1:3 7 4 4 ,2 0 0 2 37 ＝原著＝自発走によるラット足底筋ミオシン重鎖アイソフォーム構成比の変化辻本尚弥1) 鈴木英樹2) 梅村義久3) Effects of Voluntary Wheel Running Training on Myosin Heavy Chain Isoform Composition in Rat Plantaris Muscle Hisaya TSUJIMOTO, Hideki SUZUKI and Yoshihisa UMEMURA Abstract Thee f f e c t so fv . o l u n t a r yrunningt r a i n i n gwerei n v e s t i g a t e di nt h e1 3 w e e k o l dfemale n t otwog r o u p s :s e d e n t a r y( S ; N=6) o r F i s c h e r 3 4 4 r a t s (N=l2). Animalsw巴re <livid巴d i v o l u n t a r yrunningt r a i n i n g(VT;N=6)groupa t5-weeko fa g e . Animals i n group VT wereg i v e nf r e ea c c e s st ot h erunningwheelf o r8w e e k s . Bodyweighto ftwogroupswass i g n i f i c a n t l yi n c r e a s e dduringt r a i n i n gp e r i o d . The e rday ( M i n . ;1 averagerunningr e v o l u t i o no fgroupVTwas10483 土 1041 (mean 土 SD) p 5 0 6 ｱ 2 8 7 , Max.; 17601 士 1539). Heartweightandr e l a t i v eh e a r tweighto fgroup VT were . The p l a n t a r i s (PLA) weight and t h er e l a t i v e PLA s i g n i f i c a n t l yh i g h e rthan group S .Nochangeo fp r o t e i nc o n ｭ weighto fgroupVTweres i g n i f i c a n t l yh i g h e rthangroupS c e n t r a t i o nwaso b s e r v e di ntwog r o u p s .I np r o t e i nc o n t e n t ,t h ev a l u eo fgroup VT was . s i g n i f i c a n t l yhigherthant h a to fgroupS I nt h e myosin heavy c h a i n (MyHC) isoform composition o ft h e PLA m u s c l e , no changeo ft y p e I MyHCisoform was o b s e r v e d with t r a i n i n g ,w h i l e ,t y p e Id MyHC . Moreover, t y p e isoform o fgroup VT was s i g n i f i c a n t l yh i g h e r than t h a to f group S . I a MyHC isoform o f group VT was s i g n i f i c a n t l yh i g h e r than t h a to f group S R e l a t i v e l y ,t y p e Ib MyHCisoformo fgroupVTwass i g n i f i c a n t l y lower than t h a to f . groupS Th巴se r e s u l t si n d i c a t et h a tv o l u n t a r yrunning t r a i n i n gc a u s e st h eg r e a t changes o f myosinheavychaincompositionandhypertrophyi nt h er a tp l a n t a r i sm u s c l e . Keywords:Voluntary r u n n i n g , Myosin heavy chain i s o f o r m , F344 female r a t , P l a n t a r i smuscle 緒自発的な運動（自発走運動）による方法がある。自日実験動物に運動を負荷する場合強制的な運動と 1 ）久留米大学健康・スポーツ科学センタ－ 2 ）愛知教育大学 3 ）中京大学発走を用いたトレーニングは，実験動物の生存率上昇。や肥満抑制川，発ガン予防ぺ高血圧予防制町 3 8 久留米大学健康・スポーツ科学センター研究紀要第 10巻第 l 号 2002 免疫機能の強化ペインシュリン感受性の改善ぺ最した。はじめに，足底筋から粗ミオシンの抽出を行っ大酸素摂取量の増大山1) などの様々な効果があるとた。保存していた筋は筋腹にて二分し，一方を収縮報告されている。自発走運動は比較的高強度で短時蛋白質であるミオシンの分析に供した。粗ミオシン問の運動が活動期中に高頻度に繰り返される特徴をの抽出と変性の方法は， Bar 持つ山。また自発走トレーニングは強制走トレーニよった。総蛋白濃度と粗ミオシン蛋白濃度は & Pette の方法則にングに比べて 1 日の走行距離が長い，つまりトレー Biuret 法にて測定したへ総蛋白含量は，筋重量× ニング量が大きいという特徴を持つ 12ト附。これらの総蛋白濃度により求めた。粗ミオシンの最終蛋白濃ことから，自発走トレーニングに対する骨格筋の適度は， 60µ g/ml とした。応、は，強制走トレーニングとは異なる点があると考えられる。 3. 電気泳動による MyHC アイソフォームの分析そこで本研究では実験動物を用いて，自発走トレーニングの影響について，心重量，筋重量とミオシン重鎖アイソフォーム構成比から検討した。方法 1. 実験動物司飼育方法友びトレーニング方法実験動物には，生後 13 週齢の Fischer344 系の雌 MyHC アイソフォームの分離は， Sugiura & Murakami の方法制を改変した SDS 存在下の電気泳動法（ SDS PAGE ）にて行ったお）。泳動はマイクロスラブ電気泳動装置（ KS8020 型：マリソル）を用いて行った。ゲル条件は分離ゲルには， 30% ( v / v ）の Glycerol を含むアクリルアミド総濃度（ T) ラット 12 匹を用いた（日本 SLC ）。餌（ CE-2 ：日本 =5% クレア）及び飲水は自由摂取とし，昼夜逆転した % (v/v ）の Glycerol を含む T= 8% (w/v ）で (w/v ）で架橋度（ C) =1%の淡溶液と 40 12 時間の明暗サイクルで室温22± 1 ℃，湿度 60± C=l% の濃溶液より作成した濃度勾配ゲルを用い 5% の環境下で飼育した。実験群として対照群た。濃縮ゲルには， 35% (v/v ）の Glycerol を含む (Sedentary;S 群， N= 6 ）と自発走トレーニング T=3.5% (w/v ）で C=20% のゲルを用いた。泳動群（ Voluntary w heelrunningt r a i n i n g;VT 群，は濃縮ゲル中は50V ，マーカ一色素が完全に分離ゲ N =6 ）の 2 群を設けた。 4 週齢時より 1 週間予備飼ルに入ってからは 150V で、行った。 i永動時間はマー育した後，群聞の体重がほぼ同一になるように，そカ一色素が分離ゲルに入ってから 15 ～ 18時間とした。れぞれ 5 週齢時にラットを各群に分けた。対照群は泳動後ゲルは銀染色（銀染色キットワコー：和光純 2 4ﾗ3 8ﾗ20cm (KN623 ：夏目製作所）の大きさの薬）を施し蛋白質を可視化した22）。 MyHC アイソフォーケージにて飼育された。 VT 群はラット回転式運動ムの同定は，全ての MyHC アイソフォームを含む量測定装置（直径 32 ×幅 lOcm ）付きの 38 × 28 × 38 ように前腔骨筋と横隔膜筋，ヒラメ筋より抽出し調 cm (KN-78-R ：夏目製作所）の大きさのケージに整された粗ミオシン混合溶液を，被験溶液と同時にて飼育された。ケージより回転車輪への通路は常に泳動して得られたパターンをマーカーとして :fT っ解放されており，ラットは 24時間自由に運動が可能た犯）。アイソフォーム構成比の分析は，画像解析にであった。トレーニングは 5 週齢より 13週齢に達すより行ったね）。るまで 8 週間行った。なお飼育・トレーニング・屠殺での実験動物の扱いについては，「実験動物の飼 4. 統計処理養及び保管等に関する基準」に沿って行ったへ各測定値は群ごとに平均値，標準偏差及び標準誤差を求め統計学的な検定を行った。トレーニング期 2. 筋の摘出句総蛋白質の定量分析と粗ミオシンの抽出・変性問中の体重増加量では，一要因（トレーニング期間中の体重）に対応がある二要因（実験条件×トレートレーニング終了後，ラットの体重を計測，ペンニング期間中の体重）の分散分析にて検定した。主トパルピタールナトリウム溶液にて麻酔を行い，麻効果が有意となった場合の多重比較と交互作用が有酔下において心臓より採血し屠殺した。その後，心意となった場合の単純主効果の検定における多重比臓及び足底筋を摘出し重量を測定した後，ただちに較に，統計量を t 値とするライアン法を用いた。最液体窒素により冷却したイソベンタン中で瞬間凍結終体重，心重量，足底筋重量および MyHC アイソし，生化学的分析を行うまでフォーム構成比では，分散の検定に F 検定法を用 60℃の冷凍庫で保存 39 自発走によるラット足底筋ミオシン重鎖アイソフォーム構成比の変化い，分散が等質であった場合は平均値の検定に t 検示した。図 3 には足底筋の各 MyHC アイソフォーム構成定法を，分散が等質でなかった場合は A s p i n ｭ比を平均値と標準誤差により示した。 W巴 lch の検定法を用いた。全ての検定において有意水準は 5 % (p<0.05 ）とした叫。 Type I MyHC アイソフォームでは両群問に有意な差はみられなかった（ S 群； 3.5±0.6, VT 群， 2.4 土 0.3 ）。結果 TypeI a (S 群； 11.8±2.4, VT 群， 30.4±2.5 ）とトレーニング期間中の VT 群の 1 日当りの回転数 Id (S 群； 18.2±2.4, VT 群； 33.7±2.9) MyHC について群全体の平均値と標準誤差を図 1 に示した。 x103 VT 群の 1 日当りの平均回転数は 1 週日で最小値の 20 1506±287 回を示したが 6 週日まで徐々に増加し， 6 週日には最大値 17602± 1540 回を示しその後徐々に減少した。 1 日当りの回転数の総平均は， 10483± 1041 回であった。〉〉「十弓 ; , . , 亡、＂＇口ごてコぢ己司員 10 F『ムー B I2 次にトレーニング期間中の両群の体重変化を平均 Jコ長J E主ニ値と標準誤差により図 2 に示した。 S 群の体重はト。レーニング期間中増加し，トレーニング開始 l 週日 2 群の体重もトレーニング期間が進むに従い増加し， S 群と同様にトレーニング開始 1 週より前週の体重 3 4 5 6 7 8(Wk.) T r a i n i n gp e r i o d より前週の体重に比べて有意に高値を示した。 VT F i g .1 Changeso fv o l u n t a r yrunninga c t i v ｭ i t y に比べて有意に高値を示した。トレーニング期間中の全ての時点で両群潤の体重に有意な差はみられな (g) 200 かった。最終体重及び心重量と相対的心重量を平均値と標準誤差により表 1 に示した。最終体重では両群間に判色 150 M qぷ匡有意な差が認められなかった。心重量及び相対的心重量では， VT 群が S 群に比べて有意に高値を示した。次に足底筋の筋重量と相対的筋重量及び筋の総〉、 6100 凶蛋白濃度と総蛋白含量を，平均値と標準誤差により 50 表 2 に示した。足底筋の筋重量では， VT 群が S 群と S 群との聞に有意な差が認められた。足底筋の総蛋白濃度は両群間に有意な差は認められなかった。 1 2 -0- Volun回 ryrunning -ii 3 4 5 6 • 7 F i g .2 Changes i n body weight during t r a i n i n gperiod t: S i g n i f i c a n td i f f e r e n c efromt h ev a l u eo f pr巴vious week ( p < 0 . 0 5 ) 総蛋白含量は， VT 群が S 群に比べて有意に高値を e i g h t ,h e a r tweightandr e l a t i v eh e a r tweighti neachgroup Table 1 Bodyw Group (number) Bodyweight Sedentary ( 6 ) Voluntaryrunning ( 6 ) 160ｱ5 167ｱ4 ( g ) Heartweight (mg) R e l a t i v eh e a r tweight (mg/lOOgBodyWeight) 460ｱ15 664ｱ21* 289ｱ9 397ｱ6* Valuesa r eexpressed a smeanｱSEM S i g n i f i c a n td i f f e r e n c efromt h ev a l u ei ns e d e n t a r ygroup *: 8( w k . ) T r a i n i n gp巴riod に比べて有意に高く， VT 群の足底筋は S 群に比べて 10.8% 高値を示した。相対的筋重量でも， VT 群 O Sedentary 40 久留米大学健康・スポーツ科学センター研究紀要第10巻第 1 号 2002 Table2 P l a n t a r i sw e i g h t ,r e l a t i v ep l a n t a r i sw e i g h t ,p r o t e i nc o n c e n t r a t i o n andp r o t e i nc o n t e n ti neachgroup Group (number) Sedentary ( 6 ) P l a n t a r i sweight (mg) R e l a t i v ep l a n t a r i sweight (mg/lOOgBodyWeight) P r o t e i nc o n c e n t r a t i o n (mg/gmuscle) P r o t e i nc o n t e n t (mg/muschle) 148ｱ4 Voluntaryrunning ( 6 ) 164±2 地 93 士 1 98 土 2* 225 土 3 232ｱ2 33 土 l 38±γ Valuesa r ee x p r e s s e da smeanｱSEM S i g n i f i c a n td i f f e r e n c efromt h ev a l u ei ns e d e n t a r ygroup *ｷ (%) アイソフォーム構成比において大きな変化がみられ (%) 40 4 た。 * Ishihara らお）および Munoz ら 26）は自発走トレー 30 ニングにより足底筋重量の増加を報告している。ま 20 た Rodnick ら 9>, Yano ら川および Sexton"1 は自発走トレーニングによる心重量の増加を報告してい 10 る。本研究においてもトレーニング群の心臓及び足。 TypeIMyHC TypeI l aMyHC 底筋の相対的重量は対照群に比べ有意に高値を示した。このことは本研究の自発走トレーニングが骨格 (%) 筋および心臓に対して十分な刺激量を持っていたと (%) 40 * 80 30 考えられる。 MyHC アイソフォーム構成比をみるとタイプ I 60 20 申 40 10 では変化がみられないものの，タイプ E b の減少とタイプ E d 及びタイプ E a の有意な増加が観察された。 Kriketos ら鵠）は免疫組織学的手法を用いて自 20 「し H Y M b I I e p y TypeI I dMyHC T n v 0 F i g .3 Changes i n MyHC isoforms o f p l a n t a r i smusclei neachgroup （亡コ－ s e d e n t a r ygroup,- -v o l u n ｭ t a r yrunninggroup) S i g n i f i c a n td i f f e r e n c e from t h e v a l u ei ns e d e n t a r ygroup *: 発的走トレーニングにより，ラット長指伸筋のタイプ E B 線維比率の減少とタイプ E A , IID/X ，および I 線維比率の増加を観察している。 Bigard ら勾）は，若齢期のラット足底筋において，タイプ H b MyHC の減少とタイプ E a および I MyHC の有意な増加を報告している。本研究ではこれらの報告でみられたような，タイプ I MyHC の増加は観察されなかった。これらは，被験動物の系および週齢の違いによるものと考えられるが，その理由は明らかアイソフォームは S 群に比べて VT 群が有意に高ではない。 ! I bMyHC アイソフォー MyHC アイソフォーム構成比について，強制的ムでは， S 群に比べて VT 群が有意に低値を示したな持久的走トレーニングではタイプ E b と E d 聞の (S 群； 66.4±3.6, VT 群； 32.8 土 2.8 ）。変化21 ），田）であるのに対して，自発走トレーニングで値を示した。対照的に Type 考察本研究では，自発走トレーニングにより MyHC は本実験や先行研究のように MyHC 構成比に大きな変化がみられた。その一因としては，自発走トレーニングの運動量が多いことが考えられた。強制的な自発走によるラット足底筋ミオシン重鎖アイソフォーム構成比の変化 4 1 トレーニングの走行距離が分速35m で叩分走行すれらは， DNA ユニット 41）核ドメイン叫あるいは筋るとしても 1 日で3150m しかならない。本実験の 1 細胞核ドメイン叫4）と呼ばれる。 Yao ら 45）は筋細胞日当りの回転数の平均は 10483± 1041 回を示し，この移植により，単一筋線維内に筋細胞核が異なったれかホすべて一回転とした場合に走行距離は lOkm にタンパク質を発現するキメラを報告している。自発なり強制走トレーニングの約 3 倍の距離となる。し走による損傷の修復過程で融合したサテライト細胞かし，本研究では自発走トレーニングの走行距離とが異なる MyHC を発現することによるタイプ移行 MyHC アイソフォーム構成比の変化にはなんら関の可能性は考えられる。係は見られなかった（データは示していない）。 MyHC の変化は，単に運動量が多かったというこ Irintchev と Wernig"l および小笠原ら聞は自発走後にタイプ I 線維のファイパータイプグルーピンとではなく， E B や H D タイプの筋線維が多く動員グを報告しており，これは筋損傷後の神経支配の変されたためではないかと考えられる。各タイプの運化を示している。 Wernig ら 3削）は神経軸索の発芽動単位の活動参加関値は，運動強度の増大に従い S と新しいシナプス形成が自発走による筋線維タイプタイプから FF タイプへと動員される制。自発的な移行のメカニズムの一つであるとしている。また春走トレーニングは比較的高強度で短時間の運動が活日らは筋損傷後のタイプ移行のメカニズムとして，動期中に高頻度に繰り返されるなどの特徴を持って損傷後の脱神経，その後引き続いて起こる多重神経いる凶ことから， FF や FI タイプの運動単位を構支配，さらに筋の活動様式により選択された単一神成する E B や E D 線維の活動参加量が多かったと考経支配への移行，その結果として筋線維タイプが移えられる。活動量の増大は MyHC アイソフォーム行するという仮説たてているぺ両仮説とも筋に対蛋白合成過程のスイッチング叫を引き起こし，する支配神経の変化が MyHC 合成のスイッチング “ nearest-neighbor ”ルール担）に従い， E b から E d へ，さらに E a へと連続田）して置き変わっていくとを引き起こす一因であるとしている。本研究では筋損傷に対する指標の測定は行っていない。しかしこ考えられている。本研究においても同様な機序によれらのメカニズムにより MyHC 構成比に大きな変り MyHC アイソフォーム変化が引き起こされたと化が引き起こされた可能性はある。本研究では，自発走トレーニングにより心重量お考えられる。また，他の要因として自発走により引き起こされよび筋重量の増加とともに， MyHC アイソフォー Irintchev とム構成比において大きな変化がみられた。これらの Wernig削，小笠原ら凶および Wernig ら描）は，自発変化は持久的な走トレーニングにおいてみられる変走による筋の損傷を報告している。また Wernig 化よりも大きいものであった。この変化を引き起こら鈴）は走行形態が類似している回転ドラムによる強すメカニズムはいくつか考えられる。今後このメカ制定でも筋の損傷を報告している。春日ら凶は実験ニズムに対する詳細な研究が必要である。る筋損傷の影響も考えられる。動物に対する無負荷での自発走では，高速度の断続走が多く見られると報告している。小笠原ら聞は，引用文献体の損傷と神経と筋の議離，神経・筋接合部の損傷 1)H o l l o s z y ,J .0 .( 1 9 9 7 ):M o r t a l i t yra旬 and l o n g e v i t y o f f o o d r e s t r i c t e d e x e r c i s i n g male r a t s : a r e e v a l u a t i o n . J . A p p l . P h y s i o l . ,8 2 ( 2 ):3 9 9 4 0 3 . 2) Tokuyama, K . , S a i t o , M . , Okuda, H. ( 1 9 8 2 ):E f f e c t so fw h e e lr u n n i n g on f o o d i n t a k e and weightg a i no f male and f e maler a t s .P h y s i o l .B e h a v . ,2 8 ( 5 ):8 9 99 0 3 . が考えられる。筋細胞自体が損傷を受けた場合，損 3 ）山下かなへ，棲井邦子（ 1986 ）：ラットの体成自発走の走速度が高速度の場合，実験動物の身体が後方に遅れ，頭を下にした走行，つまり下り走になる場合があると報告している。 Armstrong ら制および Schwane と Armstrong'7) は下り走に伴う筋の損傷を報告しており，自発走による筋損傷は，自発走運動に下り走の形態のみられることが一因と考えられる。筋損傷では，細胞膜損傷による筋細胞自傷部位はマクロファージ等により貧食作用を受けた後，活性化したサテライト細胞の融合により修復される肌4-0）。多核細胞である筋細胞は，ひとつの核に支配される一定の領域を持つと考えられている。こ分に及ぼす食餌タンパク質と自由運動の影響．日本栄養・食糧学会誌， 39(4) : 2 8 9 9 4 . 4) Reddy, B . S . , S u g i e , S . , Wang, C . ( 1 9 8 8 ):E f f e c t so fv o l u n t a r ye x e r c i s e on 4 2 久留米大学健康・スポーツ科学センター研究紀要 azoxymethane-induced c o l o n c a r c i n o g e n e s i si n male F 3 4 4r a t s . Cancer R e s . , 4 8:7 0 7 9 8 1 . 5 ）橋本動，樋口満，山川喜久江，鈴木慎次郎 (1981 ）：日常の定期的運動の血圧上昇抑制因子の研究；強制と自白運動の違いがラットの血圧に及ぼす影響．体力科学， 30: 2侃ー13. 6) S u z u k i ,S . ,Oshima,S ,O h t a ,F . ,T s u j i ,K . , T s u j i , E . , M i t s u i s h i , R. ( 1 9 6 9 ) :Exｭ p e r i m e n t a ls t u d i e s on t h ei n t e r r e l a t i o n ｭ s h i p so fn u t r i t i o n ,p h y s i c a le x e r c i s e and h e a l t h components. Ann. Rep. N a t .I n s t . N u t r . ,3 :2 1 0 . 7) Umemura, Y . ,I s h i k o ,T . ,A o k i ,K . and G u n j i ,A. ( 1 9 9 2 ):E f f e c t so fv o l u n t a r ye x ｭ e r c i s eonboneg r o t handc a l c i u mmetaboｭ l i s mi ns p o n t a n e o u sh y p e r t e n s i v er a t s .I n t . J .Sport. お1ed., 1 3 :4 7 6 4 8 0 . 8) Ueda, N . ,K a y a s h i t a ,J . ,M o r i g u c h i ,S . , K i s h i n o ,Y .( 1 9 9 0 ):E f f e c to fd i e t a r yp r o ｭ t e i nl e v e l s on immune f u n c t i o no fe x e r ｭ c i s e dr a t s .N u t r .R e s . ,1 0 :4 2 9 3 7 . 9) R o d n i c k , K.J . ,H e n r i k s e n ,E .J . , James, D .E . ,H o l l o s z y ,J .0 .( 1 9 9 2 ) :E x e r c i s e t r a i n i n g ,g l u c o s et r a n s p o r t e r s , and g l u c o s et r a n s p o r ti nr a ts k e l e t a lm u s c l e s . Am.J .P h y s i o l . , 262(1Pt1):C91 4 . 1 0 ) Lambert, M. I . , Noakes, T . D. ( 1 9 9 0 ): Spontaneous r u n n i n gi n c r e a s e s V02max andr u n n i n gperformancei nr a t s .J .A p p l . P h y s i o l . ,6 8 ( 1 ):4 0 0 3 . 1 1 ) Yano,H . ,Yano,L . ,K i n o s h i t a ,S . ,T s u j i , E .( 1 9 9 7 ):E f f e c to fv o l u n t a r ye x e r c i s e on maximal oxygen uptake i n young female F i s c h e r3 4 4r a t s .J p n .J .P h y s i o l . ,4 7 ( 1 ): 1 3 9 4 1 . 12 ）春日規克，山下晋，小笠原仁美，鈴木英樹，辻本尚弥，石原昭彦（ 1999 ）：加負荷式回転車輪によるラットの自発走特性と骨格筋への効果．体力科学， 48 :9 9 1 1 0 . 13 ）小笠原仁美，山下晋，平野朋枝，春日規克第10巻第 1 号 2002 W.L . ,S i m s ,C .R . ,Mondon,C .E .( 1 9 8 9 ): V a r i a t i o n si nr u n n i n ga c t i v i t y and e n z y ｭ matic a d a p t a t i o n si nv o l u n t a r y running r a t s .J .A p p l .P h y s i o l . ,6 6 ( 3 ):1 2 5 0 7 . 1 5 )R o d n i c k ,K. J . , Mondon, C .E . ,H a s k e l l , W. L . ,Azhar,S . ,R e a v e n ,G. M. ( 1 9 9 0 ): V a r i a t i o n si nr u n n i n ga c t i v i t y and e n z y ｭ matic a d a p t a t i o n si nv o l u n t a r y running r a t s .J .A p p l .P h y s i o l . ,6 8 ( 2 ) :5 1 3 9 . 1 6 )S h e r w i n ,C . M. ( 1 9 9 8 ) :Voluntary wheel r u n n i n g :ar e v i e w and n o v e li n t e r p r e t a ｭ t i o n .Anim.B e h a v . ,5 6 ( 1 ) :1 1 2 7 . 17 ）総理府内閣総理大臣官房管理室実験動物飼育保管研究（ 1980 ）：実験動物の飼養及び保管等に関する基準の解説. 1 版，東京：ぎょうせい． 1 8 )B a r ,A . ,P e t t e ,D. ( 1 9 8 8 ) :Three f a s t myｭ o s i n heavy c h a i n si na d u l tr a ts k e l e t a l m u s c l e .FEBSl e t t . ,2 3 5 ( 1 ,2 ):1 5 3 5 . 1 9 )G o r n a l l ,A .G . ,B a r d a w i l l ,C .J . ,D a v i d , f serum M. M. ( 1 9 4 9 ) :De旬rmination o p r o t e i n sbymeanso ft h eb i u r e tmethod.J B i o l .Chem., 1 7 7 :7 5 1 6 . 2 0 )S u g i u r a , T . , Murakami, N. ( 1 9 9 0 ): S e p a r a t i o n o f myosin heavy c h a i n i s o f o r m si nr a ts k e l e t a lm u s c l e sbyg r a d i ｭ e n tsodiumd o d e c y ls u l f a t e p o l y a c r y l a m i d e g e le l e c t r o p h o r e s i s . Biomed. R e s . ,1 1 ( 2 ): 8 7 9 1 . 21) 辻本尚弥，鈴木英樹，春日規克 (1995) ：老齢期ラット下肢筋における走及びジャンプトレーニングの効果．名古屋経済大学・市都学園短期自然科学研究会誌， 30(1) :9引． 2 2 )M o r r i s s e y ,J . H. ( 1 9 8 1 ):S i l v e rs t a i nf o r p r o t e i n si n polyacrylamide g e l s ; a modiｭ f i e dp r o c e d u r ewithenhanceduniforms e n ｭ s i t i v i t y .A n a l .B i o c h e m . ,1 1 7 :3 0 7 1 0 . 23 ）辻本尚弥，鈴木英樹，春日規克，石河利寛大学 (1995 ）：：走及びジャンプトレーニングによるラット骨格筋ミオシン重鎖アイソフォーム組成の変化．体力科学， 44: 9 7 1 0 4 . 24 ）森敏昭，吉田寿夫 (1990 ）：心理学のための (2000 ）：回転車輪の自発走により誘発される筋データ解析テクニカルブック. 1 版，京都：北損傷とトレーニング効果．日本運動生理学雑誌，大路書房． 7 ( 2 ):5 7 6 3 . 1 4 ) Rodnick, K. J . ,R e a v e n ,G . M., H a s k e l l , 2 5 )I s h i h a r a ,A . ,I n o u e ,N . ,K a t s u t a ,S .( 1 9 9 1 ) :Ther e l a t i o n s h i po fv o l u n t a r yr u n n i n gt o 自発走によるラット足底筋ミオシン重鎖アイソフォーム構成比の変化 f i b e rt y p ec o m p o s i t i o n ,f i b e ra r e a and c a p i l l a r y s u p p l y i n r a t s o l u e s and p l a n t a r i sm u s c l e s .E u r .J .A p p l .P h y s i o l . , 6 2 :2 1 15 . 26 ）乱1unoz, K .A . , Aannestad, A . ,T i s c h l e r , M. E . ,H e n r i k s e n ,E .J .( 1 9 9 4 ):S k e l e t a l musclep r o t e i nc o n t e n tands y n t h e s i sa f t e r v o l u n t a r y running and subsequent u n w e i g h t i n g . Metabolism., 4 3 ( 8 ) :9 9 49 . 2 7 )S e x t o n , W. L .( 1 9 9 5 ) :Vascular adapta t i o n si nr a thindlimbs k e l e t a lmusclea f t e r v o l u n t a r yrunningwheele x e r c i s e .J .A p p l . P h y s i o l . ,7 9 ( 1 ):2 8 7 9 6 . 2 8 )K r i k e t o s , A. D . , Pan, D. A . ,S u t t o n ,J . R . , Hoh, J .F . ,B a u r ,L .A . , Cooney, G. J . ,J e n k i n s ,A .B . ,S t o r l i e n ,L . H. ( 1 9 9 5 ) :R e l a t i o n s h i p sbetweenmusclemembrane l i p i d s ,f i b e rt y p e ,andenzymea c t i v i t i e si n s e d e n t a r y and e x e r c i s e d r a t s . Am. J . P h y s i o l . ,2 6 9 ( 5Pt2 ):R11546 2 . 2 9 )B i g a r d , A. X . ,S a n c h e z ,H . ,B i r o t ,0 . , S e r r u r i e r ,B .( 2 0 0 0 ):Myosin heavy c h a i n compositiono fs k e l e t a l muscles i n young r a t s growing under hypobaric hypoxia c o n d i t i o n s .J .Appl.P h y s i o l . ,8 8 ( 2 ):4 7 98 6 . 3 0 ) Walmsley, B . , Hodgson,J .A . ,B u r k e , R. E . ( 1 9 7 8 ) :Force p r o d u c t i o n by medial gastrocnemius and s o l e u s muscle d u r i n g locomotion i n f r e e l y moving c at s . J Ne u r o p h y s i o l . ,4 1:1 2 0 3 1 6 . 3 1 ) Kirschbaum, B .J . , Kucher, H . , Termin, A . , K e l l y , A. M., P e t t e , D. ( 1 9 9 0 ): A n t a g o n i s t i ce f f e c t so fc h r o n i c low f r e ｭ quency s t i m u l a t i o n and t h y r o i d hormone on myosin e x p r e s s i o ni nr a tf a s tt w i t c h m u s c l e .J .B i o l .Chem.,2 6 5 :1 3 9 7 4 9 8 0 . 3 2 )P e t t e , D . , S t a r o n , R. S . ( 2 0 0 1 ) T r a n s i t i o n so f muscle f i b e r p h e n o t y p i c p r o f i l e s .HistochemC e l lB i o l . ,1 1 5 ( 5 ):3 5 9 7 2 . 3 3 ) Termin,A . ,S t a r o n ,R.8 . ,P e t t e ,D. ( 1 9 8 9 ) Changes i n myosin heavy c h a i n isoforms during c h r o n i c l o w f r e q u e n c y s t i m u l a t i o no fr a tf a s thindlimb m u s c l e s ; as i n g l e f i b e rs t u d y .E u r .J .B i o c h e m . ,1 8 6 4 3 :7 4 95 4 . 3 4 )I r i n t c h e v ,A . , Wernig, A. ( 1 9 8 7 ):Muscle damageandr巴pair i nv o l u n t a r i l y running m i c e :s t r a i n and muscle d i f f e r e n c e s .C e l l T i s s u eR e s . ,2 4 9 ( 3 ):5 0 92 1 . 3 5 ) Wernig, A . ,I r i n t c h e v ,A . ,W e i s s h a u p t ,P . ( 1 9 9 0 ):Musclei n j u r y ,c r o s ss e c t i o n a la r e a and f i b r e t y p e d i s t r i b u t i o n i n mouse s o l e u sa f t e ri n t e r m i t t e n twheelr u n n i n g .J . P h y s i o l . ,4 2 8:6 3 95 2 . 3 6 ) Wernig, A . ,S a l v i n i ,T .F . ,I r i n t c h e v , A. ( 1 9 9 1 ):Axonal s p r o u t i n g and chang巴s i n f i b r et y p e sa f t e r runningi n d u c e d muscle damage. JN e u r o c y t o l . ,2 0 ( 1 1 ):9 0 31 3 . 3 7 ) Armstrong, R. B . , O g i l v i e , R. W., Schwane, J .A. ( 1 9 8 3 ) :E c c e n t r i ce x e r c i s e i n d u c e di n j u r yt or a ts k e l e t a lm u s c l e .J . A p p l .P h y s i o l . ,5 4 ( 1 ):8 09 3 . 3 8 ) Schwane, J .A . , Armstrong, R. B .( 1 9 8 3 ) :E f f e c to ft r a i n i n gons k e l e t a lmusclei n j u r y from d o w n h i l l running i nr a t s .J . A p p l .P h y s i o l . ,5 5 ( 3 ):9 6 97 5 . 3 9 ) Hawke, T . J . , Garry, D. J . ( 2 0 0 1 ): Myogenic s a t e l l i t e c e l l s : p h y s i o l o g y t o molecular b i o l o g y .J .A p p l .P h y s i o l . ,9 1 ( 2 ):5 3 4 5 1 . 4 0 )S c h u l t z ,E . , McCormick, K. M. ( 1 9 9 4 ): S k e l e t a lmuscles a t e l l i t ec巴 lls. R e v .P h y s i o l . Biochem.Pharmacol., 1 2 3 :2 1 3 5 7 . 4 1 )C h e e k , D. B .( 1 9 8 5 ) :The c o n t r o lo fc e l l mass and r e p l i c a t i o n . The DNA u n i t a p e r s o n a l2 0 y e a rs t u d y . Early Hum. D e v . , 1 2 ( 3 ):2 1 1 3 9 . 4 2 )H a l l ,Z . W., R a l s t o n ,E .( 1 9 8 9 ):Nuclear domainsi nmusclec e l l s .C e l l . ,5 9 ( 5 ):771叩 2 . 4 3 )E d g e r t o n , V. R . , Roy, R. R. ( 1 9 9 1 ): Regulation o fs k e l e t a l muscle f i b e rs i z e , shapeandf u n c t i o n .J .Biomech., 2 4Suppl 1:1 2 33 3 . 4 4 )A l l e n ,D.L . ,Roy,R.R . ,E d g e r t o n ,V.R. ( 1 9 9 9 ):Myonucleardomainsi nmusclea d ｭ a p t a t i o n and dis 巴 ase. Muscle N e r v e . ,2 2 ( 1 0 ):1 3 5 0 6 0 . 4 5 ) Yao, Y . ,Miyazaki, J .I . ,H i r a b a y a s h i ,T . 4 4 久留米大学健康・スポ）ツ科学センター研究紀要 ( 1 9 9 4 ) :C o e x i s t e n c e o f f a s tmusclet y p e ands l o w m u s c l e t y p et r o p o n i nT isoforms i ns i n g l ec h i m e r i c muscle f i b e r si n d u c e d bymusclet r a n s p l a n t a t i o n .Exp.C e l lR e s . , 2 1 4 ( 1 ):4 0 0 7 . 46 ）春日規克，西沢富江，小坂井留美，鈴木康子，第 10巻第 l 号 2002 久野正樹，飯田守，林万紀，中野美仁子，平野朋枝，辻本尚弥，鈴木英樹 (1994 ）：運動実験のとらえ方，与え方動物実験から；骨格筋の収縮特性，組織化学的特性結果からみた適性トレーニング．運動生化学， 7:6-14.