Kobe University Repository : Kernel

 Kobe
University Repository : Kernel
Title
麦芽アミラーゼに関する研究 (IV) : 電解還元法による大
麦チモーゲン・アミラーゼの活性化について
Author(s)
西躰, 雄二郎 / 麦林, 楢太郎
Citation
兵庫農科大學研究報告. 農芸化学編 , 4(1): 36-38
Issue date
1959-12
Resource Type
Departmental Bulletin Paper / 紀要論文
Resource Version
publisher
URL
http://www.lib.kobe-u.ac.jp/handle_kernel/81008202
Create Date: 2015-02-01
麦芽アミラ
ゼに関する研究 (
I
V
)
電解還元法による大麦チモーゲン・アミラーぞの活性化について
西鉢雄二郎・麦林楢太郎
Studies on Malt Amylase (
I
V)
Activationo
fbarleyzymogen amylasebye
l
e
c
t
r
o
l
y
t
i
c reduction method
Y
u
u
j
i
r
oNISHlT
A
IandN
a
r
a
t
a
r
oMUGIBAYASHI
吾々は先にパパイン,チオグリコール般その他による
径 6mmの枝管を用し電解槽と枝管とは封入した白金線
大麦チモーゲン・アミラーゼ(以下 Z
.A
.
) の活性化機
で電気的に接続している.電解槽の底には充分精製した
構について研究し, Z
.A.の活性化は蛋白分解作用によ
水銀を人れ,電解還元中は担持器で常に撹持する.水銀
るよりも還元作用によって行われる事を報告したがり,
上に試料混液を置きその表而を流動パラフィン又はトル
この事は
オールで覆う.陽極側は硝子管に封入した白金線を O
.1
SANDEGREN2)
,POLLOCK3) 等も同様の結論を
.
A
.の活性化は・S
s
-型よ
出している.此より吾々は Z
規定塩酸中に浸し,試料混液と酸j
液とは内径 6mmの塩
り SH 型への変化によって起るのであろうと推論し
化カリ飽和寒天橋で結合する.
はシスチンの還元に有効であった
I
I
)実験方法:試料大麦粉末 I
gを緩衝液50m!と共に
電解還元法をパパインに応用してパパインの可逆的再活
乳鉢で充分磨砕し,提持しつつ3
0分,叉はトルオールを
性化が行われる事を報告している.吾々は大麦 Z.A.の
加えて 3
0
'
Cに一夜静置する.綬街液は O.IMクエン酸ソ
活性化機構を研究するに当り此処に電解還元法の応用を
.
8
),0.2Mトリスアミノメタン
ーダ背性ソーダ (pH5
た.又一方秦氏等 4)~)
ー塩酸 (pH6
.0-7.2), ベロナールソーダー酢酸ー瑚酸ー
試みた.
燐酸ーカリ (pH8
.
6
) を用いた.上の様に充分磨砕,
実験及び考察
抽出した試料混液を内容が均一になる様に良く担持しつ
I)装置:直流電源及び電解槽の大要は F
i
g
.1 に示
0m!を電解槽の水銀上に入れ直ちに間持を始め電
つ約 2
した.直流電源、はセレン整流器を用い摺動抵抗器にて電
m!宛採
流を通じ電解電流を 5mAに調節する.各時間後 1
自
7
f
l
電流を調百円した .
EE解槽は内径 27mmX高さ 60mmで
取し,蒸溜水で 5-10倍に稀釈し静素力を測定した.又
@
門誌
e
D
.
C
.S
o
u
r
c
e
F
i
g
.1Apparatusf
o
rE
!
e
c
t
r
o
!
y
t
i
cR
e
d
u
c
t
i
o
n
3
6
X
I
I
.1
9
5
9
イ
h
づ
Z
'
ζ
"
炭
?J:編
回
向
;
17
?去
90
'
5
120
r
l
e
y Free
F
i
g
.3E
l
e
c
t
r
o
l
y
t
i
cR
e
d
u
c
t
i
o
no
f Ba
・.
Amylase
1
2
0
∞
雪卯
0
則
ot
1
5
0
1
5
0 1
8
0
m
1
n
.
,
-
1
8
0
m
i
n
.
Amylase
.pH
S
h
i
n
陥a
n
o
XC
i
t
r
a
t
e
T
r
i
s
V
e
r
o
n
a
lb
u
f
f
e
r
A
.
.
.
.
.
.
.
.
.
.
_
.
-4
- 1
9
l A......4
.~
,
.
.
.
.
.
.
..
,
_
.
.
.
.
.
.
.ー
・
.
.
・
・
・
・
・4 ・
・
・
・
・
・
z
P
h
4
何削
5
0
∞
0
1
.
.
日
.
.
.
.
一
.
.
.
.
昔
一
一
一
.
戸
.
占
世
←
.
一
…
…
.
一
一
→
.
..
.
.
・
・
・
・
.
.
ー
自
,
.
.
.
.
F
-
a
e
6
U
︽
,
6
4﹃
:
/
5
0
0
7
・
bR
AUAunu
AUAU
RdAue2
。,
~ 3000l
7
日
y
-e
h 朝刊﹄F刊品Fea---Hh
I.
.
.
.
.
同
1
53
0
6
0
9
0
120
1
5
0
1
8
0
m
i
n
.
1
5'
0
'
・
F
i
g
.2E
l
e
c
t
r
o
l
y
t
i
cR
e
d
u
c
t
i
o
no
fB
a
r
l
e
y
一 一 A my
l
a
s
e
.pH
X
A
6
0
9
0
1
2
0
1
5
0
・
1
8
伽 i
n
.
F
i
g
.4E
l
e
c
t
r
o
l
y
t
i
cR
e
d
u
c
t
i
o
no
fMalt
- -Amy1ase
.pH
C
t
r
a
t
e , T
r
i
s
V
e
r
o
n
a
1B
u
f
f
e
r
Q
90&. Totalamylasebypapaintreatment
T
r
i
sb
u
f
f
e
r
A
V
e
r
o
n
a
lb
u
f
f
e
r
目的の為には不適当と思われる.何れの場合でもパパイ
試料混液¢残部より lmlを採り電解還元 0時間のものと
ンによる T
.
A
.は電解還元によって得られた値より約 2
.残都に約 O
.5~~ ~割合にパパインを加え 2
し,更にそ r
倍大であり Z
.
A
.の活性化は何不充分の様に思われる.
-3時間静置し,此よりパパインによる全アミラーゼ
(
T
.
A
.
)を測定じた.酵素の測定法は前報1) と同様沃度
法を用い, pH は東洋涯紙試験紙にて測定した.
此の際処理時聞を長くしても又緩衝液濃度を増減しても
何れも帯素の失活を来し,電解還元法ではパパイシの
T
.
A
.イ
I
I
(に到達する
mは出来なかった. イ芯試料大麦の品
穂聞では顕著な差異は認められなかった.
M)実感結果:長野小紋大麦高原及び信濃一号につい
ての結果は Fig.2に示す様に還元の進むに従って pH
次に電解還元処理によって示された酵素力の増加は,
は上昇し,醇索力の榊加する事が認められた. トリス緩
Z.A. の活性化によるものか既に溶出された遊離アミラ
いた場合は何れも大差無
衝液及びベロナール緩衝液を丹i
ーゼ (
F
.
A
.
)が更に活性化されたものであるかを確認す
いた場合は処理後半に於ける
いが,クエン酸緩衝液を月i
る為に上と同様に試料大麦粉末をトルオールの存在のも
pHの上昇が急激で 1
5
0
分後 pHI0 以上に達しその為醇
0
'
C,一夜抽出後沼過した液について電解
とに緩衝液で 3
索は失沼ーした.又 O.lM
燐酸緩衝液. 0.1M酢酸緩衝液を
還元処理を行った.その結果は Fig.3 に示す様に 3時
)
ll
いた場合 pHの上昇は更に激しく此等の緩衝液は此の
間処理ー後も殆んど醇素力の噌加は見られなかった.又此
3
7
兵
w農 科 大 学 研 究 報 告
の際還元処理の初期に見られる酵素力の減少は此の実験
以外の場合でも屡々起ったが,此は恐らく用いた水銀の
精製が何不充分であった為と思われる. (水銀は蒸溜水
第 4巻 ) 1
i1号
得られた値の約半分であった.
3
)F
.A
.に対する電解還元の効果は認められなかっ
た.
硝酸及ひ.蒸溜水で各々
と共に数日開通気を行った後 3%
(醸造学講座,昭 3
4
.8
.3
1受理)
数回洗糠し鴻過したものを用いた〕
文 献
又愛知在来種大麦麦芽について Fig.2 の実験と同様
に行った結果は Fig.4に示す様に此の場合も電解還元
の効果は認められなかった. この様に電解還元処理は
F
.
A
.に厄影響せず,比の処理によって見られる酵素力
.
A
.の活性化により生じたものであると推論
の増加は Z
1
) 西林,麦林,片瀬,吉田:兵庫農大研報, 3 (良化
編
)
, 1
2
3(
19
5
8
)
.
2
)E
.SANDEGRENandN
.LANG:
J
.I
n
s
t
.B
r
e
w
.,56,
3
1
3(
19
5
0
)
.
.
R
.A.POLLOCK andA.A.P
o
o
L
:
i
b
i
d
.,64, 1
5
1
3
)J
出来る.
以上の様に大麦 Z
.
A
.は電解解元によって活性化され
(
1
9
5
8
)
.
る事から Z
.
A
.の F
.
A
.への変化は還元作用によって行
4
)秦忠夫:京大食研報, 3,6
3(
19
5
0
)
.
われると云う推論に一つの証明を提示した.叉此の処理.
5
)T
.HATAandS
.MATUSHITA: Memo.R
e
s
.
l
n
s
t
.
によって得られた偵はパパインによる T
.
A
.の値の約半
FoodS
c
i
. J(y
o
t
oU
n
i
v
.,5,6
5(
19
5
3
)
.
分にしか到達しなかったが,此の事は秦氏も電解還元に
Summary
よるパパインの活性化は育政庖等の活性剤を用いた場合
の約半分であったと報告している.叉以上の実験は総て
7
8
乙よる Z
.
A
.の
A
p
p
l
i
c
a
t
i
o
no
ft
h
ee
l
e
c
t
r
o
l
y
t
i
cr
e
d
u
c
t
i
o
nmethod
粗製試料について行ったものであり,選
t
ot
h
ea
c
t
i
v
a
t
i
o
no
fb
a
r
l
e
yzymogen amylase was
活性化が直接行われたものであるか或 L、は二次的に行わ
l
J
owingr
e
s
u
l
t
swereo
b
t
a
i
n
e
d
.
s
t
u
d
i
e
dandt
h
ef
o
.
A
.のI
i
i隣精製が成功して照らぬ
れたものであるかは Z
1
) A
c
t
i
v
a
t
i
o
no
fb
a
r
l
e
yzymogen amylase by
,u
s
i
n
gc
i
t
r
a
t
e,
e
l
e
c
t
r
o
l
y
t
i
cr
e
d
u
c
t
i
o
nwas e
f
f
e
c
t
i
v
e
現在.伺残された問題である.
t
r
i
so
rv
e
r
o
n
a
lb
u
f
f
e
r
s
.
要
約
2
) Thea
c
t
i
v
i
t
yv
a
l
u
e
so
b
t
a
i
n
e
dbye
l
e
氾t
r
o
l
y
t
i
c
大麦 Z
.
A
.の活性化に電解還元法の応用を試み次の結
r
e
d
u
c
t
i
o
nmethodwereabouth
a
l
fo
ft
o
t
a
lamylase
v
a
l
u
ebyp
a
p
a
i
nt
r
e
a
t
m
e
n
t
.
果を得た
1
) クエン酸、ノーダ,
3
) F
r
e
eamylasewasn
o
ta
f
f
e
c
t
e
d bye
l
e
c
t
r
o
.
トリス或はベロナール緩衝液を
用い 8V
,5mA,3時間処理する事により Z.A.の活性
l
y
t
i
cr
e
d
u
c
t
i
o
n
.
(
L
a
b
o
r
a
t
o
r
yo
fF
e
r
m
e
n
t
a
t
i
o
nT
e
c
h
r
i
o
l
o
g
y
)
化が行われた
2
) 電解還元法によって得られた仰はパパイン処E
唱で
3
8