､また, さらにレバー Hi をエタノール分画した結果, レバー Hi r 日の ACE阻害活性は低分子量域に存在す高い活性が発揮されることも認るペプチドによを ) められた､ノ今後 , それらの高い活性を有するペプチドの単離･精製を進めて, レバー I i i 中の ÅCE阻害ペプチドの構造解析を行う必要がある - 有無について検討する目的で , DPPH分光測定法と安息香酸ヒドロキシル化法による分析を行ったその結果 ,レバー Hi 標品は抗酸化清作を有していることも明らかになったこレバー Hi は高い肝機能改善効果を有することから. それらの機能性成分の検索をさらに追及する予定であるこいずれにしても,レバー Hi は酵素分解された低分子ペプチドからなるために,消化性および吸収性に優れ , 高齢者や乳幼児のための健康食品として, あるいは病人のみならず健常人やスポーツ選手の体力増強食品素材として高度で幅広い利用が期待できる｡文献 l) 小泉 f f ; ･夫 ,末松俊彦 :臨床と研究 ,4 9. 2 61 262 ( 1 6 89) 2) 平山 T . 坐:診断と治癖.69.( ∼ ( うー 6 8 日9 81 ) 31 本田和久 :食品の包装 . 2 6. 4 6 5 0( 1 9 95) l 川券也. 横山踊. 高橋久雄.許斐 1) 奥山啓 ∴ 丸 L 健二:新薬と臨恥し 1 6.1 5L ) 1 6 0( 1 9 97) . )) 鈴木建夫, 石川目黒照 :日本農芸化学会 f 二. 5 7.111 3 1 1 ′ 1 6 日983) ‖ 小 lgr i c . ( i) ＼I z l r L l yと I m2 1 .S. .lI i yos hi .S.こ l ndTと 1 1 1 こ I kこしH :. Bi o1 . .L l hem ‥5 3. 27 ( う 327 97 1( 1 989) 7) 1 ' ( ) k( ) I と I mと 1 .K‥Chi bと 1 .I I .こ 1 1 1 d Y( ) s hi k; l W( , 1 .M.: t う i ( ) s c i .Bi ot ech. Bi ochem. . 5 6.1 51 1 1 5 45 日9 ( ) 1 ) ) バ) Wa ko.Y.Abe,1 一 . .Handa.T.こ l ndl dl i kaWこ 1 .S.: F( ) odSL l i .Tech1 1 01 .Res . . 5, 37 83 8( )( 1 ∼ ) チ ) ∼ ) ) リー松什利郎 .J l l 崎妃 -日本栄養･食糧学会誌.5 3. 7 7 85 ( 2 0O O) 1 ( ) - 未納邦夫 :日本水庫J ? I : 会誌.( i 1 . 8628( i ( ∼r 1 9 ∼ ) A) ‖) , 十巨 : . 治リ上上島良介 ,河掠 J T . t J:伊藤記念財川平成 11年度食肉に関する助成研究調査用告守; .1 8, 33 831 5( 2 O( ) 0) 十巨二治り上目: . 吉良介 , 河垢聡 :伊藤記念呈肌･ J l l l ) , l ′ 半成 1 2年度食肉に関する助成研究調査用告. l 7 . .1 〔 ) . 2 6226 9( i ) 0 ( ) 1) 宣[ ･ . Kat 之 l yamと 1 .K‥FL l ChL l JI . .Sと l k; l t と 1 .: L Kこ 1 Wこ l hと I r こ 1 ,S. . 1 ' amaL 1 Chi .ド. .KawamL l r と 1 .Y.andl工 ugL I r uma ＼Ⅰ .: . J .: lni m.S° i . ,1 6. 41 7 42 4( 2 0O3) : ls l an: lust 1 4) K< 1 t ayama.K. .Tomat s u.ll . .FL 1 Chu.I I . .SL l gl ) , 之 I ma , 11 . ,I (awahar a S. .Y; l mauChi .K. .Kawan l ur ･ a .Y.and 13) 11 ∴▲ 1ni m. Sci . J . . 7 4. 5 358 ( i ) 0( ) 3) ll ugur uma . 1 5) CL l S human.D. W .:Bi ochemi c z l lPhar mac ol og) , .2 0. 1 637 1 647 ( 1 996) 1 6)須【廿邦丸分光学的抗酸化機能評価.篠原和毅.鈴木建夫. 卜野川修一編著.1 ) 1 82 2t ' i .尤林.束諒, A ( 2 0 01) Bi ot ec h,Bi oehem. , 61 ,11 81 2 3( 1 f ) 97 ' )