TR ● 基礎研究から臨床研究への橋渡し促進技術開発癌特異的抗原受容体改変Ｔ細胞の輸注とがんワクチンによる複合的がん免疫療法の研究開発 Development of Comprehensive Cancer Immunotherapy Utilizing Adoptive Transfer of Tumor-specific TCR-engineered T Cells and Cancer Vaccine 珠玖洋（三重大学大学院医学系研究科／教授） Hiroshi Shiku (Graduate School of Medicine, Mie University／Professor) Abstract Adoptive immunotherapy with tumor-specific T cells is a promising new strategy to treat patients with malignancy. To extend the application of adoptive immunotherapy of tumor, we planned clinical trials utilizing lymphocytes genetically engineered to express T cell receptor (TCR) specific to MAGE-A4 tumor antigen. In this trial, patients with advanced esophageal cancer receive the TCR-engineered T cells followed by the vaccination with antigen peptides. We developed two original retrovirus vectors (vectors A and B) encoding same MAGE-A4specific TCR, and planned to sequentially perform two clinical trials utilizing these vectors. To develop effective comprehensive immunotherapy, the improved methods for immunological evaluation and monitoring is indispensable. We planned to evaluate the positive and negative factors that modulate immunological regulation, and collect the important information for immunological evaluation of cancer immunotherapy. 1 事業概要本事業は、先端医療開発特区（スーパー特区）採択課題での「複合的がん免疫療法」開発を目指した、がん特異的な T 細胞輸注と T 細胞認識抗原のペプチドワクチンを合わせた新しい治療法の橋渡し研究である。がんに対する特異的 T 細胞輸注療法が、有効な新規治療法として強く期待されている。我々は現在の特異的 T 細胞輸注療法の課題である、適用可能な患者の限定、がん種の限定、正常細胞障害の可能性、等の克服を目指して、広範ながん種で発現し腫瘍特異性に優れた MAGE-A4 抗原を認識する T 細胞抗原受容体 (T Cell Receptor; TCR) 遺伝子を、レトロウイルスベクターを用いて治療対象がん患者の末梢血由来リンパ球に体外 (ex vivo) で遺伝子導入した後に、患者に輸注する治療法の開発を計画した。難治性食道癌 (MAGE-A4 陽性 ) を対象とし、TCR 改変リンパ球を拡大増殖後に患者に輸注し、その後、抗原ペプチドワクチンで輸注 T 細胞の体内 (in vivo) における活性化と増殖を促す革新的な治療法を開発する。同一の MAGE-A4 特異的 TCR を用いて、独自開発した 2 種類の遺伝子導入用レトロウイルスベクター（ベクター A 及びベクター B）の安全性と優位性を比較検証するべく、2 つの連続した First-In-Man 探索的臨床研究を行う。一方、がん免疫療法の免疫評価法はいまだ臨床効果を予測するに至っていない。「複合がんワクチン」の戦略的開発では、免疫動態を適切かつ多面的に評価することが必須であり、2 つの臨床研究に於ける輸注 T 細胞の特異的免疫応答と宿主内の正負の免疫制御につき詳細な免疫動態評価を行い、実用化と企業化に向けての重要な情報を得る。探索的臨床研究を実施後 2 年を目途に、治験を開始することを目指す。 2 主要な研究成果（１）ベクター A を用いた TCR 改変 T 細胞とペプチドワクチンによる First-In-Man 臨床研究 GMP に準じて製造したベクター A の 3 ロットの保存安定性試験を継続して行い、それぞれ 24 ～ 36 か月安定であることを確認した。GMP 製造を 2 ロット実施した。ベクター A を用いて作製した TCR 改変 T - 32 - 細胞が－ 80℃で 6 ヵ月、融解後 3 時間は安定であることを確認した。治療抵抗性食道癌での輸注細胞量増加試験で第 1 コホート 6 名、第 2 コホート 6 名の患者が登録された。このうち第 1 コホートの 3 名と第 2 コホートの 3 名は 1 次登録後の輸注用細胞調製中、または輸注後の病勢の悪化を認め、試験中止となった。試験実施 6 名（各々のコホート 3 名）全てにおいて、試験薬に関連すると考えられる重篤な有害事象は観察されず、また、増殖性レトロウイルス (RCR) は継続して陰性、LAM-PCR 検査においてもクローナリティーを認めていない。6 例全例において、輸注した TCR 改変 T 細胞が定量的 PCR 法によって高いレベルで末梢血中から長期に検出され、最も長期観察可能であった１症例においては輸注後 300 日を超えて、患者の生存期間を通して、輸注細胞維持を観察した。　（２）ベクター B を用いた TCR 改変 T 細胞とペプチドワクチンによる臨床研究開発高力価ウイルスを産生するクローンの MCB を作製し、3 ロットの製造を GMP に準拠して行い、品質試験はすべて合格であった。これまで一年保存のウイルスが安定であることを確認した。ベクター B を用いて、レトロネクチンと抗 CD3 抗体で刺激を与える培養法（レトロネクチン拡大培養法）で、TCR 改変 T 細胞の作製を実機スケール（テストラン）で行った。内在性 TCR に対する siRNA 発現ユニットをもつレトロウイルスベクター B を用いて遺伝子導入したリンパ球において、特有の細胞表面マーカー発現・減少は認められず、また、マイクロアレイによる遺伝子発現検討によっても特異的に発現上昇もしくは発現減少する遺伝子はないことを確認した。（３）免疫評価法の開発による新規 T 細胞療法の総合的評価樹状細胞腫瘍内投与 12 例で、IL-6、IL-8(CXCL8) の血中濃度と免疫誘導効果の関連性を検討し、治療前の IL-8 の血中濃度が高い症例は免疫誘導効果が認められず、治療前の IL-6、IL-8 の血中濃度が高い症例は予後不良であり、予後との関連が示された。ペプチドワクチン療法の検体でも IL-6、IL-8 が高い症例は抗腫瘍効果が認められず、IL-6 は CRP と正の相関、ALB と負の相関があり、IL-8 は LDH と正の相関が認められ、IL-6、IL-8 の濃度に依存して、免疫誘導効果･抗腫瘍効果の有無がグループ化された。３現在の取り組みと今後の展望現在、ベクター A を用いた TCR 改変 T 細胞輸注療法の開発については、臨床試験において第 2 コホートの終了を控えている。効果安全評価委員会の承認の後に第 3 コホートの治療を実施し、平成 24 年度中に臨床試験を終了する予定である。本臨床試験によりベクター A を用いた TCR 改変 T 細胞輸注の基本的な安全性の確認を得た後に、免疫調整性前処置を付加したプロトコールの臨床試験を実施し、輸注細胞のさらなる体内増殖と機能向上、および抗腫瘍効果の増強を目指す。また、ベクター B を用いた TCR 改変 T 細胞輸注療法の開発については多施設共同試験としての臨床試験実施について厚生労働省の承認を早期に得て、臨床試験開始を目指す。同時に、ベクター B を用いた TCR 改変 T 細胞輸注療法の実用化を目指した治験の準備をさらに進め、平成 25 年度末の治験開始を目指す。免疫評価法の開発については、今回治療実施前の血中 IL-6,IL-8 の濃度が症例の免疫抑制状況と強く相関しており、がん免疫療法の効果不良症例の指標となることが示唆された。今後、よりフェーズの進んだ臨床試験における、T 細胞輸注療法やがんワクチン療法実施患者の検体を用いて更なる検証を行う。今後、がん免疫療法の成否を予測するバイオマーカーのさらなる同定と検証により、適切な症例の選択、早期の治療効果の予測、より適切な治療法の変更等が可能になり、有効ながん免疫療法の実施が可能になることが期待される。 - 33 - TR ● 基礎研究から臨床研究への橋渡し促進技術開発 4 参考資料 ཧຍ᪋タ䛾ᙺ๭ศᢸ䞉ᐇ᪋యไ ᢠཎཷᐜయ(TCR)ᨵኚT⣽⬊㍺ὀ䛸䝨䝥䝏䝗䝽䜽䝏䞁䛻䜘䜛」ྜⓗච␿⒪ἲ 䝥䝏䝗䝽䜽䝏䞁䛻䜘䜛」ྜⓗච␿⒪ἲ ◊✲ィ⏬2 ⥲ྜච␿ືែホ౯ἲ㛤Ⓨ ◊✲ィ⏬䠍 ⣽⬊⒪ἲ⮫ᗋヨ㦂 TCR-T⣽⬊⒪ἲ⮫ᗋヨ㦂 ୕㔜኱ POC -CR SRL ៞ᛂ኱ 䝍䜹䝷䝞䜲䜸 ᳨య㍺㏦䝅䝇䝔䝮䛾ᵓ⠏䞉 ᳨య䛾 ᐃ䞉 ၟရ໬ ⣽⬊ㄪ〇䝉䞁䝍䞊䠎䛴䛾᪂つ䝺䝖䝻䜴䜲䝹䝇 ⮫ᗋヨ㦂 ච␿ືែホ౯ἲ 䝧䜽䝍䞊䛾㛤Ⓨ䞉 ஦ົᒁ ┘ᰝᴗົ 䛾㛤Ⓨ 〇㐀䚸⮫ᗋ⏝ ୕㔜኱Ꮫ ೃ⿵ศᏊ䛾㑅ᢥ 䝣䜯䜲䝤㑇ఏᏊᑟධ ៞ᛂ኱Ꮫ 䝸䜾䝸䞁䜾䝇 ච␿ືែホ౯ ⣽⬊స〇ἲ䛾䝍䜹䝷䝞䜲䜸䠎䛴䛾᪂つ㛤Ⓨ ⮫ᗋヨ㦂䛾ᐇ᪋ ☜❧䚸䝺䝖䝹䜴䜲䝹䝇䝧䜽䝍䞊䝰䝙䝍䝸䞁䜾 ከ᪋タ䝅䝇䝔䝮 ஦ᴗ䛾⟶⌮䚸䜢⏝䛔䛯㑇ఏᏊᑟධ䝸䞁䝟⌫ 䝁䞊䝕䜱䝛䞊䝅䝵䞁䛾ᵓ⠏ 䝉䝹䞊䝖䛾స〇〇๣ ᦙ㏦䝅䝇䝔䝮䛾ᵓ⠏ ⏘⥲◊ TCR-T ⣽⬊〇๣ ච␿ືែ ゎᯒ⏝᳨య 50ml᥇⾑ TCR T⣽⬊⮫ᗋヨ㦂ᐇ᪋ TCR-T⣽⬊⮫ᗋヨ㦂ᐇ᪋ ୕㔜኱ 㜰኱ 䝯䝕䜱䝕䝛䝑䝖 ᳨య䛾 ᐃ ᶆ‽ရ 䛾స〇 ච␿ᛂ⟅䛾 ⥙⨶ⓗゎᯒ 䝇䞊䝟䞊≉༊㛵㐃⮫ᗋヨ㦂ᐇ᪋ ᮐᖠ་኱ ᒸᒣ኱䠋 ᕝᓮ་⛉ ໭㔝⑓㝔 ᮾ኱ 㑇ఏᏊ⣽⬊⒪ἲᐇ᪋་ᖌ䝏䞊䝮 1 2 䠄䝧䜽䝍䞊䠝䛻㛵䛩䜛ᡂᯝ䠅䈜⮫ᗋ◊✲䛷ᐇ౑⏝ 㼇䝍䜹䝷䝞䜲䜸䚸୕㔜኱Ꮫ㼉 ಖᏑᏳᐃᛶヨ㦂㻟㼘㼛㼠ᐇ᪋䚸㻳㻹㻼〇㐀㻞㼘㼛㼠ᐇ᪋ 㼀㻯㻾ᨵኚ㼀⣽⬊䛾ಖᏑᏳᐃᛶヨ㦂㻟㼘㼛㼠ᐇ᪋ ື≀ᐇ㦂䛻䛶㼀⣽⬊㍺ὀ䠇䝨䝥䝏䝗䝽䜽䝏䞁䛾᭷ຠᛶ☜ㄆ ື≀ᐇ㦂 ⣽⬊㍺ὀ 䝨䝥䝗䜽 ᭷ຠᛶ☜ㄆ㍺ὀ㼀⣽⬊䛾䝬䝹䝏䝣䜯䞁䜽䝅䝵䝘䝸䝔䜱ཬ䜃㍺ὀ⣽⬊୰ 䛻㻯㻰㻠㻗㼀⣽⬊䛜Ꮡᅾ䛩䜛䛣䛸䛾㔜せᛶ☜ㄆ ⮫ᗋ◊✲7&5ᨵኚ7⣽⬊ㄪ〇㸸ࢥ࣮࣍ࢺ㸸౛ᐇ᪋ࠊࢥ࣮࣍ࢺ㸸౛ᐇ᪋ࠊ ඲࡚ရ㉁ヨ㦂ྜ᱁ 䠄䝧䜽䝍䞊㻮䛻㛵䛩䜛ᡂᯝ䠅䈜⮫ᗋ◊✲⏦ㄳ䝕䞊䝍䛸䛧䛶౑⏝ 㼇䝍䜹䝷䝞䜲䜸䚸୕㔜኱Ꮫ㼉㻹㻯㻮䛾స〇᏶஢䚸㻳㻹㻼〇㐀䞉ಖᏑᏳᐃᛶヨ㦂㻹㻯㻮䛾స〇᏶஢ 㻳㻹㻼〇㐀 ಖᏑᏳᐃᛶヨ㦂㻟㼘㼛㼠ᐇ᪋ 㼘㼠ᐇ᪋ 㼀㻯㻾ᨵኚ㼀⣽⬊䛾〇㐀᳨ウ䚸ヨ㦂〇㐀㻡㼘㼛㼠ᐇ᪋ 㼀㻯㻾ᨵኚ㼀⣽⬊䛾ಖᏑᏳᐃᛶヨ㦂 ᨵኚ ⣽⬊䛾ಖᏑᏳᐃᛶヨ㦂㻟㼘㼛㼠ᐇ᪋ ᐇ᪋ ᇵ㣴⣽⬊䚸ᐇ㦂ື≀䜢⏝䛔䛯ヨ㦂䛻䜘䜚⸆⌮άᛶ☜ㄆ ᐇ㦂ື≀䜢⏝䛔䛯Ᏻ඲ᛶヨ㦂ᐇ᪋ 㑇ఏᏊ἞⒪☜ㄆ⏦ㄳ࡟ྥࡅࡓ&0&ࢹ࣮ࢱ㸦Ᏻ඲ᛶࠊ᭷ຠᛶࠊရ㉁ࠊ୙⣧ ≀㸧ྲྀᚓ 㻺㻱㻰㻻䝥䝻䝆䜵䜽䝖䛾฿㐩┠ᶆ䛾㦵Ꮚ䛸ᡂᯝ 㻞✀䛾᪂つ䝺䝖䝻䜴䜱䝹䝇䝧䜽䝍䞊䠄䝧䜽䝍䞊㻭䛚䜘䜃䝧䜽䝍䞊㻮㻕䛻䜘䜛㻹㻭㻳㻱㻙㻭㻠⒴ᢠཎ≉␗ⓗ㼀㻯㻾䜈䛾ᨵኚ㼀⣽⬊㍺ὀ䛸䝨䝥䝏䝗䝽䜽䝏䞁䛻䜘䜛」ྜⓗ䛜䜣ච␿⒪ἲ䛾㼟㼠䛻䜘䜛」ྜⓗ䛜䜣ච␿⒪ἲ䛾㻲㼕㼞㼟㼠㻙㼕㼚㻙㻹㼍㼚⮫ᗋヨ㦂䛾‽ഛ䛸ᐇ᪋ 㼍 ⮫ᗋヨ㦂䛾‽ഛ䛸ᐇ᪋ ୖグ」ྜⓗ䛜䜣ච␿⒪ἲ䛾༢᪋タ䛚䜘䜃ከ᪋タ䛷䛾㐺ษ䛺⮫ᗋヨ㦂䝅䝇䝔䝮䛾☜❧䛸ᐇ᪋ ୖグ」ྜⓗ䛜䜣ච␿⒪ἲ䛾ᐇ⏝໬䚸⏘ᴗ໬䛾Ⅽ䛾㻳㻹㻼䝧䜽䝍 ୖグ」ྜⓗ䛜䜣ච␿⒪ἲ䛾ᐇ⏝໬ ⏘ᴗ໬䛾Ⅽ䛾㻳㻹㻼䝧䜽䝍䞊〇〇㐀ἲ䚸㼀⣽⬊ㄪ〇ἲ䚸䛭䜜䜙䛾ホ౯ἲ䚸⣽⬊ὶ㏻䝅䝇䝔䝮䛾☜❧䚸୪ 䜃䛻἞㦂䛻ྥ䛡䛶䛾つไᙜᒁ䛸䛾ヰ䛧ྜ䛔䛚䜘䜃ㄪᩚ ୖグ」ྜⓗ䛜䜣ච␿⒪ἲ䛾⥲ྜⓗච␿Ꮫⓗホ౯ἲ䛾๰ฟ䛸ホ౯᪉ ἲ䛾ᶆ‽໬ 3 4 㻹㻭㻳㻱㻙㻹㻭㻳㻱㻙㻭㻠㻭㻠≉␗ⓗ ≉␗ⓗ㼀㻯㻾㼀㻯㻾ᨵኚ ᨵኚ㼀㼀⣽⬊䛾㍺ὀ䛸䝨䝥䝏䝗䝽䜽䝏䞁䛻䜘䜛㐍⾜ᛶ㣗㐨⒴䛻ᑐ䛩䜛⮫ᗋヨ㦂䝥䝻䝖䝁䞊䝹 Number of vec ctor copie es (x 103 copies/105 cells䠅 Patient enrollment: ㍺ὀ⣽⬊䛿ᝈ⪅PBMC୰䛻⏝㔞౫Ꮡⓗ䛻᳨ฟ䛥䜜䜛 40 Advanced esophageal cancer Blood collection Mixture of CD4+ & CD8+ T cells Activation & TCR gene transfer (RetroNection) Day 0 TCR gene modified T cell administration Day 14 MAGE-A4 peptide administration Day 28 MAGE-A4 peptide administration Initial Follow up Day 63 Cohort 2 x 108 cells/body: 3 patients 1 x 109 cells/body: 3 patients 5 x 109 cells/body: 3 patients 35 Transferred cells Patient # TCRǦMAǦ102 30 䝁䝩䞊䝖䠍䠖 2x108/ body TCRǦMAǦ104 TCR MA 106 TCRǦMAǦ106 25 TCRǦMAǦ208 䝁䝩䞊䝖2䠖 1x109/body 20 TCRǦMAǦ210 TCRǦMAǦ209 15 10 5 0 0 10 20 30 40 50 6 60 70 Days after infusion of gene-modified cells Approved by the Ministry of Health and Welfare 5 6 ● 事業情報テーマ名癌特異的抗原受容体改変Ｔ細胞の輸注とがんワクチンによる複合的がん免疫療法の研究開発 Development of Comprehensive Cancer Immunotherapy Utilizing Adoptive Transfer of Tumor-speciﬁc TCR-engineered T Cells and Cancer Vaccine 実施期間平成２１年度～平成２４年度研究代表者珠玖　洋（国立大学法人三重大学　大学院医学系研究科　がんワクチン治療学／遺伝子・免疫細胞治療学／教授）委託先タカラバイオ株式会社、国立大学法人三重大学、学校法人慶應義塾 - 34 - ㍺ὀ⣽⬊䛿ᝈ⪅PBMC୰䛻㛗ᮇⓗ䛻⥔ᣢ䛥䜜䜛㍺ὀ⣽⬊䛿ᝈ⪅PBMC ୰䛻㛗ᮇⓗ䛻⥔ᣢ䛥䜜䜛 (Case: TCRTCR-MA MA--102) Peptide vaccine ⮫ᗋ◊✲⏝ච␿⣽⬊〇๣䛾〇㐀䞉ಖᏑ䞉ᦙ㏦䞉౪⤥䛾䝅䝇䝔䝮 CHP MAGE A4 protein CHP-MAGE-A4 t i vaccine i ୕㔜኱Ꮫ⣽⬊ㄪ〇᪋タ ⮫ᗋ◊✲᪋タ Numbe er of vecto or copies s (x 103 copies/10 05 cells䠅 7 Ch Chemotherapy th 6 5 4 3 2 1 Days after infusion of gene-modified cells 0 0 50 100 150 200 250 300 350 MAGE A4 ttetramer MAGE-A4 t analysis l i with ith in i vitro it sensitization iti ti with ith peptide tid 45.9% tetramer 21.0% 40.0% 31.0% CD8 7 8 ⮫ᗋ◊✲ᐇ᪋యไ䠄ከ᪋タ䠅䐠㻙㻞㻚 ⥲ྜⓗච␿ືែホ౯ἲ䛾㛤Ⓨ ᢡˡ‫ݰ܇‬λ㼀Ἴὅἣྶᆆλၲඥσӷܱ଀ἓ ἲ ᢡˡ‫ݰ܇‬λ㼀Ἴὅἣྶᆆλၲඥσӷܱ଀ἓὊἲ ⮫ᗋ◊✲⸆ရ㉁⟶⌮⪅ 䠄⮫ᗋ◊✲⸆ᥦ౪⪅䠅 ⌔⋪ ⋪ ὒ䠄་ᖌ䠅 ὒ ᖌ ⮫ᗋ◊✲௦⾲⪅ ⌔⋪ ὒ ⮫ᗋ◊✲⸆ 㸦࣌ࣉࢳࢻ㸧 ୕㔜኱Ꮫ ⮫ᗋ◊✲⸆ 㸦㑇ఏᏊᑟධ⣽⬊㸧 ୕㔜኱Ꮫ㻯㻼㻯 ⮫ᗋ◊✲⸆⟶⌮⪅ ụ⏣ ⿱᫂䠄་ᖌ䠅 ⮫ᗋ◊✲⸆⟶⌮⪅ ⌔⋪ ὒ䠄་ᖌ䠅〇㐀⟶⌮㈐௵⪅ ụ⏣ ⿱᫂䠄་ᖌ䠅 ရ㉁⟶⌮㈐௵⪅ ᙳᒣ ឵୍䠄་ᖌ䠅 ኬᏘь߻ 㑇ఏᏊᑟධ㼀䝸䞁䝟⌫ ㄪ〇ᢏ⾡䛾ᥦ౪䛸ຓゝ䠄䡼䡲䢓䢆䢚䡮䡱䠅 ຠᯝᏳ඲ᛶホ౯ጤဨ఍ ୕㔜኱Ꮫ ⥲ᣓ㈐௵⪅ ኱㜰኱Ꮫ ⥲ᣓ㈐௵⪅ ⮫ᗋ◊✲஦ົᒁ ୕㔜኱Ꮫ ⑕౛Ⓩ㘓ࢭࣥࢱ࣮ ࣔࢽࢱࣜࣥࢢ 㻰㻹㻛ゎᯒ࡞࡝ ච␿ࣔࢽࢱࣜࣥࢢጤဨ఍ ච␿ ࢱࣜࣥࢢጤဨ఍ ໭㔝⑓㝔 ⥲ᣓ㈐௵⪅ ච␿⒪ἲ⮫ᗋ◊✲⑕౛䛾⮫ᗋ᳨య䛾ゎᯒ ୕㔜኱Ꮫ 㑇ఏᏊ἞⒪ ⮫ᗋ◊✲ ᑂᰝጤဨ఍ ⥲ྜⓗච␿ືែホ౯ἲ㛤Ⓨ䛾䛯䜑䛾ྛ᪋タ䛻䛚䛡䜛೔⌮ጤဨ఍ᢎㄆ ྛ᪋タ⮫ᗋヨ㦂䛾ᢠ⭘⒆T⣽⬊ᛂ⟅(Elispot, ( p , HLA䝔䝖䝷䝬䞊➼䠅䛾 ᐃ ៞᠕኱᳨య䜢⏝䛔䛯䜿䝰䜹䜲䞁䞉䝃䜲䝖䜹䜲䞁ከ✀ᚤ㔞 ᐃἲ䛾☜❧ ኱㜰኱Ꮫ 㑇ఏᏊ἞⒪ ⮫ᗋ◊✲ ᑂᰝጤဨ఍ ྛ᪋タ⮫ᗋ᳨య䜢⏝䛔䛯䜿䝰䜹䜲䞁䞉䝃䜲䝖䜹䜲䞁䛾ゎᯒ ྛ᪋タ⮫ᗋ᳨య䜢⏝䛔䛯䜿䝰䜹䜲䞁䝃䜲䝖䜹䜲䞁䛾ゎᯒ 䠄50⑕౛䛷䛾᳨ウ䠅 • • ໭㔝⑓㝔㑇ఏᏊ἞⒪ ⮫ᗋ◊✲ ᑂᰝጤဨ఍ 䛜䜣⤌⧊䛾ච␿≧ែ䛸⾑୰䝃䜲䝖䜹䜲䞁䞉䜿䝰䜹䜲䞁䛾ゎᯒ䛷䛿䚸 CD3/CD8 T⣽⬊䚸FOXP3-Treg, CD68䝬䜽䝻䝣䜯䞊䝆䛾Ꮡᅾ䚸䛜䜣⣽⬊䛾HLA class I䛾ሙྜ䚸⾑୰IL6䜔IL8䛾䝃䜲䝖䜹䜲䞁䛜ప䛔ഴྥ䛒䜚䠄䛜䜣 ᒁᡤ⑓ែ䜢཯ᫎ䛧ᚓ䜛⾑୰䝃䜲䝖䜹䜲䞁䛾ྠᐃ䠅 ⬟ືච␿ἲ䠄ᶞ≧⣽⬊䚸䝨䝥䝏䝗䚸䝍䞁䝟䜽䠅䛷䛿䚸 •἞⒪๓IL6, IL-8(CXCL8)➼䛜㧗䛔⑕౛䛷䛿䚸ච␿ㄏᑟຠᯝ䜒ᢠ⭘⒆ຠᯝ䜒ᝏ䛔ྍ⬟ᛶ䛒䜚䠄ච␿ㄏᑟ䜔ᢠ⭘⒆ຠᯝ䜢ண 䛷䛝䜛䝃䜲䝖䜹䜲䞁䞉䜿䝰䜹䜲䞁䝞䜲䜸䝬䞊䜹䞊䛾ྠᐃ䠅 ܱ଀Ҕၲೞ᧙ ᢠཎⓎ⌧ุᐃ 㸦ච␿⤌⧊ᰁⰍἲ㸭㸦ච␿⤌⧊ᰁⰍἲ㸭㻼㻯㻾ἲ㸧 ἲ㸧 Multi-plexἲ䚸ELISAἲ䚸Alpha-screenἲ 䛷54✀䜢᳨ウ䚸 Multiplexἲ䜢୺䛺ゎᯒἲ䛸䛧䛶㑅ᢥ 㣴Ꮚච␿⒪ἲ䠄JGT⣽⬊䠅䛷䛿 •἞⒪๓IL6, IL8(CXCL8)➼䛜㧗䛔⑕౛䛷䛿䚸 ᢠ⭘⒆ຠᯝ䜒ᝏ䛔ྍ⬟ᛶ䛒䜚 •ᢞ୚JGT⣽⬊䛾⾑ᾮ୰䛷䛾Ꮡ⥆㔞(% JGT⣽⬊)䛸⾑୰IFN-J➼䛿┦㛵䛒䜚䠄ᢞ୚㔞䛜ከ䛡䜜䜀IFN-g᳨ฟྍ⬟䠅 •䝬䜴䝇T⣽⬊ᢞ୚䝰䝕䝹䛷䛾᳨ド䠄 ⣽⬊ 䝕䛜䜣⤌⧊䛷IFN-g䛿ୖ᪼䛧䛶䜒䚸T⣽⬊㔞䛜ከ䛟䛺䛔䛸⾑୰䛷䛾IFN-g䛾ୖ᪼䛿䜏䜙䜜䛺䛔䠅 ┘ᰝ •500᳨య㏣ຍ䛻䜘䜛 ᐃ⤊஢䚸ゎᯒ୰ ⾑୰䛾IL8䛾ୖ᪼䛜䚸ච␿ㄏᑟຠᯝ䜢ᢚไ䛧䛶䛔䜛ྍ⬟ᛶ䛜䛒䜛(௚䛾ᅉᏊ䛻䛴䛔䛶䛿ゎᯒ୰䠅 •ᨵኚTCR-T⣽⬊⒪ἲ 3⑕౛䛷䛾ゎᯒ䚸IL6䜔IL8䛿ඹ㏻ᛶ䛾ኚື䛜ㄆ䜑䜙䜜䛯 Ᏻ඲䞉ຠᯝホ౯䞉㐺ᛂุᐃ୰ኸ㒊఍䛾タ⨨ ҔࠖὉᄂᆮᎍỂẝỦσӷܱ଀ἓὊἲỆợỦᐯɼᐮ࠿ᄂᆮ 9 10 ఱ᫬䛷䜒ఱฎ䛷䜒䛖䛡䜛䛣䛸䛜䛷䛝䜛㑇ఏᏊᨵኚ㼀⣽⬊㍺ὀ⒪ἲ 㑇ఏᏊᨵኚ ⣽⬊㍺ὀ⒪ἲ ᐃᢏ⾡䛾㛤Ⓨ䛸ᨵⰋ zᢠ⭘⒆㼀⣽⬊䛾ゎᯒἲ䛾㛤Ⓨ䛸ᨵⰋ 9᪂つ⺯ග䝔䝖䝷䝬䞊䛾㛤Ⓨ 9㻹㻴㻯㻙㼏㼘㼍㼟㼟㻌㻵㻵㻌㻴㻸㻭䝔䝖䝷䝬䞊䛾㛤Ⓨ 㻔㻺㼅㻙㻱㻿㻻㻙㻵㻕 9ᢠ⭘⒆㼀⣽⬊ ᐃ䛾䛯䜑䛾㼕㼚 ᢠ⭘⒆㼀⣽⬊ ᐃ䛾䛯䜑䛾㼕㼚㻌㼢㼕㼠㼞㼛㻌㼀⣽⬊ㄏᑟἲ㻔ᢠཎ 㼢㼕㼠㼞㼛㼀⣽⬊ㄏᑟἲ㻔ᢠཎ䝨䝥䝏䝗䞊䝸䝫䝋䞊䝮䠅䝥䝏䝗䝸䝫䝋䝮䠅 Hub Cell-Processing Center Cell processing zᢠཎ䝇䝥䝺䝕䜱䞁䜾ゎᯒἲ䛾㛤Ⓨ z」ᩘᢠ⭘⒆T⣽⬊䛾ྠ᫬᳨ฟἲ䠖」ᩘᢠ⭘⒆ ⣽⬊䛾ྠ᫬᳨ฟἲ 6Ⰽ䝔䝖䝷䝬䞊ἲ䛾㛤Ⓨ Ⰽ䝔䝖䝷 ἲ䛾㛤Ⓨ Select vector 䠄MAGE-A4 䚸NY-ESO-1䚸XAGE-1b䚸p53䚸gp100䚸WT1䠅䠄ᝏᛶ㯮Ⰽ⭘䜢ᑐ㇟䛻䛧䛯4Ⰽ䛷䛾᳨ド䜢㛤 ጞ䠅 Receptor vector library Remote p hospital Gene modification z⭘⒆ᢠཎㄆ㆑⾑ΎIgGᢠయ䛾᳨ฟ z⤌᥮䛘ᢠཎ䝍䞁䝟䜽㉁䞊MultiͲplexἲ䛻䜘䜛 ᐃἲ䛾㛤Ⓨ 䠄ᐇ⏝ᛶ䛜᳨ド䛥䜜䛯䠅 z⥙⨶ⓗゎᯒἲ䛻䜘䜛ೃ⿵ᢠཎ䛾㑅ᢥ䛸ᛂ⏝ z Invitorogen䝍䞁䝟䜽䝏䝑䝥䛸 ⏘⥲◊䝏䝑䝥䠄FL&CTᢠཎ䠅䛻䜘䜛ゎᯒ䛸᭷⏝ᢠཎ䛾㑅ᢥ Coordination unit z㻹㼡㼘㼠㼕㼜㼘㼑㼤䜢⏝䛔䛯㼙㻾㻺㻭ゎᯒἲ䛾☜❧ 㼀⣽⬊䚸⭘⒆ᢠཎ䚸䝃䜲䝖䜹䜲䞁䛺䛹䛾ゎᯒ ᶆⓗ㑇ఏ ᶆⓗ㑇ఏᏊ䛾ቑᖜ䛺䛧䛻⣽⬊䜔⤌⧊⁐ゎᾮ䛛䜙┤᥋㼙㻾㻺㻭䜢 ᐃ ቑᖜ䛺 ⣽⬊ ⤌⧊⁐ゎᾮ䛛䜙┤᥋ 䜢 ᐃ Storage facility zHLA䝔䝖䝷䝬䞊䞉ELISPOT䛾ᶆ‽໬ HLA䝔䝖䝷䝬 ELISPOT䛾ᶆ‽໬ Oversea 9HLAͲA2ᣊ᮰ᛶMARTͲ1≉␗ⓗCTL䛾స〇䚸䛚䜘䜃๓㥑T⣽⬊䜢ከ㔞䛻ྵ䜐PBMC䛾ྠᐃ䛸ಖᏑ 9ྛ᪋タ䛻㓄ᕸ䛧ᶆ‽ရ䜢ホ౯/᳨ド䠄䝔䝖䝷䝬䞊ἲ䚸ELISPOTἲ䠅 11 12 ● 講演者連絡先三重大学　大学院医学系研究科　がんワクチン治療学／遺伝子・免疫細胞治療学〒 514-8507　三重県津市江戸橋２－１７４ TEL 059-232-1111（代表） 059-231-5187（直通） URL http://www. shikuken.jp/ - 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