Introduction Listeria Cours 3ème Pharmacie Pr Zribi Miled Meriam Historique En 1926 que Murray, Webb et Swann ont isolé pour la première fois cette bactérie ubiquitaire chez des lapins atteints de mononucléose 1911: fut baptisée Bacillus hépatitis par Hülphers 1927: Listeria hepatolytica par Pirie • Listeria monocytogenes est une bactérie saprophyte à Gram positif, largement répandue dans la nature • Cette bactérie responsable d'infections sporadiques sévères chez l'homme et les animaux capable de traverser le placenta et de pénétrer le système nerveux central (méningo-encéphalites) Taxonomie Genre Listeria : 6 espèces (L. monocytogenes, L.ivanovii, L.welshimeri, L. seelegeri, L.innocua et L. grayi) • espèces pathogènes pour l’homme et l’animal • espèces non pathogènes 1940 : Listeria monocytogenes après que Burn ait démontré son rôle dans une infection périnatale en 1933 Les années 80 que la bactérie Listeria monocytogenes est recherchée Seule L. monocytogenes considérée opportuniste /homme et animal pathogène Listeria monocytogenes I - Caractères bactériologiques: A - Caractères morphologiques: Petit bacille Gram +, asporulé, acapsulé Mobile à 20 - 25 ° C / ciliature péritriche immobile à 37 ° C Dans les produits pathologiques : bactéries à l’intérieur des PNN Groupement en palissades, en courtes chaînettes B – Caractères culturaux : Germes aéro-anaérobie facultatifs Cultive bien / milieux usuels mais l’adjonction de Glu favorise sa croissance De même: sang (5%) ou sérum (1%) Pousse: +3°à +45°C, Temp. optimale: 30 - 37°C Propriétés mises à profit pour isolement à partir de prélèvements plurimicrobiens (culture à +4°C) Détruit à + 60°C Après 24h d’incubation: petites colonies transparentes avec aspect bleuté / lumière oblique (MH) Sur GS: Hémolyse punctiforme ( sous la colonie) C – Caractères biochimiques : D – Caractères antigéniques : AAf mais CO2 favorise la culture Catalase +, Oxydase – Hydrolyse rapidement l’esculine : 2h VP +, uréase –, H2S –, Indole –, CAMP test + / S.aureus 17 sérotypes divisés en lysotypes Sérotype 4b responsable d’environ 50% des listérioses humaines dans le monde ( mise en évidence une hémolysine qui réagit en synergie avec hémolysine de S.aureus ( Christie, Atkins, Munch-Petersen)) E – Substances élaborées L.monocytogenes secrète diverses substances dont l’hémolysine qui joue un rôle important dans la virulence de la bactérie: toutes les souches pathogènes sont hémolytiques II – Pouvoir pathogène naturel : Bact. pathogène pour l’homme et de nombreuses espèces animales A – Chez l’animal Différentes manifestations cliniques : • avortement, mortinatalité • septicémies, encéphalites • conjonctivites, kératites purulentes • mammites Certaines de ces localisations favorisent la contamination humaine b – Formes septicémiques : les moins fréquentes: Signes classiques mais non spécifiques: hyperthermie, sueurs, frissons, AEG avec ou sans localisations secondaires B – Chez l’Homme 1 – Infection de l’adulte Concerne en général ( mais pas de façon exclusive) les patients ayant une déficience des défenses immunitaires, notamment de l’immunité cellulaire : femme enceinte, nouveau-né, personnes âgées, hémopathies malignes, cancers, traitements immunosuppressseurs,… a – Formes neuroméningées : les plus fréquentes c – Formes localisées : rares Oculaires , cutanées / personnes en contact avec animaux infectés Méningites, méningo-encéphalite, encéphalites Mortalité importante: 30 – 50% des cas Quand guérison séquelles neurologiques 2 – Listériose materno-fœtale : b – Listériose néonatale : Atteint la femme enceinte quelque soit l’âge de la grossesse 2 grandes formes a –Chez la femme enceinte : • Forme précoce : premières heures de vie 5 j Septicémie avec atteinte listérienne généralisée = Infection en général inaperçue: pseudogrippe, diarrhée fébrile ou RAS Granulomatosis infantiseptica : syndrome très grave Si atteinte en début de grossesse Si atteinte plus tardive avortement accouchement prématuré mortalité +++ ( septicémie, HMG, SMG,ictère éruptions, fièvre, granulomes multiples avec ou sans atteinte méningée Cette forme traduit l’atteinte pendant la grossesse • Forme tardive : à 10j environ Forme neuro-méningée, traduisant contamination à l’accouchement une • Formes asymptomatiques: Découverte fortuite systématique / NN au décours d’un bilan III – Physiopahologie : L.monocytogenes intracellulaire = bactérie à multiplication Sa virulence est liée : • multiplication à l’intérieur des macrophages • production d’une hémolysine = toxine protéique extracellulaire listériolysine ( Cette hémolysine se lie au cholestérol responsable: - in vitro : activité toxique sur diverses cellules eucaryotes - in vivo : lésion sur système réticulo-endothélial et effet létal sur animaux de labo) • Pénétration le plus souvent par voie digestive • Colonisation des entérocytes, puis envahissement en provoquant sa propre phagocytose • Multiplication / entérocytes • Passage dans les ganglions mésentèriques ou destruction partielle par les macrophages • Les bactéries ayant échappé envahissent les parenchymes avoisinants IV – Epidémiologie : Bact saprophyte ubiquitaire Très répandue dans la nature : sol, eau végétaux mais aussi aliments : lait, viande et matières fécales des individus sains un portage digestif (1-10% de la population) avec un portage intermittent touchant jusqu'à 70% de la population Bact très résistante aux conditions hostiles (multiplication à basse température, résistance aux agents physico-chimiques et à la dessication) La contamination de l’homme se fait - par voie indirecte : digestive +++: ingestion d’eau, d’aliments contaminés ( lait, viande, volaille, charcuterie, crudités) - par voie directe (oculaire ou cutanée) : contact avec les animaux / professionnels exposés : éleveurs ou vétérinaires Les infections humaines sont sporadiques mais parfois des épidémies sont décrites ( à la suite de consommation de lait ou de fromages – l’affinage permettant la multiplication bactérienne) V – Diagnostic biologique Chez l’homme la répartition / âge : 3 pics • < 1 an : listérioses NN A – Diagnostic direct : C’est le meilleur diagnostic • 20 – 40 ans : cas maternels • 60 – 80 ans : personnes âgées Sévit surtout en saison froide 1 – Prélèvements: NN : liq gastrique, sang , LCR Mère : placenta, lochies, liquide amniotique, PV Adultes: Sang, LCR, pvts cutanés Aliments ( Bactériologie alimentaire ) Les prélèvements peuvent être conservés à +4°C 2 – Examen direct : 3 – Culture : BG + GS, MH,milieu au tellurite de K+, Milieux sélectifs pour aliments Dans LCR : bactéries peu abondantes intra ou extra cellulaires ( LCR louche, formule panachée Enrichissement par le froid (CC, thioglycolate, eau peptonée à + 4°C) 4 – Biochimie : Catalase +, mobilité à + 20°C ( immobilité / 37°C), hydrolyse de l’esculine rapide, CAMP test positif Galeries miniaturisées : • Esculine positive rapide Mobiles à 20C Immobiles à 37C Camp test positif 4 – Typage Sérotypage, lysotypage PCR, Hybridation avec sonde (Actuellement caractérisation par électrophorèse en champ pulsé pulsotypes) 5 – Pouvoir pathogène expérimental: • L. monocytogenes est pathogène pour la souris par voie IP • Test d’ANTON positif: Mise en évidence du caractère invasif des souches pathogènes: Introduction dans le sac conjonctival de l’œil de lapin ou de cobaye 2 à 3 gouttes de suspension bactérienne Conjonctivite purulente en 2 à 5 j ( qui guérit par l’administration locale d’ampicilline) VI – Traitement B – Diagnostic indirect : Surtout rétrospectif Titrage des Ac / agglutination, fixation du complément 2 sérums à 15 j d’intervalle A - Curatif Bétalactamines : Ampicilline Sont actifs aussi : aminosides /gentamicine tétracycline, érythromycine,chloramphénicol Céphalosporines et fluoroquinolones : inefficaces Ampicilline + gentamicine = meilleur TTT B – Préventif : Recommandé / femmes enceintes et ID: Éviter l’ingestion d’aliments crus, lait cru ou mal pasteurisé, fromage frais Surveillance de la qualité des denrées alimentaires (chaîne de froid, hygiène)
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