[ 特 集 ] 酸 化 ス ト レ ス 特集 酸化ストレス B タンパク質の酸化 【タンパク質の酸化】 シ グ ナ ル 伝 達 タンパク質はその多様性と複雑性のため、活性酸素種によるダメー の一般的なマーカーです。どちらのマーカーも非常に安定で、ELISA ジを最も受けやすいターゲットとなります。タンパク質酸化の最も一般 やウェスタンブロットで簡単に測定できます。加えて、酸化ストレスは酸 的なマーカーは、リジン、アルギニン、プロリン、スレオニン残基におけ 化 ダメージ の 安 定 な 副 産 物 で、簡 単に検 出できる終 末 糖 化 産 物 るカルボニル生成です。3-ニトロチロシンも酸化タンパク質ダメージ (AGEs) またはタンパク質過酸化物 (AOPP) の生成をもたらします。 Cosmo Bio would like to acknowledge and thank the Cell Biolabs Inc. for providing Oxidative Stress information presented here. カルボニル化タンパク質ウェスタンブロット検出キット 生体内タンパク質の酸化レベルを特異的に検出できるキット 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 ●操作時間を大幅に短縮 特 長 サンプルを電気泳動前に一本ずつ処理する必要がありません。 ●分子量の移動度の違いが起こりません 既存の方法ではサンプルをあらかじめDNPHと反応させた後に泳 動を行うため、期待される分子量とは異なる移動度でタンパク質 が泳動される等、カルボニル化タンパク質の同定が非常に困難で 図1 2,000倍希釈ウサギ抗DNP抗体で検出した実験例 DNPH(+):DNPH in 2 N HClで処理 酸化BSA 0.1b (左) 、マウス肝臓抽出物 5b (右) DNPH(-):2 N HClのみで処理 酸化BSA 0.1b (左) 、マウス肝臓抽出物 5b (右) CBB染色:タンパク質をクマシー染色 した。本キットでは、泳動後、タンパク質を膜転写し、膜上でタンパ ク質のDNPH誘導体化を行うため、移動度の違いが起こりません。 バ イ オ メ デ ィ カ ル 品 名/構成内容 品 番 ROIK03 Carbonyl Protein Western Blot Kit 株式会社シマ研究所 略号SML 希望販売価格 ¥50,000 貯 蔵 4 包 装 1 kit ●ウサギ抗DNPポリクローナル抗体 ●10x2,4-Dinitrophenylhydrazine(DNPH)溶液 ●酸化タンパク質(酸化BSA) タンパク質カルボニル化アッセイ 【OxiSelect™ タンパク質カルボニル化イムノアッセイ】 簡単にタンパク質のカルボニル化を検出します! 構成内容 汎 用 ●DNP抗体 ●HRP標識二次抗体 ●コントロール ●DNPH溶液(10×) 受 託 サ ー ビ ス 図1 図2 イムノブロットデータ 酸化タンパク質イムノブロット用コントロール(品番:STA-309)をニトロセルロース膜にブロットした。そ の後、膜をDNPHの存在下(右)/非存在下(左)でインキュベーションした。誘導化されたカルボニル-BSA をDNP抗体で検出した。 アッセイ原理 品 名 OxiSelect™ Protein Oxidation Immunoblot Kit(Protein Carbonyl) Protein Oxidation Immunoblot Control(Carbonyl-BSA) 品 番 STA-308 STA-309 包 装 1 kit 100 B Cell Biolabs Inc. 略号CBL 希望販売価格 ¥61,000 ¥31,000 貯 蔵 4 5 4 Cell Biolabs Inc. 略号CBL 関連商品 OxiSelect™ タンパク質カルボニル化ELISAキット 測定項目 機 器 Protein Carbonyl 4 適用サンプル 測定範囲 精製タンパク質、血漿、 10 B/F∼4 C/F 血清、細胞ライセート Cosmo Bio News No.78 感 度 特記事項 10 B/F 競合法 コート済 コント スタン 酵素 その他 抗体 プレート 基質 品 番 プレート ロール ダード 標識体 試薬 ● ● ● ● ● ● STA-310 包 装 96 test 希望販売 価格 ¥117,000 貯 蔵 4 5
© Copyright 2024 ExpyDoc