Agilent Bio-Monolith Protein A、Protein G アフィニティカラム mAb の定量と幅広い選択性 AGILENT BIO-MONOLITH PROTEIN A、PROTEIN G アフィニティカラム mAb 抗体価の迅速かつ正確な測定 詳細な解析のために少量の生産物候補を精製し、モノクローナル抗体 (mAb) の抗体価を測定することは、 経済的な生産プロセスを開発するために不可欠です。 Agilent Bio-Monolith Protein A、Protein G カラムは、メソッド開発、メソッドの最適化、製品製造のどの条件下で も、常にきわめて高い性能を発揮します。これらのカラムはプロセス開発中の抗体価の測定、細胞クロー ンの選択、発酵条件の最適化、生産時の最適な採取時間の決定に最適です。これにより、正しい細胞株の 選択と採取時間の識別を確実なものにして、プロセスの生産量と経済性を向上させることができます。 • 高速の分離によりメソッド開発時間の短縮とコストの 削減が可能になり、生成物が得られる範囲が広がります。 • 高い結合能力により関連する濃度範囲にわたって抗体 • 長いカラム寿命、クルードなサンプルを使用する場合でも 価を決定し、さらなる特性解析のための精製を可能に 目詰まりが最小限に抑えられるため、カラムのクリーニングや します。 交換の頻度が少なくてすみます。 広い濃度範囲 2000 8000 250 7000 0.2 mg/mL 200 0.1 mg/mL 50 0.05 mg/mL 0.02 mg/mL 0 1.2 1.4 1.6 R 2 = 0.9999 6000 150 100 Agilent Bio-Monolith Protein A、 Protein G カラムは、再現性の 9000 300 面積 2500 最適化された形状 0.5 mg/mL mAU mAU 高いアフィニティクロマト 5000 4000 グラフィーに必要となる 3000 1.8 2 2.2 2.4 min 1500 2000 高い容量と性能を提供します。 1000 0 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 濃度 (mg/mL) 1.4 1.6 1.8 2 1000 2 mg/mL 1mg/mL 0.5 mg/mL 0.2 mg/mL 0.1 mg/mL 0.05 mg/mL 0.02 mg/mL 500 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 分 図 1. Agilent Bio-Monolith Protein A カラムを使用した、CHO 細胞に見られ る代表的な mAb 抗体価範囲での IgG1 定量の直線性 2 • 新しい Bio-Monolith Protein G カラムを使用すれば、 IgG サブクラスについて幅広い選択性を提供します。 AGILENT BIO-MONOLITH PROTEIN A、PROTEIN G アフィニティカラム 大容量による信頼性の高い真度 実証された特異性 mAU 1000 ベースラインの拡大 0.25 0.5 0.75 1 1.25 1.5 1.75 2 2.25 分解物のタンパク質 200 0 min 0 0.25 0.5 0.75 1 1.25 1.5 1.75 2 分 2.25 0.113 吸光度 (UV 280 mm) 600 mAU 250 200 洗浄 150 100 溶出 800 80 600 60 400 40 0 IgG1 フロースルー (8 µm) 100 200 再平衡化 50 0 120 ピーク 1 ピーク 2 0 0.5 1 分解物のタンパク質に IgG1 が含まれる 0 0.25 0.5 0.75 1 1.25 1.5 1.75 2 分 2.25 リテンションタイム (分) 説明: 1.5 % グラジエント 1000 B 1200 mAU 80 60 40 20 0 1400 相対吸光度 (mAU) A 20 2 2.5 3 0 時間 (分) レーン 1: 分離前の全血清 図 2. Agilent Bio-Monolith Protein A カラムを使用して細胞培地の レーン 2: IgG 標準 上清から IgG1 をすばやく特定して取り込みました。(A) Escherischia coli 細胞分解物上清 (2 µg の IgG1 と 38 µg の細胞分解物タンパク質の 合計約 40 µg) をカラムにロードしました。 レーン 3: ピーク 1 (フロースルー分画) レーン 4: ピーク 2 (タンパク質 A 結合分画、IgG1 および IgG2 など) 図 4. Bio-Monolith Protein A カラムを使用してヒト血漿中の 長いカラム寿命 ヒトポリクローナル IgG を迅速に定量化しました。IgG は結合され 100 % バッファ B のステップグラジエントを適用したところ、IgG は 1900 1.5 分に溶出しました。 1700 ピーク面積 1500 1300 1100 900 700 500 300 100 0 100 200 300 400 500 注入回数 600 700 800 900 1000 図 3. Agilent Bio-Monolith Protein G カラムの寿命が、1000 サイクル以上に わたる IgG3 の結合と溶出で示されています。ピーク面積の再現性は IgG3 抗体価の正確な定量化を可能にします。 3 分離の課題を解決する 高性能な Agilent ソリューション 製品情報 Agilent Bio-Monolith Protein A、Protein G カラム 価格 (税別) 品名 部品番号 Bio-Monolith Protein A、4.95 x 5.2 mm 5069-3639 171,000 Bio-Monolith Protein G、4.95 x 5.2 mm 5190-6900 162,000 限りなく優れた技術 – Agilent 1200 Infinity シリーズ LC ルーチン分析用の LC システムから、高度な高分離能 LC/MS シス テムまで、Agilent 1200 Infinity シリーズは究極 の 分離能と感度を 提供します。単位時間あたりの分離能力は大幅に向上し、システ ム間の容易なメソッド変換を確実に実現します。メソッドの再開発 や再バリデーションは不要です。 詳細情報 ホームページ www.agilent.com/chem/jp 高速で一貫性の高い生体分子の特性評価 – Agilent AdvanceBio カラム Agilent AdvanceBio カラムは、ペプチドやタンパク質の分離および特 性評価において一貫した高品質 の 性能を提供します。これらの 最 カストマコンタクトセンタ 先端のカラムでは、精度と生産性を高め、分析を妨げる可能性の 0120-477-111 [email protected] の保証も付いています。 ある干渉を排除します。カラムは厳密にテストされ、また、60 日間 詳しくは agilent.com/chem/jp をご覧ください。 本資料掲載の製品は、すべて研究用です。その他の目的には ご利用になれません。 本資料に記載の情報は、予告なしに変更されることがあります。 本文書掲載の機器類は薬事法に基づく登録を行っておりません。 アジレント・テクノロジー株式会社 © Agilent Technologies, Inc. 2015 Published in Japan, May 23, 2015 5991-5961JAJP
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