― 80 ― 石川保環研報〔抄　録〕ヒトふん便からのノロウイルス検出法に関する検討石川県保健環境センター健康・食品安全科学部倉本　早苗・児玉　洋江大矢　英紀・尾西　一キーワード：ノロウイルス，RT-PCR法，LAMP法，NASBA法日本食品微生物学会雑誌，27（２），86-89，2010 石川県における迅速かつ効率的なノロウイルス検査体結果の不一致がみられた検体についてreal-time PCR 制の構築を目的に，通知法であるRT-PCR法と，LAMP 法により特異遺伝子の検出・定量を実施した結果，法およびNASBA法との比較検討を行い，これら２法の real-time PCR法で陰性となった１検体ならびに定量値有用性について調べた。が僅少（約 10４コピー/g ）であった３検体以外は，いず 2004～2007 年度に石川県で発生した食中毒 15 事例由れの方法でも検出可能なウイルス量があったと推定され来ふん便 100 検体，および集団または散発下痢症 17 事例た。また，同一事例（同一遺伝子型）の中でも検出法に由来のふん便 34 検体，計 134 検体を用いて，RT-PCR法，より結果が異なる場合があり，これら結果の不一致の一 LAMP法およびNASBA法によるノロウイルス特異遺伝因として，個々のふん便中の各検査法に対する反応阻害子の検出を行い，その結果を比較検討した。物質等の存在が示唆された。供試した 134 検体の３種類の検査法によるノロウイ今回検討した検査法（ LAMP法，NASBA法）はいずルス特異遺伝子の検出結果は，RT-PCR法では 118 検れも，感度・特異度ともに高く，また迅速性・簡便性は体（ 88. 1 ％）が，LAMP法では 113 検体（ 84. 3 ％）が，通知法より優れていることから，ノロウイルスの検索に NASBA法では 100 検体（ 74. 6％）がそれぞれ陽性であっ非常に有用であると思われる。しかし，いずれの方法にた。おいても反応産物がシークエンス解析に応用できないな RT-PCR法と他２法の検査結果についてカイ二乗検どの課題もあることから，より迅速な検査結果を必要と定を行った結果，RT-PCR法とLAMP法については有する場合にはLAMP法やNASBA法を用い，従事者ふん意水準５％で有意差を認めなかったが，RT-PCR法と便や食品などウイルス量が僅少であることが推定される NASBA法については有意差（ p<0. 05 ）を認めた。なお，検体や，シークエンス解析が必要な場合などに通知法を RT-PCR法でノロウイルスGⅠ型が検出された３事例の用いるのが，効率的な検査体制であると考えられた。石 12 検体については，すべての検体でNASBA法の結果が川県では本調査結果を行政担当者に提言し，平成 21 年陰性となり，この結果をメーカーに提示した結果，後に度からLAMP法を導入している。試薬の改良がなされた。 Key words : Norovirus , Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction（ RT- PCR ） , Loop-Mediated Isothermal Amplification（ LAMP ） , Nucleic Acid Sequence-Based Amplification（ NASBA ）