□ 2 穴チェック □危険ライン □ロゴチェック 12 フナコシニュース 2010 年 4 月増刊号 ● http://www.funakoshi.co.jp/ タンパク質／酵素 タンパク質／酵素 エピトープタグ タンパク質／酵素 精製 His タグ融合タンパク質を簡便，迅速に精製 エピトープタグ 精製 各種タグ融合タンパク質の精製に His-Spin Protein Miniprep Kit Vector Fusion-Aid Kit スピンカラムとニッケルアガロースゲルを使用した簡便な方 法で，細胞抽出液やタンパク質混合液などの試料から，わずか 5 分で His タグ融合タンパク質を精製できるキットです。 スピンカラムを用いて各種タグ融合タンパク質を迅速に精製 するキットです。 特 長 特 長 ◆ 安定な疎水性のスペーサーアームを介して各種の抗タグ抗体（GFP, ◆ 精製した His タグ融合タンパク質は，SDS-PAGE 後の CBB 染色像 HA, MBP, c-Myc）がアガロースゲルに固定化されています。 で，単一バンドとして検出される純度です。 ◆ 得られた His タグ融合タンパク質は SDS-PAGE の他，酵素反応や 生化学的な実験など様々な用途に使用できます。 Fusion-Aid HA Kit により， HA 融合タンパク質を精製した。 ◆ 収量：＜ 1 mg ◆ 溶出液量：100 ∼ 200 μl（通常 150 μl） lane lane lane lane C-terminal domain of West Nile Methyl binding β-galactosidase virus protein E domain of MeCP2 Marker kDa Cell Purified Cell Purified Cell Purified Extract Protein Extract Protein Extract Protein 200 116 66.2 1：分子量マーカー 2：粗精製のライセート 3：Fusion-Aid HA Kit レジンで溶出 4：従来の方法（粗精製のライセートにヤギ抗 HA ポ リ ク ロ ー ナ ル 抗 体 を 添 加 し， Protein A を用いて溶出） キット内容 45.0 ● Agarose beads coupled with affinity purified antibody to the 31.0 specific tag 21.5 ● Spin-column ● Collection tube 品 名 14.4 メーカー 商品コード 精製した His タグ融合タンパク質の CBB 染色像 図に示した 3 種類のタンパク質の N 末端に His タグを融合し，E. coli で発現させた。 E. coli 抽出液から His-Spin Protein Miniprep Kit を使用して精製し，15% 変性ポリ アクリルアミドゲルで電気泳動し，CBB 染色した。 キット内容 お問い合わせ先 ● Zymo-spin P1 column ● His binding buffer ● Collection tube ● His-wash buffer ● His-affinity gel ● His-elution buffer His-Spin Protein Miniprep Kit (10 purifications) ZYR P2001 1 kit / 38,000 1 kit / 38,000 1 kit / 38,000 1 kit / 38,000 Ni-NTA-Nanogold 品 名 メーカー 商品コード 包装 / 価格（￥） Fusion-Aid-GFP Kit, Vector VEC MB-0732 Fusion-Aid-HA Kit, Vector VEC MB-0734 Fusion-Aid-MBP Kit, Vector VEC MB-0731 Fusion-Aid-c-Myc Kit, Vector VEC MB-0733 包装 / 価格（￥） 1 kit / 11,000 金コロイド粒子にニッケルキレートを標識した製品です。His タグ融 合タンパク質を高感度に検出できます。金粒子の大きさが異なる２種類 の製品があります。 試薬 Affinity Matrix ＦＡＸ ０３ ５ - ６８４ １ - ７７５ ＴＥＬ ０３ ５ - ６８４ １ - ６２０ 各種エピトープタグに対するマウスモノクローナル抗体をセファロー ス ビ ー ズ に 固 定 し た も の で す。タ グ 融 合 タ ン パ ク 質 の 精 製 （immunopurification）に使用できます。 ＜製品群一例 > ・HA.11，Affinity Matrix（#AFC-101P） ・6-His，Affinity Matrix（#AFC-156P）など ※アガロースビーズに固定した製品もあります。 ※詳細は当社テクニカルサポート（欄外参照）までお問い合わせ下さい。 また，本紙 p.22 では，Covance 社の抗エピトープタグ抗体をご紹 介しています。併せてご覧下さい。 100400z_P12_k_i_x.indd 12 5 nm Ni-NTA-Nanogold の 構 造。ニ ッ ケ ル キ レ ー ト が His タグ融合タンパク質に結 合している。金粒子表面から His タグまでの距離は約 1.5 nm。 Ni-NTA-Nanogold NAN 2080 NAN 2082 1.8 nm 5 nm 30 nmol / 1.5 nmol / 67,000 77,000 ※詳細は， 『フナコシニュース 2010 年 4 月 1 日号』p.22 をご覧下さい。 2010/03/23 14:55:58
© Copyright 2024 ExpyDoc
