FlowPRA法 - 日本組織適合性学会

日本組織適合性学会
第11回HLA・QCWS(抗体部門)
−検査方法別解析(FlowPRA法)−
ぱるるプラザ京都 6階 会議室C
国立循環器病センター 輸血管理室 山本 賢
FlowPRA実施施設:22施設
測定試薬
Screening classⅠ-IgG:22施設、IgM:7施設
classⅡ-IgG:19施設、IgM:6施設
Specific
classⅠ-IgG+IgM:1施設
Single Antigen classⅠ Group1-4:8施設
1-8:4施設
1-10:3施設
classⅡ Group1-4:5施設
測定機器
ベクトンデッキンソン:13施設
ベックマンコールター:9施設
オーソ:1施設
FlowPRA IgG
ラボコード
1901
1902
1903
1904
classⅠ
classⅡ
classⅠ
classⅡ
classⅠ
classⅡ
classⅠ
classⅡ
19S001
0.89
17.76
32.73
0.71
99.63
1.27
56.85
1.25
19S002
0.3
1.1
28.7
0.8
86.4
0.3
49.6
0.9
19S003
50.9
1.92
31.91
1.61
97.54
1.7
55.47
4.16
19S005
3.9
1.4
31.7
0.4
98.5
0.6
53.2
0.3
19S006
3.44
4.17
28.46
1.23
98.23
2.11
52.92
1.93
19S007
4
2
32
1
100
1
60
1
19S008
6
4
33
1
100
1
67
1
19S012
1.82
1.28
32.12
0.47
99.75
0.9
55.57
0.47
19S014
1.8
0.5
25
0.1
75
0.3
49
0.1
19S016
1.74
3.45
32.18
0.22
97.3
0.37
51.4
0.34
19S018
2.2
0.6
25.2
0.6
94.9
0.4
53.7
0.6
19S020
0.62
0.32
23.82
0.19
90.47
0.24
44.03
0.17
19S022
9.24
NT
28.3
NT
93.9
NT
65.8
NT
19S023
1
0.4
37.6
0.8
95.6
0.6
86.5
2
19S024
1.4
0.54
20.69
0.32
98.77
0.73
42.58
0.59
19S027
2.02
1.16
30.23
0.43
99.82
89.16
60.32
1.49
19S028
1
NT
25.7
NT
98.9
NT
56.2
NT
19S029
27.5
14.1
33.5
0.5
99.3
0.3
65.4
2.3
19S032
8.64
18.18
32.05
1.65
99.61
5.57
66.11
5.05
19S036
4.26
0.25
33.23
3.01
99.14
10.36
80.16
5.54
19S038
3.77
NT
25.04
NT
95.51
NT
52.44
NT
19S040
9.9
27.9
17.7
0.3
90.1
0.6
38.6
0.6
赤字>平均+SD
青字<平均+SD
NT:not test
1901
4
8
6
4
2
2
0
0
8
8
6
6
1904
2
2
0
0
19S001
19S002
19S003
19S005
19S006
19S007
19S008
19S012
19S014
19S016
19S018
19S020
19S022
19S023
19S024
19S027
19S028
19S029
19S032
19S036
19S038
19S040
classⅠ
19S001
19S002
19S003
19S005
19S006
19S007
19S008
19S012
19S014
19S016
19S018
19S020
19S022
19S023
19S024
19S027
19S028
19S029
19S032
19S036
19S038
19S040
1903
4
19S001
19S002
19S003
19S005
19S006
19S007
19S008
19S012
19S014
19S016
19S018
19S020
19S022
19S023
19S024
19S027
19S028
19S029
19S032
19S036
19S038
19S040
8
19S001
19S002
19S003
19S005
19S006
19S007
19S008
19S012
19S014
19S016
19S018
19S020
19S022
19S023
19S024
19S027
19S028
19S029
19S032
19S036
19S038
19S040
FlowPRA classⅠ+Ⅱ-IgG
classⅡ
6
1902
4
各施設によるカットオフ設定の違い
HLA抗体有無の一致率
血清
HLA classⅠ
HLA classⅡ
1901 90.9%(20/22) 94.7%(18/19)
1902 95.5%(21/22)
100%(19/19)
1903
100%(22/22)
100%(19/19)
1904
100%(22/22)
100%(19/19)
5
1
1901
Single Antigen
Group1
4
19S036
19S015
19S005
19S002
19S001
3
2
Group6
19S005
1
0
A1
A2
A3
0
B49 A25 A29 A30 A26
5
B53 B54 B56 B58 B59 B61 B63 B64
1
5
Group2
4
4
19S036
19S015
19S005
19S002
19S001
3
2
Group4
Group7
19S036
19S015
19S005
19S002
19S001
3
2
1
19S005
1
0
A26 A11 A34 A24 A32 A33 A31 A23
0
5
0
B38 B57
B7
B52 B27
B8
B65 B55
B67 B81 B72 B73 B75 B76 B77 B78
1
1
Group3
4
19S036
19S015
19S005
19S002
19S001
3
2
Group5
Group8
19S005
19S005
1
0
B51 B13 B18 B35 B62 B45 B60 B44
0
0
B37 B39 B41 B42 B46 B47 B48 B50
A36
A43
A80
B8201
4
8
Group1
7
1902
Single Antigen
19S036
19S024
19S016
19S015
19S012
19S005
19S002
19S001
6
5
4
3
2
1
A1
A2
A3
1
B49 A25 A29 A30 A26
8
7
Group2
19S036
19S024
19S016
19S015
19S012
19S005
19S002
19S001
6
5
4
3
2
1
7
Group4
6
19S036
19S024
19S016
19S015
19S012
19S005
19S002
19S001
5
4
3
2
1
0
A26 A11 A34 A24 A32 A33 A31 A23
8
3
B38 B57
B7
B52 B27
B8
Group7
19S024
19S012
19S005
19S001
2
1
0
B67 B81 B72 B73 B75 B76 B77 B78
B65 B55
4
7
4
Group3
19S036
19S024
19S016
19S015
19S012
19S005
19S002
19S001
6
5
4
3
2
1
0
B53 B54 B56 B58 B59 B61 B63 B64
4
8
0
19S024
19S012
19S005
19S001
2
0
0
Group6
3
B51 B13 B18 B35 B62 B45 B60 B44
3
Group5
19S024
19S012
19S005
19S001
2
1
0
3
Group8
19S024
19S012
19S005
19S001
2
1
B37 B39 B41 B42 B46 B47 B48 B50
0
A36 A66 A43 A74 A80 B71 B8201 A69
4
8
Group1
7
1903
Single Antigen
19S036
19S024
19S016
19S015
19S012
19S005
19S002
19S001
6
5
4
3
2
1
A1
A2
A3
1
B49 A25 A29 A30 A26
8
7
Group2
19S036
19S024
19S016
19S015
19S012
19S005
19S002
19S001
6
5
4
3
2
1
7
Group4
6
19S036
19S024
19S016
19S015
19S012
19S005
19S002
19S001
5
4
3
2
1
0
A26 A11 A34 A24 A32 A33 A31 A23
8
3
B38 B57
B7
B52 B27
B8
Group7
19S024
19S012
19S005
19S001
2
1
0
B67 B81 B72 B73 B75 B76 B77 B78
B65 B55
4
7
4
Group3
19S036
19S024
19S016
19S015
19S012
19S005
19S002
19S001
6
5
4
3
2
1
0
B53 B54 B56 B58 B59 B61 B63 B64
4
8
0
19S024
19S012
19S005
19S001
2
0
0
Group6
3
B51 B13 B18 B35 B62 B45 B60 B44
3
Group5
19S024
19S012
19S005
19S001
2
1
0
3
Group8
19S024
19S012
19S005
19S001
2
1
B37 B39 B41 B42 B46 B47 B48 B50
0
A36 A66 A43 A74 A80 B71 B8201 A69
4
8
Group1
7
1904
Single Antigen
19S036
19S024
19S016
19S015
19S012
19S005
19S002
19S001
6
5
4
3
2
1
A1
A2
A3
19S024
19S012
19S005
19S001
2
1
0
0
Group6
3
B49 A25 A29 A30 A26
B53 B54 B56 B58 B59 B61 B63 B64
4
8
7
Group2
19S036
19S024
19S016
19S015
19S012
19S005
19S002
19S001
6
5
4
3
2
1
0
7
Group4
6
19S036
19S024
19S016
19S015
19S012
19S005
19S002
19S001
5
4
3
2
1
A26 A11 A34 A24 A32 A33 A31 A23
0
8
B38 B57
B7
B52 B27
B8
B65 B55
3
Group7
19S024
19S012
19S005
19S001
2
1
0
B67 B81 B72 B73 B75 B76 B77 B78
4
4
7
Group3
19S036
19S024
19S016
19S015
19S012
19S005
19S002
19S001
6
5
4
3
2
1
0
8
B51 B13 B18 B35 B62 B45 B60 B44
Group5
3
19S024
19S012
19S005
19S001
2
Group8
19S024
19S012
19S005
19S001
2
1
1
0
3
0
B37 B39 B41 B42 B46 B47 B48 B50
A36 A66 A43 A74 A80 B71 B8201 A69
1901
1
0
C w1 Cw2 Cw 10 Cw9 Cw4 Cw5 C w6 C w7
1902
3
3
2
2
2
1
1
1
0
C w1 Cw2 Cw 10 Cw9 Cw4 Cw5 C w6 C w7
19S001
C w8 Cw 12Cw 14Cw 15Cw 16C w17C w 18C w 10
19S005
Group10
19S005
0
19S012
C w1 Cw2 Cw 10 Cw9 Cw4 Cw5 C w6 C w7
19S001
Group9
Group9
0
1904
3
19S005
1
1903
19S005
0
19S012
19S001
Group9
3
3
2
2
2
1
1
1
C w8 Cw 12Cw 14Cw 15Cw 16C w17C w 18C w 10
19S001
19S005
Group10
19S012
0
C w8 Cw 12Cw 14Cw 15Cw 16C w17C w 18C w 10
19S001
19S005
19S012
Group10
19S005
19S012
Group9
3
0
C w1 Cw2 Cw 10 Cw9 Cw4 Cw5 C w6 C w7
0
C w8 Cw 12Cw 14Cw 15Cw 16C w17C w 18C w 10
19S001
19S005
19S012
Group10
Single Antigenサイトグラム
1903 HLA-classⅠ Group2
1903 HLA-classⅠ Group1
8
1
8
8
8
1
1
1
6
1
6
8
8
4
4
4
1903 HLA-classⅡ Group1
negative serum
1903 serum
8
1
8
8
8
4
4
4
1
6
1
8
8
1
1
8
6
8
2
8
8
4
8
8
1903 HLA-classⅡ Group2
negative serum
1903 serum
4
8
1
8
8
1
4
8
1
1
ClassⅠ-IgM Single
1901
19S012
0
A1
A2
A3
19S012
0
B49 A25 A29 A30 A26
1
19S012
0
B67 B81 B72 B73 B75 B76 B77 B78
1
19S012
1
0
A26 A11 A34 A24 A32 A33 A31 A23
19S012
1
0
A36 A66 A43 A74 A80 B71 B8201 A69
1
B37 B39 B41 B42 B46 B47 B48 B50
19S012
19S012
0
0
B51 B13 B18 B35 B62 B45 B60 B44
1
1
Cw1 C w2C w 10C w9 Cw4 C w5 C w6 Cw7
1
19S012
19S012
19S012
0
0
B38 B57
B7
B52 B27
B8
B65 B55
B53 B54 B56 B58 B59 B61 B63 B64
0
Cw8C w 12C w 14C w 15Cw 16C w 17C w 18Cw 10
FlowPRA IgM
ラボコード
1901
1902
1903
1904
classⅠ
classⅡ
classⅠ
classⅡ
classⅠ
classⅡ
classⅠ
classⅡ
19S005
84.6
0.9
1.8
0.6
24.4
5.2
16.5
23.4
19S006
51.68
1.72
0.91
0.87
31.93
90.62
1.26
2.03
19S012
85.26
1.5
1.78
0.83
39.39
59.73
13.03
5.79
19S014
40
3
0.5
0.4
67
98
1
3
19S027
60.43
NT
0.92
NT
87.63
NT
5.83
NT
19S032
60.64
5.93
1.21
1.76
70.94
63.64
2.59
5.56
19S038
58.02
NT
2.9
NT
54.92
NT
4.22
NT
赤字>平均+SD
青字<平均+SD
NT:not test
HLA抗体有無の一致率
血清
HLA classⅠ
HLA classⅡ
1901
100%(7/7)
100%(5/5)
1902
100%(7/7)
100%(5/5)
1903
100%(7/7)
80.0%(4/5)
1904
100%(7/7)
80.0%(4/5)
2
2
0
0
4
4
2
2
0
0
4
1904
19S027
19S032
19S038
19S032
19S038
4
19S027
6
19S014
6
19S014
8
19S012
8
19S012
6
19S006
6
19S006
1902
8
19S005
19S038
19S032
19S027
19S014
19S012
19S006
19S005
1901
8
19S005
19S038
19S032
19S027
19S014
19S012
19S006
1903
19S005
FlowPRA classⅠ+Ⅱ-IgM
classⅠ
classⅡ
まとめ
FlowPRA Screening test
1.HLA抗体の有無についてIgGおよびIgMでそれぞれ4、2施設で、判定結果が不一致であった。
HLA抗体の判定結果は、患者に直接不利益を与える可能性があるため、早急に抗体有無の
判定結果を全施設で一致させる必要があると思われる。
また、19S018の施設については、判定結果は一致しているものの、ヒストグラム(HG)の全貌
が見えておらず、正しく機器設定ができていないと思われる。
2.昨年同様、%PRAに施設間で差が認められたため、施設間差を少なくするために統一した
基準を決める必要がある。
%PRAをスコア化することで施設間差は少なくなったが、1904の検体(classⅠ-IgG抗体)では
スコアにおいても施設間で差が認められた。
3.同一測定機種においても差が認められるため(各施設によりパラメータの違い)、機器調整も
含め、同一ロットのキットおよびnegative controlでの実施も考える必要があると思われる。
FlowPRA Single Antigen test
1.特異性については、判定結果はほぼ一致していたが、1904血清において、検出できている
抗体に若干のばらつきが認められた。
2.Single Antigenにおいても、Screeningと同様に統一したリージョンの設定を決める
必要がある。