特集 酸化ストレス

[
特
集
]
酸
化
ス
ト
レ
ス
特集
酸化ストレス
B
タンパク質の酸化
【タンパク質の酸化】
シ
グ
ナ
ル
伝
達
タンパク質はその多様性と複雑性のため、活性酸素種によるダメー
の一般的なマーカーです。どちらのマーカーも非常に安定で、ELISA
ジを最も受けやすいターゲットとなります。タンパク質酸化の最も一般
やウェスタンブロットで簡単に測定できます。加えて、酸化ストレスは酸
的なマーカーは、リジン、アルギニン、プロリン、スレオニン残基におけ
化 ダメージ の 安 定 な 副 産 物 で、簡 単に検 出できる終 末 糖 化 産 物
るカルボニル生成です。3-ニトロチロシンも酸化タンパク質ダメージ
(AGEs)
またはタンパク質過酸化物
(AOPP)
の生成をもたらします。
Cosmo Bio would like to acknowledge and thank the Cell Biolabs Inc. for providing Oxidative Stress information presented here.
カルボニル化タンパク質ウェスタンブロット検出キット
生体内タンパク質の酸化レベルを特異的に検出できるキット
細
胞
培
養
・
細
胞
工
学
●操作時間を大幅に短縮
特 長
サンプルを電気泳動前に一本ずつ処理する必要がありません。
●分子量の移動度の違いが起こりません
既存の方法ではサンプルをあらかじめDNPHと反応させた後に泳
動を行うため、期待される分子量とは異なる移動度でタンパク質
が泳動される等、カルボニル化タンパク質の同定が非常に困難で
図1 2,000倍希釈ウサギ抗DNP抗体で検出した実験例
DNPH(+):DNPH in 2 N HClで処理 酸化BSA 0.1b
(左)
、マウス肝臓抽出物 5b
(右)
DNPH(-):2 N HClのみで処理 酸化BSA 0.1b
(左)
、マウス肝臓抽出物 5b
(右)
CBB染色:タンパク質をクマシー染色
した。本キットでは、泳動後、タンパク質を膜転写し、膜上でタンパ
ク質のDNPH誘導体化を行うため、移動度の違いが起こりません。
バ
イ
オ
メ
デ
ィ
カ
ル
品 名/構成内容
品 番
ROIK03
Carbonyl Protein Western Blot Kit
株式会社シマ研究所
略号SML
希望販売価格
¥50,000
貯 蔵
4
包 装
1 kit
●ウサギ抗DNPポリクローナル抗体 ●10x2,4-Dinitrophenylhydrazine(DNPH)溶液 ●酸化タンパク質(酸化BSA)
タンパク質カルボニル化アッセイ
【OxiSelect™ タンパク質カルボニル化イムノアッセイ】
簡単にタンパク質のカルボニル化を検出します!
構成内容
汎
用
●DNP抗体
●HRP標識二次抗体
●コントロール
●DNPH溶液(10×)
受
託
サ
ー
ビ
ス
図1
図2 イムノブロットデータ
酸化タンパク質イムノブロット用コントロール(品番:STA-309)をニトロセルロース膜にブロットした。そ
の後、膜をDNPHの存在下(右)/非存在下(左)でインキュベーションした。誘導化されたカルボニル-BSA
をDNP抗体で検出した。
アッセイ原理
品 名
OxiSelect™ Protein Oxidation Immunoblot Kit(Protein Carbonyl)
Protein Oxidation Immunoblot Control(Carbonyl-BSA)
品 番
STA-308
STA-309
包 装
1 kit
100 B
Cell Biolabs Inc.
略号CBL
希望販売価格
¥61,000
¥31,000
貯 蔵
4 5
4
Cell Biolabs Inc.
略号CBL
関連商品 OxiSelect™ タンパク質カルボニル化ELISAキット
測定項目
機
器
Protein
Carbonyl
4
適用サンプル
測定範囲
精製タンパク質、血漿、 10 B/F∼4 C/F
血清、細胞ライセート
Cosmo Bio News No.78
感 度
特記事項
10 B/F
競合法
コート済 コント スタン 酵素
その他
抗体 プレート
基質
品 番
プレート ロール ダード 標識体
試薬
●
●
●
●
●
●
STA-310
包 装
96 test
希望販売
価格
¥117,000
貯 蔵
4 5