日本農芸化学会中四国支部第39回講演会(例会) 平成26年5月31日福山大学宮地茂記念館 ① 高知県産グァバ茶の α -アミラーゼおよびチロシナーゼ活性阻害と抗酸化活性西川きよ・吉金優1・中島悦子1・片山智子2・樋口慶郎1・沢村正義1 有限会社アフロディア 1高知大学土佐FBC人材創出拠点 2有限会社日本漢方医薬研究所有限会社アフロディア ② 健康と美しい自然を次世代に〔事業の概要〕業種化粧品卸、小売、エステサロン従業員 5名資本金 300万円コスメシリーズ〔沿革〕 1999年8月 2010年6月有機JAS認定自家農園㈲アフロディア設立自家農園取得（高知県南国市） 2010年7月 ‘ジュジュグァバティー’が高知県成長分野育成支援研究開発事業化プランに認定 2013年6月自家農園栽培オーガニックコスメが高知県経営革新支援事業に認定 2013年9月有機JAS認定を取得ジュジュグァバティーグァバ葉の機能性デンプン分解酵素（α－アミラーゼ）の阻害 → 血糖値上昇抑制作用（株）ヤクルト本社 ‘蕃壮麗茶’（トクホ）等メラニン産生酵素（チロシナーゼ）の阻害→美白作用ビーエイチエヌ（株） ‘グァバ葉エキス末-S’等高知県産グァバ葉の科学的データがない研究目的自社（高知県産）グァバ茶葉の飲料や化粧品としての優位性および可能性の追求・ α－アミラーゼ阻害試験・チロシナーゼ阻害試験・抗酸化試験（スーパーオキシド・DPPHラジカル消去試験） ③ 実験方法 ④ 飲料化粧品茶葉の熱水抽出茶葉のBG抽出茶葉 3 g 沸騰水 180 mL 静置（3 min）茶葉 5 g 15% 1,3-ブタンジオール（BG） 80 mL 撹拌（室温,2h）ろ過ろ過 200 mLに定容 100 mLに定容測定項目測定項目（1）α－アミラーゼ阻害活性（2）総ポリフェノール量（1）チロシナーゼ阻害活性（2）スーパーオキシドアニオン消去活性（3）DPPHラジカル消去活性（4）総ポリフェノール量 α‐アミラーゼ阻害活性 ⑤ 8 低 7 IC50 (％, v/v) 酵素阻害活性 b 6 b 5 4 3 2 a 1 高 0 自社 W X JouJou 減肥茶醗酵グァバ茶（高知県産）（海外産）（沖縄県産）熱水抽出液（弊社推奨濃度3 g/200 mL） Y 蕃壮麗茶（トクホ） Z グァバ茶ペットボトル商品 *ブタ膵臓由来α-アミラーゼ使用、異なるアルファベットは有意差を示す（P<0.01）チロシナーゼ阻害活性 ⑥ ＞8.4 3.0 低酵素阻害活性 IC50 (mg茶葉/mL) 2.5 2.1 2.0 d 1.5 b 1.0 0.5 高 0.0 c a 0.004 アフロディア自社山本漢方 A 小谷穀粉 B （高知県産）オリヒロ C 比嘉製茶 D コウジ酸 βアルブチンコウジ酸 β-ｱﾙﾌﾞﾁﾝ（沖縄県産）（海外産） *マッシュルーム由来チロシナーゼ使用、被検液は15%BG抽出液、異なるアルファベットは有意差を示す（P<0.01） SOD相当量（U/g茶葉）抗酸化活性 15,000 a （a）スーパーオキシドアニオン消去活性 10,000 b b b 5,000 c 0 アフロディア山本漢方小谷穀粉オリヒロ比嘉製茶（b）ＤＰＰＨラジカル消去活性 2,000 Trolox相当量（μmol/g茶葉） ⑦ a a 1,500 1,000 ab b 500 bc 0 アフロディア自社山本漢方 A 小谷穀粉 B （高知県産）オリヒロ比嘉製茶 C D （沖縄県産）（海外産） *被検液は15%BG抽出液、異なるアルファベットは有意差を示す（P<0.01）総ポリフェノール含量没食子酸相当量（mg/g茶葉） 100 80 a b c 60 d 40 20 0 e アフロディア自社（高知県産）山本漢方 A 小谷穀粉 B オリヒロ C 比嘉製茶 D （沖縄県産）（海外産） *被検液は15%BG抽出液、異なるアルファベットは有意差を示す（P<0.01） ⑧ 総ポリフェノール含量との相関 0 20 40 60 80 0 α-アミラーゼ阻害活性 IC50 (mg/mL) 1.0 2.0 3.0 R=0.620 4.0 自社茶葉 5.0 6.0 IC50 (mg/mL) 0.0 7.0 8.0 9.0 16,000 スーパーオキシドアニオン消去活性 14,000 μmol/g U/g 12,000 R=0.778 10,000 8,000 6,000 4,000 2,000 0 0 20 40 60 80 100 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 20 40 ⑨ 60 80 100 60 80 100 チロシナーゼ阻害活性 R=0.962 1,800 1,600 1,400 1,200 1,000 800 600 400 200 0 DPPHラジカル消去活性 R=0.985 0 20 総ポリフェノール含量（mg/g茶葉） 40 飲料まとめ ⑩ • α-アミラーゼに対する50%阻害濃度は0.16 mg茶葉/mLであり，市販のグァバ茶葉に比べて4倍以上高い阻害作用を示した。化粧品 • マッシュルーム由来チロシナーゼに対する50%阻害濃度は0.25 mg茶葉/mL であり，市販のグァバ茶葉に比べて3倍以上高い阻害作用を示した。 • スーパーオキシドアニオンおよびDPPHラジカルの消去活性も示し，その活性は市販のグァバ茶葉と同等もしくは高い値が得られた。 • 総ポリフェノール含量は，市販のグァバ茶葉と比べて有意に高い値であった。 • グァバ茶葉の総ポリフェノール含量とこれらの酵素阻害活性および抗酸化活性に正の相関が見られ，ポリフェノールがこれらの酵素の阻害作用や抗酸化活性に寄与していると考えられた。自社（高知県産）グァバ茶葉は総ポリフェノール含量が高く，飲料や化粧品としての優位性が認められた。ご清聴ありがとうございました。たくさんの方々のご協力に感謝しています。本研究は、高知大学が実施する食品産業人材育成事業「土佐フードビジネスクリエーター人材創出事業」の一環として行いました。