バイオロジカル・インダストリーズ社 XTT 細胞増殖アッセイキット 細胞増殖・生存率の定量 XTT 細胞増殖アッセイは、non-RI にて安全に細胞増殖および生存率を 定量可能なアッセイです。 生細胞のミトコンドリア中でテトラゾリウム塩である XTT の還元反応が 起こり、生じる橙色の水溶性ホルマザン色素の吸光度をプレートリーダー にて測定します。 サイトカインや成長因子添加による細胞増殖能の比較試験や細胞傷害因 子のスクリーニング等に有用です。 迅 速 2-5 時間のインキュベーションで測定可能です。また吸光プレートリーダーの使用により多検体処理が可能です。 簡 便 インキュベーション後、可溶化剤の添加や細胞の洗浄操作は必要ありません。 高感度 少ない細胞数(5,000 cells)から測定が可能で、MTT アッセイより高感度です。 正確性 生成された色素の吸光度は細胞数と比例します。 実績のある細胞系 293T (embryonic kidney) HeLa (cervix carcinoma) ● Hep G2 (heptocellular carcinoma) ● D 145 (prostate cancer) ● A375 (malignant melanoma) ● MCF-7 (breast adenocarcinoma) ● BXPC-3 (pancreatic adenocarcinoma ) ● CL1 and 22RV1 (prostate carcinoma cells) ● DU-145 (Prostate cancer cell line) PC-3 (Prostate cancer cell line) HT-29 (Epithelial colorectal adenocarcinoma cell line) ● NCI-H526 (Small cell lung carcinoma cell line) ● U937 (monocytic cell line) ● THP-1 (monocytic cell line) ● Pancreatic carcinoma cell line ● Myofibroblasts ● Monocytes ● Primary human umbilical vein endothelial cells Synovial cells Freshly isolated human T cells ● ALL cells of B cell lineage ● RAW 264.7 (Mouse macrophage like cell line) ● Mouse fibroblasts ● Mouse myeloid cell line ● Mouse embryonic fibroblasts ● ● ● ● ● ● プロトコール概略 1. 96 well 平底プレートに 100 µL の細胞サンプルを添加し、37℃、CO2 存在下で 24-96 時間インキュベートします。ブランクコントロールに は 100 µL の培地を使用します。 2. 解凍した activation solution 0.1 mL と XTT reagent 5 mL を混和し反応 溶液を準備します。 3. 各 well に 50 µL の反応溶液を添加し、2-5 時間インキュベートします。 4. 450-500 nm と 630-690 nm の吸光度をプレートリーダーで測定し、 450-500 nm の測定値から 630-690 nm の測定値を減算します。 構成内容 ● ● XTT Reagent (10x5 mL) Activation Reagent (2x0.5 mL) マウス繊維芽細胞株(L-929)を 5%CO2、37℃条件下オー アッセイ分 100 バーナイトで培養し、細胞増殖能を XTT アッセイと MTT アッセイで評価した(反応時間:3 時間)。 XTT アッセイでは、MTT アッセイと比べてより高感度な サンプルあります 結果が得られた。 Biological Industries Ltd. メーカー略号:BLG 品名 Cell Proliferation Kit (XTT based) 品番 包装 希望販売価格 20-300-1000 1000 Assays ¥21,700 バイオロジカル・インダストリーズ社 EZ -E C L K it ‒ H RP 用化学発光検出キット ブロッティングの検出に EZ-ECL kit は、HRP 標識されたタンパク質(ウェスタンブロット)や核酸(サザンブロッティングまたはノーザンブロッ ティング)の化学発光検出用の Ready-to Use のキットです。H2O2 の存在下、ルミノールは HRP により酸化され発光 します。このルミノール酸化による発光はエンハンサーにより増強され、フィルムや CDD カメラにより撮影できます。 他社製品との検出比較 1 ● Ready-to-Use A 社製品 ● Non-RI の高感度検出システム EZ-ECL ● 抗体量を節約 ● 短い露光時間で検出が可能 ● 安価 ・使用サンプル:3T3 細胞ライセート , 20µL dilution 1:1 ∼ 1:1000 ・1 次抗体:ERK1/ERK2 抗体 構成内容 ● ● EZ-ECL Solution A (luminol / Enhancer を含む ) EZ-ECL Solution B (stable peroxide solution を含む ) 他社製品との検出比較 2 1 kDA 参考文献 ● Thorpe, G.H.G. and Kricka, L.J., ● Thorpe, G.H.G., Kricka, L.J., Moseley, S.B. and Whitehead, T.P., 1335-1341 (1985) ● Riko, I., , , 133: 331-353 (1986) , 231: 170-174 (1995) ., 31(8): A 社製品 2 1 EZ-ECL 2 100 75 50 35 25 15 ini blots 分 4m 使用サンプル:新生児心筋細胞ライセート 1 次抗体:Phospho-PKB 抗体 レーン 1:無刺激 レーン 2:10 nM EGF 刺激有り サンプルあります Biological Industries Ltd. メーカー略号:BLG 品名 品番 包装 希望販売価格 EZ-ECL Kit 20-500-120 120 mL (for 12 mini blots) ¥10,000 20-500-500 500 mL (for 50 mini blots) ¥36,000 20-500-1000 1000 mL (for 100 mini blots) ¥58,000 ● 希望販売価格 ・・・「希望販売価格」は参考であり、販売店様からの販売価格ではございません。 記載の希望販売価格は2014 年 6 月1日現在の希望販売価格です。 予告なしに改定される場合がありますので、ご注文の際にご確認下さい。消費税は含まれておりません。 ● 使 用 範 囲 ・・・ 記載の商品は全て、「研究用試薬」です。 人や動物の医療用・臨床診断用・食品用等としては使用しないよう、十分ご注意ください。 (12042)
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