2-ビニル-4,6-ジアミノ-s-トリアジンを用いた分子インプリントポリマーの基質認識分子機能解析研究室堀俊和序論序論分子インプリント法とは、認識を目的とした分子を鋳型として重合溶媒中に共存させることにより、その鋳型分子と相補的に相互作用する部位をポリマー内に導入する方法である。 NH2 N N N NH2 2-vinyl-4,6-diamino-striazine (VT) 機能性モノマー O H 2N HN N N O CH2OH O OH OH ウリジン (Urd) N O O CH2OH OH OH シチジン (Cyd) 鋳型分子 NH2 HN H O N N N N H N N N HN H O 複合体形成 O N CH2OH NH2 OH OH PUrd 重合選択的相互作用 HN H O N N H N N N O HN H O CH2OH OH OH 3点相互作用 Fig. 1 分子インプリント法概念図実験実験インプリントポリマーの合成鋳型分子、VT、EGDMAをモル比1:1:5でDMFに溶解し、反応開始剤としてAIBNを添加した溶液をガラス管に入れ、脱気し、窒素雰囲気下で封管後、60℃で24時間重合した。PUrdは、VTに対し0∼1モル比でUrd添加量を変化させたポリマーも調製した。また、VTを用いず他は同条件のポリマーも合成した。重合終了後、ソックスレー脂肪抽出器を用いて、メタノール：水＝1:1溶液で24時間還流し、鋳型分子を除去した。架橋剤 O O O O Ethylene Glycol Dimethacrylate (EGDMA) 高速液体クロマトグラフィー（HPLC)測定 ①保持時間測定ポリマーを乳鉢で粉砕し、分級操作により、粒子径を8∼45μmに揃え、HPLC用カラムに充填した。HPLC（島津LC-10AT）を用いて、保持時間を測定した。 ②保持能の評価 HPLCの測定で得られた保持時間から容量比を算出し、分子インプリントポリマーの基質選択性を評価する指標とした。さらに鋳型分子非共存下で合成したポリマーの容量比k’nonとの相対比 K’(=k’/k’non)を算出し評価した。容量比 k’= (t-t0)/to 相対比 K’= k’/k’non t: 基質の溶出時間 to: 移動相の溶出時間 O H2 N N N HN O CH2OH N H2N OH グアノシン (Guo) OH N N N O CH2 OH N OH OH アデノシン (Ado) Urd、Cyd以外にHPLC測定で基質として用いた分子 IR測定ウラシル（U）、VTを等モル比で45分乳鉢で混合した後、パーキンエルマーFTIR1650型でKBr錠剤による測定を行った。結果結果 2.0 1.8 相対比 K' Eluent: MeOH PCyd 1.6 1.2 1.2 PUrd 1.3 1.1 1.2 1.1 1.1 1.1 Guo Ado 0.8 Urd Cyd 基質分子 Fig. 2 PUrd、PCydの基質認識容量比ｋ ’ 2.5 PUrd Eluent: MeOH 2.0 1.5 1.0 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 Urd/VT Fig. 3 Purdの鋳型仕込み量依存性相対比 K' 2.0 1.8 1.8 1.8 1.6 1.4 1.3 1.2 1.0 MeOH/H2O (90/10) MeOH MeOH/CH3CN (10/90) Eluent(v/v) Fig 4 PUrdのHPLC移動相による影響 3.0 2.5 容量比 k' Eluent: MeOH 2.0 1.0 0.1 0.0 PUrd PUrd Without VT Fig. 5 基質選択性に対する機能性モノマーの効果 νC4=O 1675 1673 νC5=C6 δNH 1720 1742 νC2=O VT Uracil / VT (1 / 1) 1760 1740 4 5 6 HN 3 2 1 NH O 1676 1715 Uracil O 1720 1700 1680 Wavenumber cm-1 Uracil 1660 Fig. 6 IRスペクトル結論結論 • PUrd、PCydはそれぞれ鋳型分子に対する認識能が最も高かったが、 PCydはPUrdに比べて認識能の増加は小さかった。 • 重合時における鋳型分子の存在量の増加に伴って鋳型分子に対する容量比が増加し、機能性モノマー（VT)と等モル比の時、最大値を示した。 • HPLC測定における移動相溶媒の基質認識に与える影響は、プロトン供与性の有無には小さく、誘電率の大きさには強く影響を与えた。 • 機能性モノマー（VT)の有無によって、基質認識能に大きく影響を与えるとともに、VTの3点認識の有効性が立証された。