Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 9 - Clinical Chemistry

Review
Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 9 (PCSK9)： Lessons
Learned from Patients with Hypercholesterolemia
Zuhier Awan1, Alexis Baass2 and Jacques Genest2,*
Author Affiliations
1
2
King Abdulaziz University, Jeddah, Saudi Arabia；
The McGill University Health Centre, Montreal, Canada.
* Address correspondence to this author at： McGill University Health Center/Royal Victoria Hospital,
687 Pine Ave. West, Montreal, QC, Canada H3A 1A1. Fax 514-843-2813； e-mail
[email protected].
Clinical Chemistry 2014； 60： 1380-1389
Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 9 (PCSK9): 家族性高
コレステロール血症患者から学んだ教訓
概要
背景: 第 3 番目の家族性高コレステロール血症(FH)の原因として、PCSK9 遺伝子を同定したこと、
そしてそれに関連する複雑な生物学を理解することが、新しい医薬品の発見につながった。
内容: PCSK9 は小胞体中にて自己触媒性の切断を受け、分泌経路に入る。PCSK9 遺伝子はステロー
ル調節エレメント結合タンパク(sterol regulatory element binding protein, SREBP)＊ 1 および 2 の調節下
にある。スタチンは PCSK9 を増加させるため、この薬物治療によりこの経路の応答が変化するかも
しれない。血中では PCSK9 は、細胞上の LDL レセプターの表皮成長因子様ドメインに結合してお
り、後期のエンドソーム経路にのみ作用して、LDL レセプターを細胞膜にて再利用し、むしろリソ
ソームの分解に働かせている。このように機能欠損型の PCSK9 変異は、血中での LDL 粒子の LDL
レセプターによるエンドサイトーシスの増加や、低コレステロール血症に関係しているにもかかわ
らず、機能獲得型の PCSK9 変異は家族性高コレステロール血症を引き起こす原因となっている。従
って PCSK9 の抑制は、治療の標的として興味深い。現在、PCSK9-LDL レセプターの相互作用が、
アロステリックに抑制するモノクローナル抗体を用いることによって達成された。中等度、重症高
コレステロール血症患者 (FH を含む) を対象に行われている第 2 相、第 3 相臨床試験において、この
治療法が LDL コレステロールや Lp(a)の低下作用に安全で、かつ高い有効性が示されている。
まとめ: PCSK9 は細胞にウイルスを導入することや、インスリン抵抗性、肝組織修復など、in vitro
の研究や動物実験の研究によって、他の生物学的役割を持つことが観察されている。多くのヒトが
＊
訳者注：原文の sterol receptor は誤り
1
この新しい薬物治療を受け、その臨床試験の結果を注意深く評価することにより、初めて治療法と
して確立される。
細胞内タンパク質のプロセシング経路は、転写後の調整、細胞内小器官に転送、また細胞内小器官
から放出、成熟タンパク質に切断ということ等を含む、複雑な経路で構成されている。分泌経路に
入ったタンパク質は、生物学的に不活化前駆物質として合成され、高度に特殊化し、進化の過程で
保存されたタンパク質転換酵素の働きによってタンパク分解が起こる。9 種類の PCSK3 が過去 25 年
間において、それらの広範囲の基質特異性とともに同定された。PCSK ファミリーの最後の種類で
ある PCSK9 は、Seidah らによって同定された(1)。PCSK9 遺伝子 4 が存在している染色体 1p32 は、
Abifadel らによって常染色体優性遺伝の高コレステロール血症に関連する新たな遺伝子座であると
同定され、それは LDLR 遺伝子の変異による FH と臨床的に同様の表現型であることが明らかとな
った(2)。この素晴らしい共同研究において、Abifadel らは、PCSK9 の変異は原因として FH3 に関連
していることを示すことができた。FH3 はフランス人起源の家系において、常染色体優性遺伝の高
コレステロール血症の遺伝的原因として 3 番目に同定された。驚くべきことに FH 表現型は、
PCSK9 の機能獲得型変異の原因と考えられた。
PCSK9 の生化学的役割
PCSK9 は染色体 1p32 の短腕上に位置しており (図 1)、12 個のエキソンと 11 個のイントロンを含む
(3,4)。それは 25kDa の成熟したタンパク質として、血中に分泌されるようにコードされている。
PCSK9 は、プロテイナーゼ K の類似点を共有している点が異なるものの、細菌性スブチラーゼ
(subtilase) ファミリーに属するセリンエステラーゼ様構造を持つ典型的な PCSK である。
図 1 (A) PCSK9 遺伝子は染色体 1p32 の短腕上に位置しており、12 個のエキソンを持っている
成熟した PCSK9 は、シグナルペプチド(SP)とプロセグメント(PRO)、活性ドメインと C-末端ドメイン上にあるシス
テイン/ヒスチジンが多いドメインによって構成される。(B)LDL レセプターの EGF 領域と PCSK9 の間の作用領域
での結晶構造は、表面上が平坦であることが明らかである。(C)変異は家族性高コレステロール血症(機能獲得型,
2
GOF)を引き起こす PCSK9 と同定されたが、LDL コレステロール低下(機能欠損型, LOF)に関係するものも見いださ
れている。
自己触媒的切断
タンパク切断による PCSK9 の唯一知られている基質は、PCSK9 そのものである。PCSK9 全長
(prepro-PCSK9)は、9 つのロイシンが続くシグナルペプチドドメインによって特徴付けられており、
そこで合成されたタンパク質を小胞体 (ER)に導いている。PCSK9 は、シグナルペプチド、プロセグ
メント、P-ドメインではない活性ドメインを持っている。P-ドメインの代わりとして、C-末端ドメ
インにシステイン/ヒスチジンが多いドメインがある。(図 1A) ヒンジ領域は、活性中心ポケットと
システイン/ヒスチジンが多いドメインの間に存在している。ヒンジ（蝶番）領域の機能はよくわか
っていない。小胞体で PCSK9 のシグナルペプチドドメインが一旦切断すると、692 個のアミノ酸は
VFAQ152–SIP で自己触媒性の過程を経る。そのプロセグメントは、急速に活性ドメインを占めるよ
うになるため、この自己触媒性の過程は成熟 PCSK9 のタンパク分解特性を奪うこととなる。この段
階は小胞体から放出されるために必要であり、それは成熟 PCSK9 が小胞体から分泌されることを確
実なものにする(5,6)。真核細胞は、COPII に覆われている小胞で、小胞体からゴルジまで輸送する
ための輸送タンパクを内包している。COPII 構造体である SEC24A は、小胞体からゴルジに PCSK9
の放出を行っている(7)。PCSK9 は大部分が肝臓で生産や分泌され、腎臓や腸では少ない。そして胚
形成期において、中枢神経系でも一過性に発現する。PCSK9 の結晶構造は、2007 年に決定された
(8,9)(図 1B)。活性ドメインの配列解析では、3 つの保存された残基(Asp186, His226, Ser386)が活性部
位を構成することを示し、これらの残基の変異はタンパクを不活性化したり、細胞内で分解に関与
している(9)。分泌した成熟タンパクは、翻訳後修飾や機能基を追加されて、最終的に 3 次元構造を
得る(10)。体循環において、PCSK9 は活性ドメインの 218 番目アミノ酸残基で、フューリン(もしく
は PC5/6A)の酵素的な不活化を受ける(11,12)。フューリンにより分解された PCSK9 は、完全な
PCSK9 と比較して LDL レセプターの調節ができない(13)。しかし、PCSK9 の生物学的機能を調節し
ているとされるフューリンの生物学的意義は、よくわかっていない。
PCSK9 の体循環中アイソフォーム、成熟型、フューリンによる分解型(潜在的な役割)
一旦体循環に入ると、成熟 PCSK9 は LDL レセプターにタンパク間で相互作用することによって、
細胞表面上で LDL レセプターの EGF 前駆体相同ドメインに相互的に影響を及ぼす。これは PCSK9
の活性ドメインに近い領域で起こる(14)。血漿中では体循環中の PCSK9 のおおよそ 40％が、LDL 粒
子によって運ばれ、apoB100 と結合していることが想定されている(15)。
LDL レセプターの調節と、細胞内、細胞外プロセシング
PCSK9 遺伝子 mRNA は、ステロール反応エレメント結合タンパク(SREBP)-1a と 2 よって調節を受
ける。細胞内低コレステロールでは、PCSK9 発現を上方調節する。その効果は、薬物治療(スタチ
ン)の HMG CoA 還元酵素インヒビターによって示された。スタチンは肝臓の LDL レセプター発現
を上方調節し、それは血漿から LDL 粒子を除去することに寄与している。PCSK9 もまたスタチン
による上方調節を受け、そして反対の生物学的効果を提供することによって、スタチンに対する生
3
理学的反応を変化させるかもしれないし、同時にそれはスタチンの潜在的な限界であろう。PCSK9
の機能欠損は、LDL コレステロール濃度とアポリポ蛋白 B (apoB)の産生低下に関係している。これ
らの発見は PCSK9 の発現抑制後に、肝細胞の初期培養において apoB 濃度が減少することと一致す
る(5,16)。PCSK9 は apoB 産生を増加することによって、肝臓でのトリグリセリドの多いリポ蛋白＊
に効果があることが示された(17,18,19)。最近、apoB 代謝での PCSK9 の役割は、腸の細胞でも同様
の働きをすることが報告されている(20)。
Farnesoid X レセプターや PPAR(ペルオキシゾーム増殖活性化レセプター)、HNF1（肝細胞核因子）
を含む肝臓のリガンドによって活性化されたレセプターは、PCSK9 転写を調節する(21)。これらの
調節経路の生理学的意義はよくわかっていない。
PCSK9 プロセグメント複合体は、タンパク間の相互影響によって LDL レセプターの EGF 様(EGF-A)
ドメインに結合する(22)(図 1A)。LDL レセプターと PCSK9 の相互影響関係は、LDL レセプターにリ
ソソームの分解をするように働きかける(23)。分解過程に LDL レセプター/PCSK9 複合体を差し向け
るための鍵となるメカニズムは、まだよくわかっていない(24,25)。PCSK9 プロセグメントドメイン
の N-末端領域(31-52 aa)は、LDL レセプター結合するために必要である(15)。興味深いことに、役割
は少ないが可能性として、生理学的に意義のあるエンドソームやリソソームに、直接的に LDL レセ
プターを向かわせる細胞内経路がある(26)。このように、PCSK9 が LDL レセプターに相互影響する
ことができる 2 つ部位がある(27)。それは肝細胞の表面上（主要な細胞外経路）(27)や、trans Golgi
network (TGN)中である（マイナーである細胞内経路）(26,28)(図 2)。これによって、なぜ PCSK9 の
体循環中の濃度が LDL コレステロールとあまり関係していないのということを、ある程度説明する
ことができるかもしれない(29)。
＊
訳者注：VLDL のこと
4
図 2 肝細胞の理論モデル
(A) LDL レセプターが LDL 粒子と apo B (赤丸)の複合体と結合し、レセプターを介したエンドサイトーシスによっ
て、複合体が細胞内に組み込まれる。LDL レセプターは細胞膜に再循環し、その間に LDL 粒子はエンドソームから
リソソームの分解まで直接的に移動する。PCSK9 は ER で自己触媒性分解をうけ、TGN に輸送される。(B)マイナ
ーな PCSK9 細胞内経路である。(C)大多数の PCSK9 経路はこれである。PCSK9 は血漿中に分泌され、そこで LDL
レセプターの EGF 領域に結合する。細胞内、細胞外での LDL レセプター-PCSK9 複合体は、リソソーム分解に向か
う。
遺伝学とメンデル遺伝ランダム化解析
PCSK9 遺伝子は、タンパク転換酵素スーパーファミリーとは別の遺伝子に相同性があるという特徴
によって、同定されることとなった(1)。染色体 1p32 にあるこの遺伝子は、25kb に及ぶ 12 個のエキ
ソンで構成され、ステロール調節要素(SRE)領域を含んでいる。3731bp の mRNA でコードされてい
る SREBP-1c と SREBP2 は、この遺伝子の発現を増強することが知られている。細胞内コレステロ
ール濃度に関して、SREBP2 による PCSK9 の転写調節が重要である。しかしインスリンもまた、
SREBP-1c による PCSK9 発現を調節することが示された (30,31)。
PCSK9 の変異で一番初めに同定されたものが、S127R 変異である。その後、高い親和性があり、
LDL レセプターの分解増加に関係した機能獲得型 PCSK9 変異がいくつか同定され、それらに F216L
が含まれる(32)。有名なものとしてアングロサクソン D374Y があり、それは LDL レセプターに
PCSK9 の親和性を 100 倍高め、家族性高コレステロール血症をより重症化させる(33)。
機能欠損型の PCSK9 変異はより一般的で、日本人のコホート研究ではじめに同定された(34)。これ
らの変異は LDL レセプターとの親和性の減少に関係しており、このレセプター分解の減少、それに
よって血漿 LDL コレステロールの減少を引き起こす。これらの相対的に一般的な機能欠損型の
PCSK9 多様体の 3 つの効果は、2006 年に Cohen らによって ARIC コホート研究で明らかになった
(図 3)。R46L PCSK9 変異は、大心血管イベントでのリスクを 47％減少させるのみならず、LDL コレ
ステロールを 15％減少させることに関係していた(35)。機能欠損型 PCSK9 C679X 変異は、LDL コ
レステロールをおおよそ 1mmol/L (39mg/dL) 減少させ、アテローム性動脈硬化症を 88％減少させる
ことに関係していた(35)。これは Cholesterol Treatment Trialist’s estimate と比較して、LDL コレステ
ロールの 1mmol/L 減少あたり心循環系のリスクでは、21％の減少があることと非常に対照的である
(36)。メンデル遺伝ランダム化解析の結果では、生涯低 LDL コレステロールであることは、心循環
系の疾病から守られ、LDL 由来コレステロールがアテローム性動脈硬化の原因となることに強い確
証となった。R46L PCSK9 多型は、フランス系カナダ人のような集団で、おそらく創始者効果によ
り頻繁に見られる(37)。これまで同定された変異は図 1.C に示す。
5
図 3 PCSK9 の一般的な機能欠損型変異である R46L は、一生涯で LDL コレステロールをおおよそ
15％減少させ、心循環系リスクを 47％減少さることに関係している(35)
PCSK9 抑制が治療標的となることを、概念的に支持するデータ
概して家族性高コレステロール血症患者のおおよそ 2～3％は、PCSK9 に変異を持っている。LDL
レセプター遺伝子に 3 分の 2 の変異があり、家族性高コレステロール血症 FH２では APOB 遺伝子
に 10％以下の変異がある(38)。あるいは FH 患者の 20％が知られている遺伝子の中に、原因となる
変異は見られない。近年、次世代シークエンサーやバイオインフォマティクスを用いたエキソーム
解析では、2 つの報告された症例に関係して APOE p.Leu167del 変異 (FH4)が同定された(39,40)。FH
患者の 20％は、ゲノムワイド連関研究 (GWAS) で LDL コレステロールに関係した遺伝子多型の集
積を持っているかもしれない。そしてそれらの多型の蓄積効果によって、LDL コレステロールが著
明増加している(38)。GWAS により、PCSK9 多型 (rs11591147, rs28362286, rs6708943) は LDL コレス
テロールの減少や(41)、心循環系のリスクに関係していることを確認した(42)。実際、ほとんどの脂
質遺伝子研究 GWAS によりにおいて、PCSK9 多型が他の遺伝的多型より LDL コレステロールによ
り強い関係性を持っていることがしめされた。
機能欠損型 PCSK9 変異を複合型ヘテロ接合性として持っている若い女性での報告では、血漿中の免
疫的に検出できる PCSK9 がなく、LDL コレステロール濃度が著明低下していた (14mg/dL)。大学を
卒業しており、明らかに肉体的や精神的な障害はなかった(43)。LDL コレステロール欠乏状態の別
型である無 β リポプロテイン血症では*、APOB 遺伝子の常染色体優性アポ B 短縮に関係していて、
結果として LDL 粒子の欠乏が起こる。この変異を有する人は成人するまで正常であったが、肝硬変
や肝癌の症例において、ヘテロ接合体性のアポ B 短縮変異が同定された。これは多分、トリグリセ
リドを多量に含んだリポ蛋白を分泌することができないことにより、脂肪肝になったと思われる
(44)。このように、著明な LDL コレステロール低下作用が異なる臨床経過をもつことは、その疾患
の分子メカニズムに依存するかもしれない。
PCSK9 の臨床生化学
測定技術と挑戦
PCSK9 の血漿(もしくは血清)中での測定は、普通ではない挑戦をもたらした。PCSK9 量の定量する
ためのゴールドスタンダードな方法はいまだにない。PCSK9 mRNA 濃度の結果は、血中での生物学
的活性のある PCSK9 量に必ずしも相関していない(5)。ELISA が一般的に用いられる。抗体の種類
によって、数値は mg/L の範囲で、10～100 倍を超える測定範囲で測定されている(45,46)。さらに
PCSK9 は、血漿中でフューリンによって分解され、生物学的には不活化されるようである。ほとん
どの ELISA の方法では、フューリンによって分解された PCSK9 と、分解されていない PCSK9 の違
いを認識しない。分光光度分析はより正確であるが、血漿中蛋白が低濃度のときでは濃縮作業を必
要とする。この技術により、PCSK9 の循環血漿中での様々な状態の同定が可能である(47,48)。血漿
中での PCSK9 濃度の測定範囲は、健常人で 20~230ng/mL(45)から 10~3000ng/mL の間に変化する(46)。
*
訳者注: 原文では apobetalipoproteinemia とあるが abetalipoproteinemia の間違いであり、しかも、本来な
ら abetalipoproteinemia でなく homozygous hypobetalipoproteinemia とするべきだろう
6
女性は男性と比べて PCSK9 濃度が高い(29,46,49)。生涯で、男女間、青年期、思春期で、PCSK9 濃
度は大きく異なり、おそらくホルモンに関係し、変化しているだろう(49)。女性では、PCSK9 濃度
は閉経後より閉経前で高濃度である。比較して、男性では 50 歳前後では違いはない(46)。興味深い
ことに、血清 PCSK9 は妊娠期間で増加する。しかしながら、濃度は母親の血中より臍帯血中で著し
く低下する(50)。しかしながら、閉経後のエストロゲンは PCSK9 濃度にほとんど影響がない。高エ
ストロゲン投与を行う体外受精を経験した女性は、より低い数値になることが報告されている(51)。
PCSK9 濃度の変動因子(食事と薬物)
地中海沿岸地域の食事は、体重の変化のないメタボリックシンドローム患者において、血漿 PCSK9
濃度を低下させることができた(52)。前述において、PCSK9 mRNA は SREBP-2 の転写調節下にある
と述べた。SREBP-2 は LDL レセプター様遺伝子であり、PCSK9 もまた細胞内ステロール除去や、
HMG CoA 還元酵素インヒビター(スタチン)による治療によって調節される(53)。さらに PCSK9 転写
は空腹時で抑制され、インスリンにより誘導されることが示された(30)。それは肝臓 X レセプター
や SREBP-1 を活性化することによるようである。PCSK9 は、調節のチェックポイントのように振る
舞っており、LDL レセプターの細胞表面上での利用も調節する。この理由は不明確であるが、臨床
的影響はスタチンの治療効果を制限するかもしれない。実際に、いかなるスタチンでもその高用量
の投与では、LDL コレステロール低下作用が漸近したという臨床研究がある(29,31)。まだこの研究
の臨床的意義はよくわかっていない。JUPITER(Justification for the Use of Statins in Primary Prevention:
An Intervention Trial Evaluating Rosuvastatin)研究では、LDL コレステロールのパーセント低下は
PCSK9 濃度では予測することはできないが、PCSK9 値と LDL コレステロール低下の間に意義深い
傾向が観察された。つまり、PCSK9 濃度は HMG CoA 還元酵素の抑制の効率を測るバイオマーカー
になるかもしれないということであるが、これはまだ仮説である(29)。面白いことに、腸でのコレ
ステロール吸収をブロックすることによる LDL コレステロール低下作用の NPCL-1 インヒビターの
エゼチミブは、PCSK9 濃度を変えない(54)。
動物モデル
PCSK9 遺伝子配列は、多種の動物間で保存されている。それはチンパンジー、アカゲザル、マウス、
ラット、ニワトリ、ゼブラフィシュなどである。マウスでのアデノウイルスを用いた PCSK9 発現は、
LDL レセプターノックアウト表現型に関係していた(55)。PCSK9 は、ほとんど初期の parabiosis 実験
＊
によって示されたように、パラクリン様に働く(27)。予想通り、PCSK9 発現トランスジェニックマ
ウスは生存可能であり、高コレステロール血症になる。Apoe ノックアウト下での Pcsk9 トランスジ
ェニックマウスでは、通常の食事を与え続けた時、アテローム性動脈硬化を促進させることと同様
に、プラークの蓄積が見られる。しかしながら保護的な効果が、Pcsk9 と Apoe の両方をノックアウ
トしたマウスで発見された(56)。石灰化アテローム性動脈硬化プラークの進行は、LDL レセプター
ノックアウトマウスより、PCSK9 トランスジェニックマウスで低い度合いとなる(57)。更に近位の
プロモーターとエキソン１を不活化したマウスは、著明な低コレステロール血症であるが、生存、
繁殖可能であり、PCSK9 抑制の効果が研究されている(5)。全 Pcsk9 遺伝子ノックアウトマウスは、
＊
訳者注：二つの動物個体を結合させる
7
見かけ上は普通であり、全コレステロールが 40％下がり、LDL コレステロールが 80％低下した。
全ノックアウトマウスでは、循環コレステロールがおおよそ 42％、肝臓特異性ノックアウトマウス
ではおおよそ 27％低下したことが示された。この結果は肝臓で産生された PCSK9 が、表現型の 3
分の 2 以上の原因となっていることを示す(5)。
上で述べたように、PCSK9 は他のレセプターも標的にするかもしれない。VLDL レセプターは、特
にメスの Pcsk9 ノックアウトマウスでの性腺周囲で、上方調節される。この結果より、これらの
PCSK9 ノックアウトマウスの脂肪細胞では、VLDL レセプターの増加の結果、過度の脂肪酸吸収に
より脂肪組織が肥大化する(8)。反対に血漿トリグリセリド濃度は、PCSK9 ノックアウトマウスのオ
スとメスでわずかに増加する。さらに in vitro の研究では、PCSK9 欠損は食後トリグリセリド値が二
倍減少することに関係していることが示され、トリグリセリド・クリアランスを改善する PCSK9 の
役割が示された(58)。PCSK9 はこのように肝臓 LDL レセプター低下によって、循環コレステロール
を高く維持するので、脂肪代謝に必須の物質である。しかし同時に PCSK9 は、脂肪組織の VLDL レ
セプター分解によって、内臓の脂肪生成を制限する (8)。
PCSK9 の生理学的なはたらき
肝臓再生
肝臓発現という制限付きのノックアウトでは、細胞表面の LDL レセプター発現の増加に関係してい
る。部分的な肝臓除去のようないくつかの代謝ストレス下においての PCSK9 hep(-/-)遺伝子型マウス
は、肝臓再生の遅れや肝臓線維症、壊死性の傷害を示した(5)。これは高コレステロールの食事によ
って予防することができる。さらに、肝臓 PCSK9 hep(-/-)遺伝子型マウスで脂肪吸収は、普通食、高
コレステロール食の両方で著しく低下した。それは肝臓 PCSK9 欠乏が、脂肪肝に抵抗性があること
を示唆している(5)。
インスリン抵抗性
成体マウスでの PCSK9 欠乏は、グルコース耐性を損なう働きをするため、糖尿病のリスクがあるか
もしれない(59)。このメカニズムは、膵臓の β 細胞の脂肪毒性に依存する。これは 1 つの民族研究
で示された。apo E3 または E4 アイソフォームのキャリアに比較して、apo E2 のみのキャリアの人
において、一般的な PCSK9 R46L 機能欠損型変異ではインスリン濃度や、インスリン抵抗性指数や
レプチン濃度のようなインスリン抵抗性のマーカーの増加をもたらす(37)。これはインスリン抵抗
性に関与する、apo E2/PCSK9 遺伝子の相互作用の可能性が示唆される。
神経学的作用
アミロイド β 前駆体タンパク分解酵素 1(BACE1)は、アルツハイマー病でのアミロイド β の生成にお
いて、律速酵素としての働きをする膜タンパクである。BACE1 は小胞体とゴルジ体の中間構成物中
で、リジン残基のアセチル化を一過性に行う。PCSK9 は、アセチル化されていない BACE1 の処理
に寄与している。BACE1 がアミロイド β の除去に必要であり、この発見は興味深いことである。
8
PCSK9 は成人の脳に発現していないので、この発見が臨床的重要性を持つかどうかは不明である
(60)。
癌の転移
明らかにフューリンや PACE4 のようなタンパク転換酵素は、腫瘍の進行に関わることが示されてい
る(61)。PCSK9 野生マウスと PCSK9 ノックアウトマウスでの B16 メラノーマによる脾臓の傷害は、
癌細胞の動きを研究するために行われている。PCSK ノックアウトマウスは、野生マウスと比較し
て肝臓の転移が 50％少なくなった。しかしながら、2 週間、4 週間の間高脂肪の食事によって肥育
したとき、この明確な予防効果は消失した(62)。スタチン試験のメタ解析では、癌発生の頻度の増
加は見られなかったため、この実験の臨床的意義は確かではない(36)。
ウイルス感染
HCV は、HCV に感染した患者の LDL 粒子に関係している。LDL レセプターを介した細胞内侵入が
仮定されている。これより PCSK9 抑制は HCV リスクを増加するかもしれないという理論的可能性
がある。HCV ウイルスは CD81 や SR-BI、Claudin-1 を含む推定上の数である HCV レセプターと相
互作用している(63,64)。多量の PCSK9 は、細胞表面のレセプターを負に調節する効果を持っている。
LDL レセプターや CD81 がウイルスによって細胞膜に接着できるようにするために使われ、そして
ホストを感染させる。In vitro の実験では可溶性の精製 PCSK9 投与が、容量依存的に HCV を抑制し
たことが示された。これは肝臓 CD81 発現が PCSK9 ノックアウトマウスで増加し、PCSK9 が独自に
LDL レセプターの CD81 を下方調節したことが実験によって示された。さらに、PCSK9 の血漿濃度
と活性の両方またはどちらかが、HCV のヒトに対する感染力を調節することができることを提唱し
た(65)。この論議に加えて、スタチンは LDL レセプター濃度と活性を強め、そして PCSK9 を増加、
さらにメカニズムは知られていないが HCV の感染力を低下させる(66)。このように薬理学的に増加
している(例えばスタチンを用いて) PCSK9 は、細胞内にウイルスの侵入を高めるかどうかはまだ確
かではない。
治療上の標的としての PCSK9
過去 10 年間で、基礎科学研究と PCSK9 の発見から、臨床試験第 2 相、初期の第 3 相の完了までの、
経験のないようなトランスレーションが見られた。この研究の本質としては、PCSK9 インヒビター
の潜在的な治療効果が目立っている。先の総説の中で(67)、2’-o-メトキシエチル化チオリン酸エス
テルアンチセンスオリゴヌクレオチドや、核酸アンチセンスオリゴヌクレオチドを含んだいくつか
のアプローチは、更なる臨床試験を中止している。同様に、siRNA は臨床試験第 1 相で用いられて
いたが、後に中止されている。PCSK9 特異的抑制アドネクチン(おおよそ 12kDa)は、臨床試験第 1
相で用いられていたが同様に中止されている。
PCSK9 と LDL レセプター相互間に，低分子物質で抑制するものが理想の治療薬物の代表であろう。
しかしその相互作用は、相対的に平坦なタンパクの表面の間に起こり、この相互作用をブロックす
る低分子物質を開発することが難しい。他の可能性のある手段は、小胞体での PCSK9 の作用をブロ
ックする低分子物質や、小胞体からゴルジ体への輸送を抑制する低分子物質を含む(7)。
9
したがって、アロステリックな抑制を行うモノクローナル抗体(mAb)を用いることは、現在までで
は最善の選択の代表である。いくつかの製薬企業、バイオテクノロジー企業は、高コレステロール
血症の患者で行う臨床試験第 3 相において、mAb を用いている。そして心循環系に高リスクな患者
群での大規模な臨床試験で、心血管イベント調査が始まっている(図 1)。
表1
PCSK9 インヒビターの成績調査 (evolucumab, alirocumab, bococizumab)
10
ODYSSEY [Evaluation of Cardiovascular Outcomes After an Acute Coronary Syndrome During Treatment
With Alirocumab SAR236553 (REGN727)];急性冠症候群後に Alirocumab SAR236553(REGN727)を用い
た治療での心血管イベントの経過評価を行う
FOURIER (Further Cardiovascular Outcomes Research With PCSK9 Inhibition in Subjects With Elevated
Risk);更なる増加したリスク患者で PCSK9 インヒビターを用いた心血管イベント経過研究を行う
SPERE [Evaluation Of PF-04950615 (RN316), In Reducing The Occurrence Of Major Cardiovascular Events
In High Risk Subjects];PF-04950615(RN316)の評価で、高リスク患者での大きな心血管イベントの発症
低下を観察する
Sc;皮下、Q2W;二週間ごと、CHD;冠動脈疾患、CV;心血管系、MI;心筋梗塞
UA;不安定狭心症、ACS;急性冠症候群、PAD;末梢動脈疾患、RF;リスクファクター
LLT;脂質低下治療
現在のところ、広範囲の臨床試験を行った PCSK9 の mAb は 4 種類ある。alirocumab
(Sanofi/Regeneron)、evolocumab (Amgen)、 EFJE (Lilly)、bococizumab (Pfizer)である。初めの 3 つの
mAb は、完全にヒト型であるが、bococizumab はヒト化 mAb である。
臨床試験第 2 相で得られた結果は、現在、evolocumab と alirocumab で報告されている。OSLER や
DECARTES での試験は、スタチン不応性、もしくはスタチンで最適に治療している心血管系高リス
クの家族性高コレステロール血症の患者で行われ、LDL コレステロールが 50~60％減少した。両方
の研究で、薬物と対照薬の両方で、副作用は類似していた。PCSK9 mAb では、リポプロテイン(a)を
おおよそ 30％減少させることが注目に値する。この効果はナイアシンを含む他の種類の脂質低下薬
と比べ、目覚ましい効果である (68,69)。
広範囲な臨床試験第 3 相は、最近仮説を解析するために進められている。それは高投与スタチンや
エゼチミブを併用した最適な医学的な治療に加え、心血管系高リスク患者に投与された PCSK9 mAb
が、より心血管系のイベントを減少するだろうという仮説である(図 1)。成績調査は 60,000 人近く
の心血管系高リスク患者が参加するだろう。そして彼らに無作為的に最適な治療を行い、最近のガ
イドラインにしたがったスタチンによる LDL コレステロール減少、あるいは PCSK9 mAb による治
療が行われる。これらの調査では、心血管系の死亡、非致死性の心筋梗塞、脳卒中、動脈の血行再
建という主要なエンドポイントの減少が検討できるように、統計力が考慮されている。
不確実な領域
いつ PCSK9 を測るべきか
PCSK9 測定の臨床的有用性は、不確実である。前述において、測定技術は難解な結果を生んでいる。
血漿全 PCSK9 濃度は、PCSK9 の生物学的活性を反映していないかもしれない。そして PCSK9 濃度
11
とスタチン治療の結果の間に、相関性の欠落があった。このように PCSK9 濃度の測定は、当分の間、
臨床応用に限定された研究手段として存在することとなるだろう。
PCSK9 抑制が避けられなければならない状況はあるか(動物実験からの推定)
現在まで報告された臨床試験で、これらの薬剤の副作用について安全が証明されている。12 週間か
ら１２ヶ月の PCSK9 mAb 抗体治療において、数 1000 人の患者では激しい急性毒性は示さなかった。
PCSK9 欠乏における HCV のホストへの侵入、糖尿病発症、肝臓外科手術後の回復、癌転移、神経
認知障害のような理論的な懸念は、進行中の臨床試験において、そのようなまれな事象を追跡する
ように監督機関を促さなければならない。どの薬剤においても同様に、PCSK9 インヒビターは妊娠
中には用いてはならない。
PCSK9 治療は標準的なケアとなるだろうか、併用療法なのか、単一療法なのか？
LDL コレステロールを下げる PCSK9 mAb の有効性については疑念がない。高コレステロール血症
患者、家族性高コレステロール血症患者において、PCSK9 mAb を付け加えることは、LDL コレス
テロールが、スタチン、もしくはエゼチミブ（胆汁酸レジンの有無と共に）の最適な使用で下がら
なかった患者で、治療のスタンダードになることはありそうなことであろう。国のガイドラインの
治療の目的に達しなかった、もしくはスタチン不応性の心血管系高リスク患者群での臨床試験第 3
相の検討の結果が重要であろう。最後に、心血管系高リスク、高コレステロールの患者群の一次予
防のために PCSK9 mAb を使用することは、ジェネリック・スタチンのコストと比較して、これら
の PCSK9 mAb の薬剤のコストは経済上での大きな負担となるだろう。
Alirocumab に関する公表データ(70)は、LDL コレステロールの低下に関して、アトルバスタチン
80mg あるいはプラセボにおいて、相加効果をほとんど持っていなかったことを示している。そのよ
うなデータは、PCSK9 mAb を支持して、スタチン治療を放棄するように内科医と患者を促すかもし
れない。しかし現在のスタチンの安全性及び有効性のデータが示すように、このような考えは薦め
ることはできない。
（訳者：稲津明広、四ツ谷拓歩、藤井允大）
Footnotes
3
Nonstandard abbreviations:
PCSK,
proprotein convertase subtilisin/kexin proprotein;
FH,
familial hypercholesterolemia;
LDL-R,
LDL receptor;
FH,
familial hypercholesterolemia;
ER,
endoplasmic reticulum;
12
EGF,
epidermal growth factor;
LDL-C,
LDL cholesterol;
SREBP,
sterol responsive element binding protein;
HMG CoA R,
hydroxymethylglutaryl coenzyme A reductase;
TGN,
trans Golgi network;
SRE,
sterol regulatory element;
GWAS,
genome-wide association studies;
TG,
transgenic;
KO,
knockout;
APP,
amyloid precursor protein;
BACE1,
β-site APP-cleaving enzyme 1;
HCV,
hepatitis C virus;
mAb,
monoclonal antibody.
4
Genes:
PCSK9,
proprotein convertase subtilisin/kexin type 9;
LDLR,
low-density lipoprotein receptor;
APOB,
apolipoprotein B;
Apoe,
apolipoprotein E.
Author Contributions: All authors confirmed they have contributed to the intellectual content of this
paper and have met the following 3 requirements: (a) significant contributions to the conception and
design, acquisition of data, or analysis and interpretation of data; (b) drafting or revising the article for
intellectual content; and (c) final approval of the published article.
Authors' Disclosures or Potential Conflicts of Interest: Upon manuscript submission, all authors
completed the author disclosure form. Disclosures and/or potential conflicts of interest:
Employment or Leadership: None declared.
Consultant or Advisory Role: J. Genest, Amgen and Sanofi.
Stock Ownership: None declared.
13
Honoraria: J. Genest, Amgen and Sanofi.
Research Funding: None declared.
Expert Testimony: None declared.
Patents: None declared.
Received for publication July 7, 2014.
Accepted for publication August 28, 2014.
© 2014 American Association for Clinical Chemistry
References
1. Seidah NG, Benjannet S, Wickham L, Marcinkiewicz J, Jasmin SB, Stifani S, et al. The secretory
proprotein convertase neural apoptosis-regulated convertase 1 (NARC-1): liver regeneration and
neuronal differentiation. Proc Natl Acad Sci U S A 2003;100:928–33.
2. Abifadel M, Varret M, Rabès JP, Allard D, Ouguerram K, Devillers M, et al. Mutations in PCSK9 cause
autosomal dominant hypercholesterolemia. Nat Genet 2003;34:154–6.
3. Seidah NG, Prat A. The proprotein convertases are potential targets in the treatment of dyslipidemia. J
Mol Med 2007;85:685–96.
4. Davignon J, Dubuc G, Seidah NG. The influence of PCSK9 polymorphisms on serum low-density
lipoprotein cholesterol and risk of atherosclerosis. Curr Atheroscler Rep 2010;12:308–15.
5. Zaid A, Roubtsova A, Essalmani R, Marcinkiewicz J, Chamberland A, Hamelin J, et al. Proprotein
convertase subtilisin/kexin type 9 (PCSK9): hepatocyte-specific low-density lipoprotein receptor
degradation and critical role in mouse liver regeneration. Hepatology 2008;48:646–54.
6. Seidah NG, Mayer G, Zaid A, Rousselet E, Nassoury N, Poirier S, et al. The activation and
physiological functions of the proprotein convertases. Int J Biochem Cell Biol 2008;40:1111–25.
7. Chen XW, Wang H, Bajaj K, Zhang P, Meng ZX, Ma D, et al. SEC24A deficiency lowers plasma
cholesterol through reduced PCSK9 secretion. Elife 2013;2:e00444.
8. Cunningham D, Danley DE, Geoghegan KF, Griffor MC, Hawkins JL, Subashi TA, et al. Structural
and biophysical studies of PCSK9 and its mutants linked to familial hypercholesterolemia. Nat Struct Mol
Biol 2007;14:413–9.
9. Piper DE, Jackson S, Liu Q, Romanow WG, Shetterly S, Thibault ST, et al. The crystal structure of
PCSK9: a regulator of plasma LDL-cholesterol. Structure 2007;15:545–52.
10. Seidah NG. PCSK9 as a therapeutic target of dyslipidemia. Expert Opin Ther Targets 2009;13:19–28.
14
11. Benjannet S, Rhainds D, Hamelin J, Nassoury N, Seidah NG. The proprotein convertase (PC) PCSK9
is inactivated by furin and/or PC5/6A: functional consequences of natural mutations and posttranslational modifications. J Biol Chem 2006;281:30561–72.
12. Essalmani R, Susan-Resiga D, Chamberland A, Abifadel M, Creemers JW, Boileau C, et al. In vivo
evidence that furin from hepatocytes inactivates PCSK9. J Biol Chem 2011;286:4257–63.
13. Han B, Eacho PI, Knierman MD, Troutt JS, Konrad RJ, Yu X, et al. Isolation and characterization of
the circulating truncated form of PCSK9. J Lipid Res 2014;55:1505–14.
14. Kwon HJ, Lagace TA, McNutt MC, Horton JD, Deisenhofer J. Molecular basis for LDL receptor
recognition by PCSK9. Proc Natl Acad Sci U S A 2008;105:1820–5.
15. Kosenko T, Golder M, Leblond G, Weng W, Lagace TA. Low density lipoprotein binds to proprotein
convertase subtilisin/kexin type-9 (PCSK9) in human plasma and inhibits PCSK9-mediated low density
lipoprotein receptor degradation. J Biol Chem 2013;288:8279–88.
16. Rashid S, Curtis DE, Garuti R, Anderson NN, Bashmakov Y, Ho YK, et al. Decreased plasma
cholesterol and hypersensitivity to statins in mice lacking Pcsk9. Proc Natl Acad Sci U S A
2005;102:5374–9.
17. Tavori H, Fan D, Blakemore JL, Yancey PG, Ding L, Linton MF, Fazio S. Serum proprotein
convertase subtilisin/kexin type 9 and cell surface low-density lipoprotein receptor: evidence for a
reciprocal regulation. Circulation 2013;127:2403–13.
18. Ouguerram K, Chetiveaux M, Zair Y, Costet P, Abifadel M, Varret M, et al. Apolipoprotein B100
metabolism in autosomal-dominant hypercholesterolemia related to mutations in PCSK9. Arterioscler
Thromb Vasc Biol 2004;24:1448–53.
19. Sun H, Samarghandi A, Zhang N, Yao Z, Xiong M, Teng BB. Proprotein convertase subtilisin/kexin
type 9 interacts with apolipoprotein B and prevents its intracellular degradation, irrespective of the lowdensity lipoprotein receptor. Arterioscler Thromb Vasc Biol 2012;32:1585–95.
20. Rashid S, Tavori H, Brown PE, Linton MF, He J, Giunzioni I, Fazio S. Proprotein convertase
subtilisin kexin type 9 promotes intestinal overproduction of triglyceride-rich apolipoprotein B
lipoproteins through both low-density lipoprotein receptor-dependent and -independent mechanisms.
Circulation 2014;130:431–41.
21. Lambert G, Jarnoux AL, Pineau T, Pape O, Chetiveaux M, Laboisse C, et al. Fasting induces
hyperlipidemia in mice overexpressing proprotein convertase subtilisin kexin type 9: lack of modulation of
very-low-density lipoprotein hepatic output by the low-density lipoprotein receptor. Endocrinology
2006;147:4985–95.
22. Zhang DW, Lagace TA, Garuti R, Zhao Z, McDonald M, Horton JD, et al. Binding of proprotein
convertase subtilisin/kexin type 9 to epidermal growth factor-like repeat A of low density lipoprotein
receptor decreases receptor recycling and increases degradation. J Biol Chem 2007;282:18602–12.
23. Konrad RJ, Troutt JS, Cao G. Effects of currently prescribed LDL-C-lowering drugs on PCSK9 and
implications for the next generation of LDL-C-lowering agents. Lipids Health Dis 2011;10:38.
15
24. Saavedra YG, Day R, Seidah NG. The M2 module of the Cys-His-rich domain (CHRD) of PCSK9
protein is needed for the extracellular low-density lipoprotein receptor (LDLR) degradation pathway. J
Biol Chem 2012;287:43492–501.
25. Qian YW, Schmidt RJ, Zhang Y, Chu S, Lin A, Wang H, et al. Secreted PCSK9 downregulates low
density lipoprotein receptor through receptor-mediated endocytosis. J Lipid Res 2007;48:1488–98.
26. Poirier S, Mayer G, Poupon V, McPherson PS, Desjardins R, Ly K, et al. Dissection of the endogenous
cellular pathways of PCSK9-induced low density lipoprotein receptor degradation: evidence for an
intracellular route. J Biol Chem 2009;284:28856–64.
27. Lagace TA, Curtis DE, Garuti R, McNutt MC, Park SW, Prather HB, et al. Secreted PCSK9 decreases
the number of LDL receptors in hepatocytes and in livers of parabiotic mice. J Clin Invest
2006;116:2995–3005.
28. Nassoury N, Blasiole DA, Tebon Oler A, Benjannet S, Hamelin J, Poupon V, et al. The cellular
trafficking of the secretory proprotein convertase PCSK9 and its dependence on the LDLR. Traffic
2007;8:718–32.
29. Awan Z, Seidah NG, MacFadyen JG, Benjannet S, Chasman DI, Ridker PM, Genest J. Rosuvastatin,
proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 concentrations, and LDL cholesterol response: the JUPITER
trial. Clin Chem 2012;58:183–9.
30. Costet P, Cariou B, Lambert G, Lalanne F, Lardeux B, Jarnoux AL, et al. Hepatic PCSK9 expression
is regulated by nutritional status via insulin and sterol regulatory element-binding protein 1c. J Biol Chem
2006;281:6211–8.
31. Dubuc G, Chamberland A, Wassef H, Davignon J, Seidah NG, Bernier L, et al. Statins upregulate
PCSK9, the gene encoding the proprotein convertase neural apoptosis-regulated convertase-1 implicated
in familial hypercholesterolemia. Arterioscler Thromb Vasc Biol 2004;24:1454–9.
32. Abifadel M, Rabès JP, Devillers M, Munnich A, Erlich D, Junien C, et al. Mutations and
polymorphisms in the proprotein convertase subtilisin kexin 9 (PCSK9) gene in cholesterol metabolism
and disease. Hum Mutat 2009;30:520–9.
33. Timms KM, Wagner S, Samuels ME, Forbey K, Goldfine H, Jammulapati S, et al. A mutation in
PCSK9 causing autosomal-dominant hypercholesterolemia in a Utah pedigree. Hum Genet
2004;114:349–53.
34. Shioji K, Mannami T, Kokubo Y, Inamoto N, Takagi S, Goto Y, et al. Genetic variants in PCSK9
affect the cholesterol level in Japanese. J Hum Genet 2004;49:109–14.
35. Cohen JC, Boerwinkle E, Mosley TH, Hobbs HH. Sequence variations in PCSK9, low LDL, and
protection against coronary heart disease. N Engl J Med 2006;354:1264–72.
36. Mihaylova B, Emberson J, Blackwell L, Keech A, Simes J, et alCholesterol Treatment Trialists' (CTT)
Collaborators, Mihaylova B, Emberson J, Blackwell L, Keech A, Simes J, et al. The effects of lowering
LDL cholesterol with statin therapy in people at low risk of vascular disease: meta-analysis of individual
data from 27 randomised trials. Lancet 2012;380:581–90.
16
37. Awan Z, Delvin EE, Levy E, Genest J, Davignon J, Seidah NG, et al. Regional distribution and
metabolic effect of PCSK9 insLEU and R46L gene mutations and apoE genotype. Can J Cardiol
2013;29:927–33.
38. Talmud PJ, Shah S, Whittall R, Futema M, Howard P, Cooper JA, et al. Use of low-density lipoprotein
cholesterol gene score to distinguish patients with polygenic and monogenic familial
hypercholesterolaemia: a case-control study. Lancet 2013;381:1293–301.
39. Marduel M, Ouguerram K, Serre V, Bonnefont-Rousselot D, Marques-Pinheiro A, Erik Berge K, et al.
Description of a large family with autosomal dominant hypercholesterolemia associated with the APOE
p.Leu167del mutation. Hum Mutat 2013;34:83–7.
40. Awan Z, Choi HY, Stitziel N, Ruel I, Bamimore MA, Husa R, Gagnon MH, et al. APOE p.Leu167del
mutation in familial hypercholesterolemia. Atherosclerosis 2013;231:218–22.
41. Lange LA, Hu Y, Zhang H, Xue C, Schmidt EM, Tang ZZ, et al. Whole-exome sequencing identifies
rare and low-frequency coding variants associated with LDL cholesterol. Am J Hum Genet 2014;94:233–
45.
42. Peloso GM, Auer PL, Bis JC, Voorman A, Morrison AC, Stitziel NO, et al. Association of lowfrequency and rare coding-sequence variants with blood lipids and coronary heart disease in 56,000
whites and blacks. Am J Hum Genet 2014;94:223–32.
43. Zhao Z, Tuakli-Wosornu Y, Lagace TA, Kinch L, Grishin NV, Horton JD, et al. Molecular
characterization of loss-of-function mutations in PCSK9 and identification of a compound heterozygote.
Am J Hum Genet 2006;79:514–23.
44. Welty FK. Hypobetalipoproteinemia and abetalipoproteinemia. Curr Opin Lipidol 2014;25:161–8.
45. Dubuc G, Tremblay M, Paré G, Jacques H, Hamelin J, Benjannet S, et al. A new method for
measurement of total plasma PCSK9: clinical applications. J Lipid Res 2010;51:140–9.
46. Lakoski SG, Lagace TA, Cohen JC, Horton JD, Hobbs HH. Genetic and metabolic determinants of
plasma PCSK9 levels. J Clin Endocrinol Metab 2009;94:2537–43.
47. Dewpura T, Mayne J. Analyses of PCSK9 post-translational modifications using time-of-flight mass
spectrometry. Methods Mol Biol 2011;768:167–87.
48. Krastins B, Prakash A, Sarracino DA, Nedelkov D, Niederkofler EE, Kiernan UA, et al. Rapid
development of sensitive, high-throughput, quantitative and highly selective mass spectrometric targeted
immunoassays for clinically important proteins in human plasma and serum. Clin Biochem 2013;46:399–
410.
49. Baass A, Dubuc G, Tremblay M, Delvin EE, O'Loughlin J, Levy E, et al. Plasma PCSK9 is associated
with age, sex, and multiple metabolic markers in a population-based sample of children and adolescents.
Clin Chem 2009;55:1637–45.
50. Peticca P, Raymond A, Gruslin A, Cousins M, Adetola E, Abujrad H, et al. Human serum PCSK9 is
elevated at parturition in comparison to nonpregnant subjects while serum PCSK9 from umbilical cord
blood is lower compared to maternal blood. ISRN Endocrinol 2013;2013:341632.
17
51. Persson L, Henriksson P, Westerlund E, Hovatta O, Angelin B, Rudling M. Endogenous estrogens
lower plasma PCSK9 and LDL cholesterol but not Lp(a) or bile acid synthesis in women. Arterioscler
Thromb Vasc Biol 32:810–4.
52. Richard C, Couture P, Desroches S, Benjannet S, Seidah NG, Lichtenstein AH, Lamarche B. Effect of
the Mediterranean diet with and without weight loss on surrogate markers of cholesterol homeostasis in
men with the metabolic syndrome. Br J Nutr 2012;107:705–11.
53. Ason B, Tep S, Davis HR Jr., Xu Y, Tetzloff G, Galinski B, et al. Improved efficacy for ezetimibe and
rosuvastatin by attenuating the induction of PCSK9. J Lipid Res 2011;52:679–87.
54. Berthold HK, Seidah NG, Benjannet S, Gouni-Berthold I. Evidence from a randomized trial that
simvastatin, but not ezetimibe, upregulates circulating PCSK9 levels. PLoS One 2013;8:e60095.
55. Maxwell KN, Breslow JL. Adenoviral-mediated expression of Pcsk9 in mice results in a low-density
lipoprotein receptor knockout phenotype. Proc Natl Acad Sci U S A 2004;101:7100–5.
56. Denis M, Marcinkiewicz J, Zaid A, Gauthier D, Poirier S, Lazure C, et al. Gene inactivation of
proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 reduces atherosclerosis in mice. Circulation 2012;125:894–
901.
57. Awan Z, Denis M, Bailey D, Giaid A, Prat A, Goltzman D, et al. The LDLR deficient mouse as a
model for aortic calcification and quantification by micro-computed tomography. Atherosclerosis
2011;219:455–62.
58. Le May C, Kourimate S, Langhi C, Chétiveaux M, Jarry A, Comera C, et al. Proprotein convertase
subtilisin kexin type 9 null mice are protected from postprandial triglyceridemia. Arterioscler Thromb
Vasc Biol 2009;29:684–90.
59. Mbikay M, Sirois F, Mayne J, Wang GS, Chen A, Dewpura T, et al. PCSK9-deficient mice exhibit
impaired glucose tolerance and pancreatic islet abnormalities. FEBS Lett 2010;584:701–6.
60. Jonas MC, Costantini C, Puglielli L. PCSK9 is required for the disposal of non-acetylated
intermediates of the nascent membrane protein BACE1. EMBO Rep 2008;9:916–22.
61. Bassi DE, Mahloogi H, Klein-Szanto AJ. The proprotein convertases furin and PACE4 play a
significant role in tumor progression. Mol Carcinog 2000;28:63–9.
62. Sun X, Essalmani R, Day R, Khatib AM, Seidah NG, Prat A. Proprotein convertase subtilisin/kexin
type 9 deficiency reduces melanoma metastasis in liver. Neoplasia 2012;14:1122–31.
63. André P, Perlemuter G, Budkowska A, Bréchot C, Lotteau V. Hepatitis C virus particles and
lipoprotein metabolism. Semin Liver Dis 2005;25:93–104.
64. Meredith LW, Wilson GK, Fletcher NF, McKeating JA. Hepatitis C virus entry: beyond receptors. Rev
Med Virol 2012;22:182–93.
65. Labonté P, Begley S, Guévin C, Asselin MC, Nassoury N, Mayer G, et al. PCSK9 impedes hepatitis C
virus infection in vitro and modulates liver CD81 expression. Hepatology 2009;50:17–24.
18
66. Ikeda M, Abe K, Yamada M, Dansako H, Naka K, Kato N. Different anti-HCV profiles of statins and
their potential for combination therapy with interferon. Hepatology 2006;44:117–25.
67. Seidah NG. Proprotein convertase subtilisin kexin 9 (PCSK9) inhibitors in the treatment of
hypercholesterolemia and other pathologies. Curr Pharm Des 2013;19:3161–72.
68. Koren MJ, Giugliano RP, Raal FJ, Sullivan D, Bolognese M, Langslet G, et al. Efficacy and safety of
longer-term administration of evolocumab (AMG 145) in patients with hypercholesterolemia: 52-week
results from the Open-Label Study of Long-Term Evaluation Against LDL-C (OSLER) randomized trial.
Circulation 2014;129:234–43.
69. Blom DJ, Hala T, Bolognese M, Lillestol MJ, Toth PD, Burgess L, et al. A 52-week placebo-controlled
trial of evolocumab in hyperlipidemia. N Engl J Med 2014;370:1809–19.
70. Roth EM, McKenney JM, Hanotin C, Asset G, Stein EA. Atorvastatin with or without an antibody to
PCSK9 in primary hypercholesterolemia. N Engl J Med 2012;367:1891–900.
19

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