アミノプロピル型カラムとしては比類なき水耐久性

TR02A
技術資料
時代は5μmから3μmへ ・・・ ユニゾンシリーズ
アミノプロピル型 順相カラム
優れた水通液耐久性
非水系から水系まで広範囲な順相分離に適応
3μm粒子による高分解能
LC-MS 対応
高純度全多孔性球状シリカ / 3 um 粒子 / アミノプロピル型固定相
アミノプロピル型カラムとしては比類なき水耐久性
2
1. fructose
(2.5mg/mL)
1
2. glucose
120
100
4
(3.75mg/mL)
sucrose
3
3. sucrose
80
(2.5mg/mL)
Unison UK-Amino, 250 x 2 mm
4. maltose
(3.75mg/mL)
500 hr
60
water, 0.1mL/min, ambient
40
400 hr
220 hr
150 hr
Initial
0
5
10 min
20
0
0
Conventional Aminopropyl Column
100
200 300
hours
400
500
Analytical Conditions
Unison UK-Amino, 250 x 2 mm
acetonitrile /water = 75 /25
0.2mL/min (8MPa)
37 deg.C, 4uL, ELSD
304
シリカ系アミノプロピル型カラムは,糖質分離に欠くことのできない順相カラムです。しかし従来のアミ
ノプロピル型カラムには,水を通液するとリガンドが加水分解し,急激な保持の低下とカラムブリード
が生じる,という致命的な欠点がありました。
新開発のUnison UK-Amino 固定相は,アミノプロピル型でありながら水通液耐久性に優れる,
画期的な設計がなされています。分析の堅牢性だけでなく,3μm粒子による高分解能,さらには
LC-MSや LC-ELSD における極少のノイズレベルなど,多くの特長があります。また糖類以外のさま
ざまな化合物の非水系-水系順相分離にも対応する,高い汎用性があります。
TR02A-GG06
順相モードとアニオン交換モード
一般にアミノプロピル型固定相上では,アミノ基に由来する順相分離モードとアニオン交換モードの両モード
がはたらきます。したがって,Unison UK-Aminoカラムでアスコルビン酸とその異性体であるイソアスコルビン酸
(エリソルビン酸)を分離するには以下のような二つの方法があります。
316
1
1
2
H
OH
HOCH2
2
C
O
O
HO
1
2
1
HOCH2
2
L-ascorbic acid
(Vitamin C)
2
O
O
順相モードでは,移動相の極性
が高くなるほど保持が短くなります。
したがってアセトニトリル濃度が
高くなるにつれて保持が大きくな
り,75%アセトニトリルにおいて二
つの化合物が完全分離します。
また相互作用の違いから,アニオ
ン交換モードとは溶出順番が逆
転します。
OH
isoascorbic acid
(erythorbic acid)
Unison UK-Amino, 250 x 2 mm
0.2 mL/min (9-14 MPa)
37 deg.C, 260nm
2.5mg/mL, 2uL
1
12
normal phase
C
HO
OH
順相 (+アニオン交換) モード
(上から4つのクロマトグラム)
OH
H
75% ACN
3% AcOH
50% ACN
3% AcOH
20% ACN
3% AcOH
0% ACN
3% AcOH
0% ACN
1% AcOH
0% ACN
0.5% AcOH
アニオン交換モード
(下から3つのクロマトグラム)
アニオン交換モードでは,イオン
強度が大きくなるほど,またイオ
ン的相互作用が弱くなるpH (こ
の 場 合 高 酸 濃 度 = 低 p H ) ほ ど,
保持が短くなります。本例では
0.5%酢酸水溶液のみで,二つの
化合物が完全分離します。
1 2
anion exchange
0
10
20 min
糖質の順相分離
Unison UK-Aminoは一般のアミノプロピル型カラム同様,糖質の分離に好適です。しかも粒子径3μmによるシャー
プなピーク形状と優れたカラムライフが特長です。
単糖類
糖アルコール
Monosaccharides
Sugar Alcohols
305
2
1
O
HO
CH3
3
CH2OH
2
O
OH
2
1
OH
H
3
3
HO
4
H
3
CH2OH
D-sorbitol
OH
OH
5
10 min
OH
HO
4
OH
HO
OH
myo-inositol
OH
HO
0
OH
CH2OH
mannose
5
OH
H
HO
CH2OH
O
OH
H
H
fructose
CH2OH
O
OH HO
OH
HO
OH
4
CH2OH
CH2OH
5
OH
O
OH
xylitol
xylose
HOH2C
H
H
OH
5
OH
HO
HO
1
OH
meso-erythritol
OH
rhamnose
2
HO
OH
OH
OH
4
OH
1
308
0
OH
glucose
5
10
Unison UK-Amino, 250 x 2 mm
acetonitrile /water = 80 /20, 0.2 mL/min
37 deg.C, ELSD
Unison UK-Amino, 250 x 2 mm
acetonitrile /water = 80 /20, 0.2 mL/min, 37 deg.C, ELSD
2
CH2OH
OH
OH
CH2OH
O
OH
15
min
HO
OH
5
O
maltitol
OH
OH
糖質の順相分離
ソルビトールとマンニトール
Sorbitol and Mannitol
313
1 2
Unison UK-Amino, 250 x 2 mm
0.2 mL/min (5MPa), 0.5 uL (2.5ug)
糖アルコールは,分析温度を高めに
設定することにより,シャープなピーク
形状が得られます。
1
CH2OH
H
OH
HO
H
H
OH
H
OH
CH2OH
1 2
D-sorbitol
Unison UK-Amino, 250 x 4.6 mm
1 mL/min (6MPa), 1.5 uL (7.5ug)
2
CH2OH
HO
H
HO
H
H
OH
H
OH
CH2OH
D-mannitol
2
1
Brand-N (5um), 250 x 4.6mm
1 mL/min (4MPa), 1.5 uL (7.5ug)
0
10
acetonitrile / water = 90 / 10
50 deg.C, ELSD
20 min
アラビノース,ガラクトース,マルチト-ル
カフェオレ中のショ糖と乳糖
Arabinose, Galactose, Maltitol
320
Sucrose and Lactose in Cafe au Lait
321
3
1
1
2
2
0
5
10 min
0
O
HO
HO
OH
D-arabinose
2
OH
CH2OH
HO
O
OH
1
3
OH
OH
D-galactose
CH2OH
OH
OH
CH2OH
O
OH
HO
OH
10 min
Unison UK-Amino, 250 x 4.6 mm
acetonitrile /water = 75 /25, 1 mL/min, 37 deg.C, ELSD
Unison UK-Amino, 250 x 4.6 mm
acetonitrile /water = 75 /25, 1 mL/min, 37 deg.C, ELSD
1
5
O
CH2OH
O
OH
OH
HO
OH
OH
maltitol
2
CH2OH
O
HO
O
sucrose
3
OH
CH2OH
HO
CH2OH
O O
OH
OH
CH2OH
O
OH
OH
lactose
OH
糖質の順相分離
還元糖とそのアルコール体
Reducing Sugar and its Reduced Alcohl
315
1
1
2
CH2OH
H
HO
H
H
OH
H
OH
3
CH2OH
O
OH
OH
4
CH2OH
OH
OH
CH2OH
O
OH
OH
HO
HO
OH
O
OH
OH
CH2OH
O
CH 2OH
O
OH
OH
HO
OH
OH
O
OH
OH
CH2OH
D-sorbitol
D-glucose
maltitol
maltose
Unison UK-Amino, 250 x 4.6 mm,
acetonitrile / water = 83 / 17, 1.0 mL/min, 50 deg.C, ELSD
2
3
シクロデキストリン
Cyclodextrins
310
4
0
5
10
15 min
Unison UK-Amino, 250 x 2 mm
acetonitrile / water = 70 / 30
0.2 mL/min, 37 deg.C, ELSD
0
ラミナリオリゴ糖
5
10
15 min
Laminariorigosaccharides
306
Unison UK-Aminoはオリゴ糖など,比較的分子量の大きな化合
物に対しても優れた分離性能があります。
1
CH2OH
O
OH
1
OH
HO
OH
glucose
2
3
6
4
CH2OH
O
7
OH
CH2OH
O
HO
HO
5
O
OH
O
CH2OH
O
OH
HO
OH
n
OH
2. laminaribiose (n=0)
3. laminaritriose (n=1)
4. laminaritetraose (n=2)
5. laminaripentaose (n=3)
6. laminarihexaose (n=4)
7. laminariheptaose (n=5)
0
5
10
Unison UK-Amino, 250 x 2 mm
A: acetonitrile, B: water, 25-40 %B (0-15min)
0.2 mL/min, 37 deg.C, ELSD
15 min
4
水系順相分離
Unison UK-Aminoは,糖質以外の化合物に対しても水系順相分離ができます。
静電的相互作用とアニオン交換モードの組み合わせによりさまざまな化合物に適用できます。その際に,有
機溶媒の種類と濃度,揮発性のpH調整剤およびイオン強度の最適化により,LC-UV/VISだけでなくLCELSDやLC-MSへの展開が期待されます。
分岐鎖アミノ酸 (BCAA)
Branched-Chain Amino Acids
311
両電解質であるアミノ酸の分離には,中性の酢酸アンモニウムでpHとイオン
強度をコントロールすることにより,シャープなピーク形状が得られます。
1
2
1
H O
H2N
H3C
CH
CH2
C
C
3
OH
H3C
3
L-leucine
H O
H2N
H3C
CH2
C
C
OH
H3C
L-valine
2
H O
H2N
H3C
CH2
CH
C
C
OH
CH3
L-isoleucine
0
10 min
5
Unison UK-Amino, 150 x 2 mm
acetonitrile /10mM ammonium acetate = 85 /15
0.2 mL/min, 37 deg.C, ELSD
アスコルビン酸(Vitamin C)とエリソルビン酸
Ascorbic Acid and Erythorbic Acid
アスコルビン酸とその異性体であるエリソルビン酸については,順相モードでもイオン交換モードでも分離が可能です。Unison
UK-Aminoは,マイルドなpH調整剤である酢酸も使用できます。さらに,分離モードの違いにより溶出順序が逆転することから,
分析目的に応じた分離モードが選択できます。
317
2 1
normal phase
Unison UK-Amino, 150 x 2 mm
acetonitrile /water /acetic acid = 80 /20 /2
0.2mL/min (5MPa),
37deg.C, 260nm,
1uL(1.3ug)
H
OH
HOCH2
C
HO
anion exchange
5
OH
(Vitamin C)
HOCH2
OH
C
HO
Unison UK-Amino, 250 x 2 mm
water / acetic acid = 100 / 0.5
0.2mL/min (14MPa),
37deg.C, 260nm,
0.2uL(0.5ug)
O
1 L-ascorbic acid
H
12
O
O
O
OH
2 isoascorbic acid
(erythorbic acid)
水系順相分離(水溶性ビタミン)
水溶性ビタミン
Water-Soluble Vitamins
水溶性ビタミンも酢酸を用いることでシンプルな分析系が確立
できます。逆相系によるイオン対モードは必要ありません。さらに
グラジエント溶出により,広範囲のビタミンに対する高速分析が
可能になります。
2
309
1
C
1
NH2
N
nicotinamide
4
NH2
3
CH2
N
2
5
20 min
3
Unison UK-Amino, 100 x 4.6 mm
ACN / water / acetic acid = 90 / 10 / 5
1mL/min, 37 deg.C, 260 nm
OH
OH
OH
CHCH2OH
CH2CH
CH
H3C
N
O
H3C
N
riboflavin
N
NH
O
C
4
6
OH
N
nicotinic acid
NH2COCH2CH2 CH3 CH3
CH2CONH2
NH2COCH2
CH2CH2CONH2
H3C
N CN N
H3C
Co+
2
5
N
NH2COCH2
H3C
N
CH3
CH3
HO
O-
CH2CH2CONHCH2 C O P O
3
cyanocobalamin
7
4
H3C
H
6
HOCH2
L-ascorbic acid
5
H
O
CH3
CH3
H
H
O
H
CH2OH
OH
C
O
5
N
N
CH3 CH2CH2CONH2
H
1
0
CH2CH2OH
S
HO
O
10
N
thiamine
6
0
H3C
CH3
N+
OH
10 min
H 2N
Unison UK-Amin, 100 x 4.6 mm
A: ACN / acetic acid = 100 / 5
B: water / acetic acid = 100 / 5
2-70 %B (0-10min)
1mL/min, 37 deg.C, 260 nm
7
N
N
N
OH
folic acid
6
N
CH2NH
O
O
C
HNCH C
CH2CH2
OH
C OH
O
非水系順相分離
Unison UK-Aminoは高極性固定相であり,シリカカラムと同様に非水系の順相分離も可能です。
ただし固定相側に解離基(アミノ基)と結合水があるため,酢酸などのpH調整剤を添加することで,再現性の
高い分析が可能になります。
トコフェロール
ステロイド
Tocopherols
Steroids
307
319
11
2
1
8
1
2
34
9
5
10
3
4
7
6
12
0
10 min
5
0
Unison UK-Amino, 250 x 4.6 mm
hexane / ethyl acetate / acetic acid = 80 / 20 / 0.1
1 mL/min, 37 deg.C, 295 nm
10
20
Unison UK-Amino, 250 x 4.6 mm
A: hexane /acetic acid = 100 /0.1
B: ethanol /acetic acid = 100 /1
10-30%B (0-30 min), 1 mL/min, 37 deg.C, 260 nm
CH3
HO
1
O
CH3
CH3
1
CH3
H3C
30 min
CH2CH2CH2CH
CH3
CH2OCCH3
2
C O
O
3
C O
CH3
3
O
HO
O
progesterone
estrone
deoxycorticosterone
acetate
CH3
HO
CH3
CH2OH
OH
CH3
2
CH2CH2CH2CH
CH3
CH3
4
5
O
corticosterone
CH2OH
CH3
H3C
CH3
7
CH2CH2CH2CH
CH3
O
CH3
C O
OH
O
CH3
CH3
CH2CH2CH2CH
CH3
C O
OH
CH2OH
9
HO
O
cortisone
HO
CH2OH
8
ethynylestradiol
C O
OH
3
O
4
C CH
HO
estradiol
HO
OH
6
HO
3
HO
3
C O
CH3
CH2OH
10
HO
O
6alphamethylprednisolone
prednisone
C O
OH
CH2OH
11
HO
C O
OH
12
OH
OH
3
O
HO
O
hydrocortisone
7
prednisolone
estriol
優れた充てん剤バッチ間再現性
Unison UK-Amino は 順相+アニオン交換モードについて良好なバッチ間再現性を示します。
1
318
1
2
COOCH2CH2CH3
propylbenzoate
5
O
CH3
HN
4
O
2 HOCH2
3
N
thymidine
pKa = 9.8
O
HO
3
4
benzoic acid
pKa = 4.2
COOH
H
N
HO
NH2
C
O
3-hydroxyphenylurea
O
UKAGC07D
HN
5
O
HOCH2
一般にアミノプロピル型固定相
は順相モードだけでなく,アニオ
ン 交換 モ ード も 有し て いる た め,
相互作用が複雑になり,溶質の
保持や分離の再現性が得にくい
難点があります。この点Unison
UK-Aminoは,従来とはまったく
異なる固定相設計により高い再
現性を獲得しています。
N
uridine
pKa = 9.2
O
HO
OH
高極性の中性化合物だけでなく,
塩基性,酸性化合物など,溶質固定相間にはたらくイオン的相
互作用や静電的相互作用は,充
てん剤バッチ間で良好な再現性
を示しています。
UKAGD16E
UKAGD17E
0
5
Unison UK-Amino, 150 x 2 mm
acetonitrile /water /acetic acid =
95 /5 /1
0.2 mL/min (3.5MPa)
37 deg.C, 270nm
10 min
オーダリングインフォメーション
粒子径:3μm, 固定相:アミノプロピル基
長さ
(mm)
10
20
30
50
75
100
150
250
500
3μm
製品コード / 税抜価格(円)
内径 1 mm
UKA11 / 42,000
UKA12 / 45,000
UKA13 / 48,000
UKA14 / 53,000
UKA15 / 58,000
UKA16 / 75,000
-
内径 2 mm
UKA20 / 45,000
UKA29 / 45,000
UKA21 / 38,000
UKA22 / 42,000
UKA23 / 45,000
UKA24 / 48,000
UKA25 / 53,000
UKA26 / 68,000
-
ガードカートリッジ UK-Amino
分離カラム内径
製品コード
1 mm 用
2 - 6 mm 用
10 mm 用
GCUKAC
GCUKAS
GCUKAM
インタクト株式会社
内径 3 mm
UKA30 / 45,000
UKA39 / 45,000
UKA31 / 38,000
UKA32 / 42,000
UKA33 / 45,000
UKA34 / 48,000
UKA35 / 53,000
UKA36 / 68,000
-
内径 4.6 mm
UKA00 / 45,000
UKA09 / 45,000
UKA01 / 38,000
UKA02 / 42,000
UKA03 / 45,000
UKA04 / 48,000
UKA05 / 53,000
UKA06 / 68,000
UKA07/110,000
初めてガードカートリッジをお使いの時は
ガードホルダーを別途ご購入ください。
税抜価格(円)
23,000
17,000
23,000
備考
5 x 1 mm, 3個入
5 x 2 mm, 3個入
10 x 8 mm, 2個入
ホームページにおいでください。
最新情報があります。
内径 6 mm
内径 10 mm
UKA61 / 42,000
UKA62 / 45,000
UKA63 / 48,000
UKA64 / 53,000
UKA65 / 58,000
UKA66 / 75,000
-
UKAP1 / 68,000
UKAP2 / 80,000
UKAP3 / 95,000
UKAP4 /120,000
UKAP5 /150,000
UKAP6 /180,000
-
ガードホルダー
(カラムカプラー付属)
分離カラム内径
製品コード
1 - 6 mm 用
GCH01S
26,000
GCH02M
35,000
10 mm 用
税抜価格(円)