27P-am033 Lophophora 属植物の形態,メスカリン含有量及び DNA 配列と鑑別法について ◯荒金 眞佐子 1 , 佐々木 陽平 2 , 中嶋 順一 1 , 福森 信隆 1 , 吉澤 政夫 1 , 鈴木 幸子 1 , 北川 重美 1 , 森 謙一郎 1 , 荻野 周三 1 , 安田 一郎 3 , 南雲 清二 2 2 3 ( 1 都健安研セ, 星薬大, 千葉科学大薬) 【目 目的】サボテン科 Lophophora 属植物には,Lophophora williamsii と L. diffusa の 2 種が知られ ている.本研究では,2 種間での形態,麻薬成分 mescaline(1)の含有量および DNA 配列に関 する関連を明らかにするため,日本国内で流通する Lophophora 属植物について形態観察から種 を同定し,顕微鏡による表皮等の観察,1 含量を測定するとともに特定遺伝子領域の DNA 配列 を解析し比較した.さらに,DNA 配列に基づく鑑別法を開発すべく PCR-RFLP 法を検討した. 【方 方法】2005 年 1 月から 6 月に導入した L. williamsii 16 個体 (Lo-1∼16) , L. diffusa 4 個体 (Lo-17 成分分 ∼20) を実験に供試した. 形態観察:走査型電子顕微鏡により表皮上の突起を観察した.成 析:UPLC/PDA により 1 の定量を行った.DNA 解析:試料約 20mg から全 DNA を抽出後,PCR 法により葉緑体 trnL/trnF 領域を増幅した.PCR 増幅産物を Cycle Sequence 反応を行った後,DNA 配列を解析し,ソフトウェアにより配列間の比較解析を行った.解析した DNA 配列を基に PCR-RFLP 法を検討した. 結果】L. williamsii には 3 タイプ (A∼C) の DNA 配列が認められ,形態や成分などの比較から 【結 Lo-1∼13 と Lo-14∼16 の 2 つのグループに分けられた.前者 (第 1 グループ) は表皮上の突起が 小型で,1 を含有し,DNA 配列は Lo-11 のみ B タイプでそれ以外はすべて A タイプであった. 後者 (第 2 グループ) は表皮上の突起が大型で,1 は含有せず,DNA 配列は C タイプであった. 一方,L. diffusa は表皮上の突起が中型で,1 は含有せず,DNA 配列は L.williamsii とは異なる配 列(D タイプ)であった.PCR-RFLP 法を適用することにより,DNA 配列を解析することなく 両種を識別し,しかも L. williamsi については第 1 グループと第 2 グループをも鑑別できる方法 を確立した.
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