アプリケーション別精製ストラテジーガイド 組換えタンパク質の精製 ̶ 応用例 応用例２：封入体からの精製例 ●6 M塩酸グアニジン存在下での精製例 HiTrap Chelating を用いた (His)10-Tagged protein の精製 カ ラ ム ： HiTrap Chelating HP 1 ml 金 属 イ オ ン ： Ni 2+ サ ン プ ル ： (His)10-tagged protein を含む可溶化封入体 可溶化バッファー ： 塩酸グアニジン、100 mM イミダゾール 結 合 バ ッ フ ァ ー ： リン酸ナトリウム、6 M 塩酸グアニジン、100 mM イミダゾール、pH 7.4 溶 出 バ ッ フ ァ ー ： リン酸ナトリウム、6 M 塩酸グアニジン、500 mM イミダゾール、pH 7.4 S D S - P A G E ： PhastGel Gradient 10-15 染 色 ： Silver Staining Kit, Protein レ ー ン 1 、 7 ： LMW Marker Kit レ ー ン 2 ： 細胞抽出画分 レ ー ン 3 ： 素通り画分 レ ー ン 4 ： 洗浄画分 レ ー ン 5 ： 溶出画分（最初の 2 ml） レ ー ン 6 ： 溶出画分（最初の 2 ml） タンパク質の発現と精製 4 注） (His)10-tagged protein は Dr. C. Fullert と S.Brasher, Department of Biochemistry, University of Cambridge, UK のご厚意により提供されたものです。 4-5 www.gelifesciences.co.jp
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